固相萃取方法中原理、应用等检测方案(固相萃取仪)

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Cleanert ODS C18-N(未封端) Cleanert PRS(丙磺酸) 目 录 第一章固相萃取(SPE)技术介绍 -- --01 ，固相萃取概念及基本原理--- - --- --- 01 ，固相萃取方法的优点…… - - - - -01 固相萃取装置及基本操作步骤2------ .--02 第二章常用固相萃取材料 --05 ，固相萃取填料分类…… 05e 常见固相萃取填料介绍 ------06 ，热点应用新产品-.----- --33 第三章固相萃取方法的建立……. 43 ●确立萃取的目的…-- 43 初步固相萃取方法的建立…… -44 固相萃取方法的优化....... ------48 第四章应用 ---.51 一、常用应用中SPE柱的选择…...- 51 (一)农残、食品领域常用SPE柱及其应用 -------.51 (二)兽残(组织、饲料)领域常用SPE柱及其应用 --51 (三)环境领域常用SPE柱及其应用 ----52 (四)医药领域常用SPE柱及其应用 --52 二、应用实例 52 (一)食品中农残 固 相 萃 取 方 法 -52 ●蔬菜水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药 多残留检测方法(NY/T 761-2004 Florisil， P/N：FS0006)52 蔬菜、水果中51种农药多残留的测定气相色谱-质谱法NY/T 1380-2007(P/N： NY/T 1380-2007)·----53 乙酰甲胺磷净安及分析方法(Cleanert PEP， P/N： PE0603) 54●吡喹酮前处理及分析方法(Cleanert PEP， P/N： PE0603)·-- --55 ·胺苯磺隆前处理及分析方法(Cleanert PAX，P/N： AX0603) -56 烟嘧磺隆前处理及分析方法(Cleanert PAX， P/N：AX0603)· --57 阿特拉津前处理及分析方法(Cleanert PEP， P/N： PE0603) --58 (二)食品或生物基体中兽药残留的固相萃取方法…-- 59 ，动物组织中盐酸克伦特罗的测定气相色谱-质谱法.(Cleanert SCX， P/N： SC5006)----m---59 盐酸克伦特罗前处理及分析方法(Cleanert PCX， P/N： CX0603) ------- --60 沙丁胺醇前处理及分析方法(Cleanert PCX， P/N： CX0603)- -61 猪肉中五种磺胺药物的检测(Cleanert SUL-5， P/N：SUL-5)· 62 三聚氰胺样品前处理及检测方法(Cleanert PCX， P/N： CX0603) ------- -64 鱼肉中孔雀石绿的分析方法(Cleanert PCX， P/N： CX0603).- ----66(三)环境中有机物的固相萃取方法… ---67 ●水中酚类的检测(Cleanert PEP， P/N： PE5006)… --(67 ，高效液相色谱质谱法测定土壤中10种磺酰脲类除草剂多残留69 (Cleanert HXN， P/N： HX0301)…...... 纺织品中禁用偶氮染料的测定GB/T 17592-2006(P/N： GB/T 17592-2006)..--- - -- --.- -72 (四)医药领域固相萃取方法实例-.. 73 ，人体血清中的吴茱萸碱，吴茱萸次碱的SPE净化及检测(Cleanert C18， P/N：182003)….. . 73 固相萃取法测定血清中的药物成分(Cleanert PEP，P/N：PE0603)--- - --- -- -- -- ---75 HPLC法测定人血浆中舒必利浓度及其人体药动学和相对生物利用度研究(Cleanert C18， P/N： 181001) .. -- -- - - - --76 牛血清中对乙酰氨基酚的提取净化方法 (Cleanert PEP， PCX P/N： PE0603，CX0603) .--77 第一章固相萃取(SPE)技术介绍 一、固相萃取概念及基本原理： 固相萃取(Solid Phase Extraction， 简称SPE)是从八十年代中期开始发展起来的一项样品前处理技术。由液固萃取和液相色谱技术相结合发展而来。主要通过固相填料对样品组分的选择性吸咐及解吸过程，实现对样品的分离，纯化和富集。主要目的在于降低样品基质干扰，提高检测灵敏度。 固相萃取的基本原理和方法： SPE 技术基于液-固相色谱理论，采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进行富集、分离、纯化，是一种包括液相和固相的物理萃取过程；；1也可以将其近似的看作一种简单的色谱过程。 