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HPLC 法测定L-羟基脯氨酸的含量

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　　摘要：两年前的三聚氰胺事件让家长们仍心有余悸，近日"皮革奶"的消息又让人谈奶色变。皮革水解蛋白就是利用动物已经废弃的皮革制品或者甚至是动物的毛发，把它们进行水解之后制成粉状，然后再混入到牛奶当中，来提高其中的蛋白质的含量。因L-羟脯氨酸为胶原蛋白中的特有组分，而乳蛋白中不含有此成分，可依次来判断牛奶中是否含有L-羟脯氨酸。本文使用异硫氰酸苯酯(PITC)衍生法对L-羟基脯氨酸进行了含量测定和方法学验证。实验结果表明，采用RIGOL L-3000 高效液相系统进行L-羟基脯氨酸的含量测定，能完全满足检测要求，方法准确、灵敏可靠。

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RIGOLBeyond Measure文档编号：LC-AR-0304002应用报告 HPLC 法测定L-羟基氨氨酸的含量摘要：两年前的三聚氰胺事件让家长们仍心有余悸，近日"皮革奶"的消息又让人谈奶色变。皮革水解蛋白就是利用动物已经废弃的皮革制品或者甚至是动物的毛发，把它们进行水解之后制成粉状，然后再混入到牛奶当中，来提高其中的蛋白质的含量。因L-羟脯氨酸为胶原蛋白中的特有组分，而乳蛋白中不含有此成分，可依次来判断牛奶中是否含有L-羟脯氨酸。本文使用使硫氰酸苯酯(PITC)衍生法对L-羟基脯氨酸进行了含量测定和方法学验证。实验结果表明，采用 RIGOL L-3000 高效液相系统进行L-羟基脯氨酸的含量测定，能完全满足检测要求，方法准确、灵敏可靠。关键词：L-羟基脯氨酸、HPLC 色谱条件及谱图：仪器： RIGOL L-3000高效液相色谱仪色谱柱： RIGOL Compass C18， 5um，4.6mmx250 mm 柱温：室温流动相：50mmol乙酸钠水溶液(乙酸调PH=6.50)/乙腈梯度洗脱检测波长：254nm 流速：1.0mL/min 进样体积： 10uL [mAu Time 图1.L-羟基脯氨酸对照品的色谱图结论：本文中测试结果，检出限为 0.05ug/mL，定性重复性 0.575%，定量重复性1.511%，线性范围为1.04ug/mL~15.63ug/mL (r=0.999)。所有测试结果完全满足L-羟基脯氨酸检测要求。且仪器基线稳定，噪音小。

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