固相萃取(SPE)是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理。较常用的方法是使液体样品通过一吸附剂，保留其中被测物质，再选用适当强度溶剂冲去杂质，，然后用少量良溶剂洗脱被测物质，从而达到快速分离净化与浓缩缩目的。也可选择性吸附干扰杂质，而让被测物质流出；或同时吸附杂质和被测物质，再使用合适的溶剂选择性洗脱被测物质。 二、固相萃取方法的优点 相对于传统的液液萃取法和蛋白沉淀法，固相萃取具有无可比拟的优势： 净化方法 优点 缺点 LLE (液液萃取) 无需特殊装置和材料 1.操作繁琐，费时 2.需要耗费大量的有机溶剂，导致高成本和对环境的污染 3.难以从水中提取高水溶性物质 PPT (蛋白沉淀) 操作简单，无需特殊装置 1.非特异性的沉淀反应可能使微量的分析物随着基质蛋白质共同沉淀而损失2.净化效果较弱，检测灵敏度和可靠性低 SPE (固相萃取) 1.集样品富集及净化与一身，提高检测灵敏度的最佳方法2.比液液萃取更快，节省溶剂3.可自动化批量处理 4.重现性好 1.使用进口固相萃取小柱的成本较高2.需要专业人员协助方法开发 三、固相萃取装置及基本操作步骤 1.固相萃取柱 1)SPE小柱 图1SPE柱的结构 关于固相萃取小柱： a.常见的固相萃取柱分为三部分：医用聚丙烯柱管，多孔聚丙烯筛板(20um)和填料(多为40-60pm， 80-100pm) (见图1)。 b.常用规格：：1100mg/1ml，200mg/3ml，500mg/3ml，1g/6ml等。!以100mg/1ml为例其中100mg为填料的质量，1ml是空柱管的体积。 C..一次性使用：：为避免交叉污染，保证检测可靠性， SPE柱通常是一次性使用的2)96孔板 96孔板是高通量的SPE产品，每孔含少量吸附剂(10-100mg)，样品载量约2ml/孔(见图2)主要用于生物，，医药等行业小量的多样品的净化处理。且多与自动化的样品处理处理装置连用(如Tomtec液体处理工作站)。其基本原理和使用方法与SPE柱相似。 96孔板SPE详细定货 图296孔板 1)真空SPE装置(SPE Vacuum Manifolds)组成：玻璃缸，真空压力表，真空泵真空缓冲瓶，，收收集管架，小柱连接头，大体积取样器，12位或24位防交叉污染装置(见图3)。 ·标配StopCock阀，精确控制流速 ，试管架高度可调，满足不同体积需要。压力表放空阀侧面设计，使用方便 ·设计紧凑、经久耐用、性价比高 规格 订货号 价格 12位 M0401001 6500.00 24位 M0401002 11000.00 2)自动化固相萃取装置 a.医药/环保/刑事鉴定中自动样品前处理 b.自动进行固相萃取/可多组份收集 c.无人为影响，无乳化，节省溶剂 d.高回收率，高重现性，高效率适用于各种商品萃取柱 e.自动记录资料，便于GLP管理 f.特别适合于HPLC或LC/MS的样品处理 g.价格较高 图4自动化固相萃取装置 3.基本操作步骤 针对填料保留机理的不同(填料保留目标化合物或保留杂质)，操作稍有不同。 1)填料保留目标化合物 固相萃取操作一般有四步(见图5)： ●活化――除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境。 ●上样――将样品用一定的溶剂溶解，，转移入柱并使组分保留在柱上。 淋洗――最大程度除去干扰物。 ●，洗脱一―用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。 图5固相萃取操作步骤 2)填料保留杂质 固相萃取操作一般有三步： 活化――除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境。 上样――将样品转移入柱，此时大部分目标化合物会随样品基液流出，杂质被保留在柱上。故此步骤要开始收集。 ●洗脱――用小体积的溶剂将组分淋洗下来并收集。合并收集液。此种情况多用于食品或农残分析中去除色素。 第二章常见的固相萃取填料 一、固相萃取填料分类： 目前常见的填料按填料类型共分为4类： 1.键合硅胶：C18(封端)，C18-N(未封端)，C8，CN，NH，， PSA， SAX， COOH，PRS， SCX， Silica， Diol。 在SPE中最常用的吸附剂是硅胶或键合相的硅胶即在硅胶表面的硅醇基团上键合不同的官能团。其pH适用范围2-8。键合硅胶基质的填料种类较多，具有多选择性的优点。 2.高分子聚合物：：FPEP， PAX， PCX， PS， HXN. 上世纪90年代末，为扩大反相固相萃取材料的适用范围和改善吸附平衡性，并高重现性，以极性官能化高分子树脂为主体的新型反相固相萃取材料问世了。此类填料是以乙烯吡咯烷酮和二乙烯萃共聚得到的高分子聚合物，由于吡咯烷酮材性官能团的引入，这类萃取柱对各类极性、非极性化合物具有均衡的吸附作用。克服了传统C18柱存在的缺点。。((详见第19页) 此类填料的代表产品有：：Cleanert PEP， Oasis HLB， C(leanert PCX， Oasis MC)Cleanert PAX， Oasis MAX等。 3.吸附型填料：Florisil(硅酸镁)， PestiCarb(石墨化碳)，氧化铝(Alumina-N中性Alumina-A酸性； Alumina-B碱性)。 4.混合型及专用柱系列： PestiCarb/NH， SUL-5(磺胺专用柱) HXN(磺酰脲除草剂专用柱) DNPH-Silica(空气中醛酮类化合物检测专用柱) 固相萃取填料按保留机理分为： 正相： Silica， NH，， CN， Diol， Florisil， Alumina ·反相： C18，C8，Ph， C4，NH，，CN，PEP， PS等 ·离子交换： SCX， SAX， COOH，NH，等 混合型： PCX，PAX， C8/SCX等 二、常见固相萃取填料介绍： 1.键合硅胶为基质的固相萃取柱填料：： C18(封端)，C18-N(未封端)，C8， CN，NH，PSA， SAX， COOH， PRS， SCX， Silica， Diol， 均采用高品质，高纯度硅胶，并在键合前经艾杰尔科技独特的表面工艺处理后，使硅胶的表面活性大为降低最大程度的降低了极性化合物的不可吸附和拖尾，使样品的回收率和重现性得到了保障。平均粒度：： 45um，平均孔径：： 60A，孔体积：0.8cm²/g，比表面：480m²/g. Cleanert ODS C18(封端) 产品介绍： Cleanert ODS C18(封端)是以硅胶为基质的反相C18萃取柱。具有高键合密度，低流失，高回收率等特点。相当于BondElute C18， Super clean ENVIC18。 基质指标： 硅胶基质，平均粒度： 45um；平均孔径：60A；孔体积：0.8cm²/g； 比表面：480m²/g应用：a.血液，血浆，尿液中药物及其代谢物 b.蛋白，[DNA大分子样品的脱盐 c.环境水样中有机物的富集 d. 饮料中有机酸的分离 e.与反相液相色谱柱的相似行为 具体如：抗菌素，巴比妥酸盐，酞嗪，咖啡因，，药物，染料，芳香油，脂溶性维生素，杀真菌剂，锄草剂，农药，碳水化合物，对羟基甲苯酸取代酯，苯酚，令苯二甲酸酯，类固醇，表面活化剂，茶碱，.水溶性维生素等的提取净化。 使用方法：.请参考第46页(不同机理的固相萃取方法(1)反相) 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 181001 1180.00 200mg/3ml 50 182003 690.00 500mg/3ml 50 185003 790.00 500mg/6ml 30 185006 550.00 1000mg/6ml 30 180006 660.00 10g/瓶 180010 190.00 100g/瓶 180100 1600.00 50mg/2ml/well 96孔板 180502-W 1680.00 100mg/2ml/well 96孔反 181002-W 1880.00 产品介绍： Cleanert ODS C18-N(未封端)产品是以硅胶为基质的未封端的反相C18萃取柱。 表面较多的硅醇官能团提供了额外的极性相互作用。同时与封端的吸附剂相比，增强了对碱性化合物的保留。是极性和非极性化合物萃取的通用型固定相。相当于Aglient AccuBond C18， BondElute C18 OH. 基质指标： 硅胶基质，平均粒度：45um；平均孔径：60A；孔体积：0.8cm²/g；比表面：480m²/g应用： 应用类似于Cleanert ODS C18. 使用方法：.请参考第46页(不同机理的固相萃取方法(1)反相) 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 181001-N 1180.00 200mg/3ml 50 182003-N 690.00 500mg/3ml 50 185003-N 760.00 500mg/6ml 30 185006-N 530.00 1g/6ml 30 180006-N 630.00 10g/瓶 180010-N 180.00 100g/瓶 180100-N 1500.00 50mg/2ml/well 96孔板 180502-N-W 1680.00 100mg/2ml/well 96孔反 181002-N-W 1880.00 Cleanert C8 (辛基) 产品介绍： Cleanert C8在吸附性上与C18键合相类似，主要靠非极性碳键相互作用。但由C8碳键较C18短，所以对非极性化合物保留弱于C18，有助于对非极性吸附过强的样品的洗脱。C8小柱可以从血浆中同时萃取脂溶性和水溶性维生素，也常用生物大分子样品脱盐。 基质指标： 硅胶基质，-平均粒度：45um；平均孔径：60A；孔体积：0.8cm²/g；比表面：480m²/g应用： a.血液，血浆，尿液中药物及其代谢物的提取 b. 血浆中同时萃取脂溶性和水溶性维生素 c.生物大分子样品脱盐 使用方法：.请参考第46页(不同机理的固相萃取方法(1)反相) 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 081001 1180.00 200mg/3ml 50 082003 690.00 500mg/3ml 50 085003 850.00 500mg/6ml 30 085006 590.00 1g/6ml 30 080006 790.00 10g/瓶 080010 200.00 100g/瓶 080100 1800.00 50mg/2ml/well 96孔板 080502-W 1680.00 100mg/2ml/well 96孔板 081002-W 1880.00 Cleanert CN (氰基) 产品介绍： Cleanert CN SPE产品是以硅胶为基质的氰丙基萃取柱。具有中等极性，可用于反相或正相萃取。 基质指标： 硅胶基质，平均粒度：45pm；平均孔径：60A；孔体积：0.8cm²/g；比表面：480m²/g。应用： a.药物及药物代谢物的提取 b.农药的提取 具体如：抗菌素，，染料，锄草剂，农药，苯酚，类固醇 使用方法：请参考第46页(不同机理的固相萃取方法(1)反相或(2)正相)订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 CN1001 1180.00 200mg/3ml 50 CN2003 690.00 500mg/3ml 50 CN5003 850.00 500mg/6ml 30 CN5006 590.00 1g/6ml 30 CN0006 790.00 10g/瓶 CN0010 200.00 100g/瓶 CN0100 1800.00 50mg/2ml/well 96孔板 CN0502-W 1680.00 100mg/2ml/well 96孔反 CN1002-W 1880.00 Cleanert NH， (氨基) 产品介绍： Cleanert NH， 是以硅胶为基质的氨丙基萃取柱。。它具有极性固定相和弱阴离子孔换剂，可通过弱阴离子交换(水溶液)或极性吸附(非极性有机溶液)达到保留作用因此具有双重作用。当用在非极性溶液中(如正己烷)进行预处理时，它能与带有-OH，--NH或-SH官能团的分子形成氢键。氨基pKa=9.8；与阳离子的作用较SA)弱，在pH<7.8水溶液中，可用做弱阴离子交换剂。 基质指标： 硅胶基质，平均粒度：45pm；平均孔径：60A；孔体积：0.8cm²/g；比表面：480m²/g。应用： a.可以用来分离结构异构体 b.可用于去除样品中的磺酸根离等强阴离子 使用方法：请参考第46、47页(不同机理的固相萃取方法(1)反相，(2)正相或(4)阴离子交换) 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 NH1001 1180.00 200mg/3ml 50 NH2003 690.00 500mg/3ml 50 NH5003 760.00 500mg/6ml 30 NH5006 530.00 1g/6ml 30 NH0006 630.00 10g/瓶 NH0010 180.00 100g/瓶 NH0100 1500.00 50mg/2ml/well 96孔板 NH0502-W 1680.00 100mg/2ml/well 96孔板 NH1002-W 1880.00 Cleanert PSA 产品介绍： Cleanert PSA是与NH，相似的吸附剂。PSA有两个氨基，2卜pKa值分别为10.1和10.9。有比NH，柱更强的离子交换能力。同时PSA可与金属离子产生鳌合作用，用于提取金属离子。 基质指标： 硅胶基质，平均粒匀：45pm；平均孔径：60A；孔体积：0.8cm²/g；比表面：480m²/g。应用： 用于农残分析中样品的前处理，去除有机酸，色素，，金属离子和酚类等。 使用方法：请参考第47页(不同机理的固相萃取方法(一)(4)阴离子交换或(二)附剂保留杂质) 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 PA1001 1180.00 200mg/3ml 50 PA2003 890.00 500mg/3ml 50 PA5003 1390.00 500mg/6ml 30 PA5006 890.00 1g/6ml 30 PA0006 1780.00 10g/瓶 PA0010 360.00 100g/瓶 PA0100 2800.00 50mg/2ml/well 96孔板 PA180502-W 1680.00 100mg/2ml/well 96孔板 PA181002-W 1880.00 Cleanert SAX (季胺盐) 产品介绍： Cleanert SAX(强阴离子交换萃取柱)：是以硅胶为基质的强阴离子交换萃取柱，键合有季胺盐官能团。主要用于弱阴离子型化合物的萃取，如羧酸等。这种强离子交换剂可用于从水和非水溶液中萃取带有负电荷的化合物，最适合于弱酸的提取。相当于BondElute SAX. 基质指标： 硅胶基质，平均粒度：45um；平均孔径：60A；孔体积：0.8cm²/g；比表面：480m²/g.应用： a.用于除掉样品中的强阳离子(磺酸根，无机离子) b.生物大分子脱盐。 如：有有机酸，核酸，核苷酸，，表面活化剂 订购信息： 使用方法：：请参考第47页(不同机理的固相萃取方法(一)(4)阴离子交换或(二) 附剂保留杂质) 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 SA1001 1180.00 200mg/3ml 50 SA2003 890.00 500mg/3ml 50 SA5003 1390.00 500mg/6ml 30 SA5006 890.00 1g/6ml 30 SA0006 1780.00 10g/瓶 SA0010 360.00 100g/瓶 SA0100 2800.00 50mg/2ml/well 96孔反 SA0502-W 1680.00 100mg/2ml/well 96孔板 SA1002-W 1880.00 Cleanert COOH 产品介绍： Cleanert COOH是以硅胶为基质的弱阳离子交换萃取柱。键合官能团为羧基，pKa=3.8. 基质指标： 硅胶基质，平均粒度： 45pm；平均孔径：60A；孔体积：0.8cm²/g；比表面：480m²/g应用： 相当于BondElute CBA。用于季胺盐类化合物或其它强阳离子的萃取。 使用方法：。请参考第47页(不同机理的固相萃取方法(3)阳离子交换) 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 CH1001 1180.00 200mg/3ml 50 CH2003 690.00 500mg/3ml 50 CH5003 790.00 500mg/6ml 30 CH5006 590.00 1g/6ml 30 CH0006 790.00 10g/瓶 CH0010 760.00 100g/瓶 CH0100 6900.00 50mg/2ml/well 96孔板 CH0502-W 1680.00 100mg/2ml/well 96孔板 CH1002-W 1880.00 产品介绍： Cleanert PRS是以硅胶为基质的强阳离子交换萃取柱。键合官能团为丙基磺酸，酸性略低于SCX(苯磺酸)。 基质指标： 硅胶基质，平均粒度： 45pm；平均孔径：60A；孔体积：0.8cm²/g；比表面：480m²/g。应用： a.用于萃取弱阳离子，如吡啶等，有很高的回收率。 b.广泛用于孔雀石绿的样品前处理。 使用方法：请参考第47页(不同机理的固相萃取方法(3)阳离子交换) 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 PR1001 1180.00 200mg/3ml 50 PR2003 990.00 500mg/3ml 50 PR5003 1800.00 500mg/6ml 30 PR5006 1080.00 1g/6ml 30 PR0006 1800.00 10g/瓶 PR0010 420.00 100g/瓶 PR0100 3600.00 50mg/2ml/well 96孔板 PR0502-W 1680.00 100mg/2ml/well 96孔板 PR1002-W 1880.00 Cleanert SCX (苯磺酸) 产品介绍： Cleanert SCX是以硅胶为基质的强阳离子交换萃取柱，键合有苯磺酸官能团。 基质指标： 硅胶基质，平均粒度： 45um；平均孔径：60A；孔体积： 0.8cm²/g；比表面：480m²/g。应用： a.用于萃取有机碱类化合物或用于生物大分子脱盐 b.用于与C18混合后萃取有机碱。如：抗菌素，药物，氨基酸，，儿茶酚胺，锄草剂，核酸碱，核苷，表面活化剂 使用方法：请参考第47页(不同机理的固相萃取方法(3)阳离子交换) 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 SC1001 1180.00 200mg/3ml 50 SC2003 890.00 500mg/3ml 50 SC5003 1390.00 500mg/6ml 30 SC5006 890.00 1g/6ml 30 SC0006 1780.00 10g/瓶 SC0010 360.00 100g/瓶 SC0100 2800.00 50mg/2ml/well 96孔板 SC0502-W 1680.00 100mg/2ml/well 96孔反 SC1002-W 1880.00 产品介绍： Cleanert Silica是以未键合硅胶为吸附剂的极性萃取柱。呈弱酸性，有很强的极基质指标： 硅胶基质，·平均粒度： 45pm；平均孔径：60A；孔体积： 0.8cm²/g；比表面：480m²/g应用： a.用于分离非极性，.弱极性化合物，油脂等，特别是结构相似的上述物质b.用于弱阳离子化合物的萃取 使用方法：请参考第46页(不同机理的固相萃取方法(2)正相) 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 SI1001 1180.00 200mg/3ml 50 SI2003 590.00 500mg/3ml 50 SI5003 690.00 500mg/6ml 30 SI5006 590.00 1g/6ml 30 SI0006 690.00 10g/瓶 SI0010 120.00 100g/瓶 SI0100 1000.00 50mg/2ml/well 96孔板 SI0502-W 1680.00 100mg/2ml/well 96孔反 SI1002-W 1880.00 Cleanert Diol (二醇基) 产品介绍： Cleanert Diol 以硅胶为基质的二醇基萃取柱。通过极性作用，从非极性溶液中萃取极性样品，在于样品产生氢键作用的性质方面，与未键合的硅胶相像，并且与硅胶小柱一样可以区别结构异构体等结构相似的化合物。此外还可以用于非极性状态，因为其键合相上的碳链可以提供足够的非极性作用力来保留疏水性样品。 基质指标： 硅胶基质，平均粒度：45um；平均孔径：60A；孔体积：0.8cm²/g；比表面：480m/g应用： a.用于区分结构异构体等结构相似的化合物 b. 疏水性样品提取，如可用其从尿样等溶液中提取THC等 使用方法：.请参考第46页(不同机理的固相萃取方法(2)正相) 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 50mg/1ml 100 DI0501 1430.00 100mg/1ml 100 DI1001 1480.00 500mg/3ml 50 DI5003 1270.00 500mg/6ml 30 DI5006 1050.00 1g/6ml 30 DI0006 1163.00 10g/瓶 DI0010 800.00 100g/瓶 DI0100 Inquiry 50mg/2ml/well 96孔板 DI0502-W 1680.00 100mg/2ml/well 96孔板 DI1002-W 1880.00 2.高分子聚合物固相萃取填料： PEP，PAX， PCX， HXN， PS，是以聚苯乙烯/二乙烯苯为基质的固相萃取填料，具有高纯度，高比表面的特点。因而具有比硅胶基质更强的吸附性。PS是未改性的聚苯乙烯/二乙烯苯，属于非极性萃取场料；PEP是改性的聚苯乙烯/二乙烯苯，极性强，相当于Waters Oasis HLB。HXN的极性介于PS和PEP之间，是为磺酰脲除草剂的提取专门开发的极性萃取填料，也可用于其他极性或非极性化合物的提取，富集和净化。平均粒度：35pm，平均孔径：80A，比表面：：6600m²/g。 由于吡咯烷酮极性官能团的引入，这类萃取柱对各类极性、非极性化合物具有衡吸附作用，克服了传统C18柱存在的以下缺点： 传统硅胶基质的反相填料(C18)的缺点： ·对极性化合物保留不足――药物及代谢产物难以同时提取 ·对碱性化合物回收不足――强硅羟基相互作用 ●小柱跑干――不浸润，不吸附 ――操作过程中需要仔细控制 E回收率低，重现性差 Cleanert PEP 产品介绍： Cleanert PEP(Polar-Enhanced Polymer)官能化聚苯乙烯/二乙烯苯萃取柱。表面同时具有亲水性和憎水性基团，从而对各类极性，非极性化合物具有较均衡的吸附作用。pH使用范围为1-14。其吸附能力和样品容量远高于C18于合硅胶(3-10倍)。基质指标： 以聚苯乙烯/二乙烯苯为基质，·，平均粒度：35um；平均孔径：80A；比表面：600m²/g应用： a..可广泛用于各种化合物的提取，. 富集和净化 b. 强亲水性化合物的提取，如多氯苯酚，磷酸酯，药物代谢物等许多在C18难以得到保留的，在PEP上仍有较好的回收率。 a.相当于Waters Oasis HLB 使用方法： 1)活化：1柱管体积的甲醇，1柱管体积的水溶液(如30mg/1ml的PEP小柱即用1ml甲醇，1ml水进行活化) 2)上样：调整提取液的pH值使目标组分呈分子形式，，然后转移至小柱。 3)淋洗：1柱管体积的水或1柱管体积的5%甲醇水溶液。 4)洗脱： 1柱管体积的甲醇。 应用实例： 1)萃取物： CHOD. P-NHCOCH. C H NO，PS CHO. Clenbuteral 盐酸克伦特罗 Acephate 乙酰甲胺磷 C Albuterol 沙丁胺醇 2)结果： Cleanert PEP和Waters Oasis HLB小柱对强极性化合物都表现了良好的效果，回收率如下： 分析物 PEP HLB Atrazine (阿特拉津) 86.9% 89.0% Acephate(乙酰甲胺磷) 92.0% 83.2% Praziquantel(吡喹酮) 97.0% 94.0% Clenbuteral(盐酸克伦特罗) 112.7% 95.7% Albuterol (沙丁胺醇) 99.6% 102.1% 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 30mg/1ml 100 PE0301 1710.00 60mg/1ml 100 PE0601 1980.00 60mg/3ml 100 PE0603 2070.00 150mg/6ml 30 PE1506 1320.00 500g/6ml 30 PE5006 1800.00 10g/瓶 PE0010 900.00 100g/瓶 PE0100 Inquiry 30mg/2ml/well 96孔板 PE0302-W 1680.00 50mg/2ml/well 96孔板 PE0502-W ：1880.00 Cleanert PAX 产品介绍： Cleanert PAX是以强阴离子交换、混合机理水可浸润型聚合物为基质的萃取小柱pH使用范围1-14。相当于Waters Oasis MAX. 基质指标： 以聚苯乙烯/二乙烯苯为基质，平均粒度： 35um；平均孔径：80A；比表面：600m²/g应用： 用于提取生物基质中的酸性化合物及其代谢产物。相当于Waters Oasis MAX。使用方法： 1)活化： 1柱管体积的甲醇，1柱管体积的碱性水溶液(如30mg/1ml的PAX小柱即用1ml甲醇，11ml1%氨水进行活化) 2)上样：：碱性溶液中上样。 3)林洗：分以下两步骤进行： A：1柱管体积的水或1柱管体积的2~5%NH，OH(根据杂质酸度的不同B：1柱管体积的甲醇。 4)洗脱：1柱管体积的2~5%乙酸甲醇溶液(100%甲醇+2~5%乙酸)。 应用实例： 1)萃取物： Ethametsulfuron-methyl 胺苯磺隆 Nadifloxacin 诺氟沙星 2)结果： 分析物 PAX MAX Ethametsulfuron(胺苯磺隆) 85.0% 82.0% Nadifloxacin (诺氟沙星) 52.8% 62.2% 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 30mg/1ml 100 AX0301 1900.00 60mg/1ml 100 AX0601 2200.00 60mg/3ml 100 AX0603 2300.00 150mg/6ml 30 AX1506 1710.00 500g/6ml 30 AX5006 2200.00 10g/瓶 AX0010 900.00 100g/瓶 AX0100 Inquiry 30mg/2ml/well 96孔板 AX0302-W 1680.00 50mg/2ml/well 96孔反 AX0502-W 1880.00 产品介绍： Cleanert PCX是以水可浸润型聚合物为基质的阳离子交换和反相混合机理的萃萃柱。提供双重保留模式：即离子交换与反相保留。其保留作用发生在一个洁净，稳定，具有大表面积的有机共聚物上，填料在pH 0-14范围内都很稳定，且具有很大的结合容量。 基质指标： 以聚苯乙烯/二乙烯苯为基质，·，平均粒度：35um；平均孔径：80A；比表面：600m²/g应用： 常用于需要高吸附量的提取生物基质(如血浆，尿液，胆汁及组织匀浆)中的碱性化合物。相当于Waters Oasis MCX. 使用方法： 1)活化： 1柱管体积的甲醇，1柱管体积的酸性水溶液(如30mg/1ml的PEP小柱即用1ml甲醇，1ml水进行活化) 2)上样：酸性溶液中上样。 3)淋洗：分以下两步骤进行： A：1柱管体积的水或1柱管体积的0.1N HCI。 B：1柱管体积的甲醇。 4)洗脱： 1柱管体积的2~5%氨化甲醇溶液(100%甲醇+2~5%NHOH).应用实例： 1)萃取物： Clenbuteral 盐酸克伦特罗 Albuterol 沙丁胺醇 2)结果： 分析物 PCX MCX Clenbuteral(盐酸克伦特罗) 79.9% 88.5% Albuterol(沙丁胺醇) 82.4% 84.0% 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 30mg/1ml 100 CX0301 1900.00 60mg/1ml 100 CX0601 2200.00 60mg/3ml 100 CX0603 2300.00 150mg/6ml 30 CX1506 1460.00 500g/6ml 30 CX5006 2000.00 10g/瓶 CX0010 900.00 100g/瓶 CX0100 Inquiry 30mg/2ml/well 96孔板 CX0302-W 1680.00 50mg/2ml/well 96孔反 CX0502-W 1880.00 Cleanert HXN 产品介绍： Cleanert HXN为中等极性高分子，磺酰脲类专用柱官能化苯乙烯/二乙烯苯萃取柱。极性略小于PEP。 基质指标： 以聚苯乙烯/二乙烯苯为基质，-平均粒度： 35um；平均孔径： 80A；比表面：600m²/g. 应用：a.专用于土壤和水中磺酰脲类除草剂 (sulfonylurea herbicides) 样品的制备。 b.用于各种中等极性到强极性化合物的提取，富集和净化。 使用方法： 1)提取：称取风风后过20目筛的土壤10.00g于50ml具塞离心管中，加入提取液(pH7.8，，0.2M磷酸缓冲液：甲醇(8：2，V/V))10ml，，涡旋3min，超声波振荡5min，12离心10min(4000r/min)，重复提取3次，合并上清液。85%磷酸调节pF值至2.5，待净化。 2)净化：SPE柱先用5ml甲醇浸泡活化30min，淋洗，，再用5ml提取液，85%磷酸调节pH值至2.5后预淋洗，上样，流速控制在1ml/min，样品过完后，抽真空10min最后用3ml乙腈： pH7.8磷酸缓冲液(9：1，'V/V)洗脱，，收集洗脱液N，吹定容至1ml。订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 30mg/1ml 100 HX0301 1710.00 60mg/1ml 100 HX0601 1980.00 60mg/3ml 100 HX0603 2070.00 150mg/6ml 30 HX1506 1320.00 500g/6ml 30 HX5006 1800.00 10g/瓶 HX0010 900.00 100g/瓶 HX0100 Inquiry 30mg/2ml/well 96孔板 HX0302-W 1680.00 50mg/2ml/well 96孔板 HX0502-W 1880.00 3.吸附型填料：Florisil (硅酸镁)， PestiCarb(石墨化碳碳黑)，氧化铝(Alumina-N中性； Alumina-A酸性；Alumina-B碱性)。主要通过表面的吸附作用达到提纯的目的。Cleanert吸附填料经过严格控制的活化处理，具有高净化效果，高回收率和高重现性等优良特性，已广泛应用于食品中有机物的前处理。典型的应用包括家喻户晓的苏丹红，孔雀石绿的样品前处理。 Cleanert Florisil 产品介绍：Cleanert Florisil是一种高选择性的吸附剂。这种吸附剂主要有三种成分组成，二二氧化硅(84%)，氧化镁(15.5%)和硫酸钠(0.5%)。是一一效果良好，成本经济剂常用固相萃取填料。 基质指标：吸附型填料，平均孔径：80A；比表面：291m²/g。 应用：a.特定为AOAC， EPA等方法设计，用于农药残留的净化、分离等。 b.内分泌物及油脂的清除。 C.PCBs，PAHs， 烃类中含氮化合物和抗生素物质的分离等，为NY761分析方法中必备的样品前处理小柱。 使用方法：请参考第47页((二)吸附剂(填料)保留杂质) 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 FS1001 1080.00 200mg/3ml 50 FS2003 500.00 500mg/3ml 50 FS5003 650.00 500mg/6ml 30 FS5006 500.00 1g/6ml 30 FS0006 650.00 10g/瓶 FS0010 100.00 100g/瓶 FS0100 800.00 50mg/2ml/well 96孔板 FS0502-W 1680.00 100mg/2ml/well 96孔板 FS1002-W 1880.00 产品介绍： Cleanert PestiCarb采用新型碳黑材料(球形)为填料，具有高净化效果，，高回收和高重现性等优良特性，广泛应用于农残分析中，特别是蔬菜水果等色素含量软高的样品的前处理中。 基质指标：吸附型填料，粒度：120um-400um。 应用：a.用于农残分析中动植物有机提取液的净化 b.去除水果蔬菜中的色素 使用方法：请参考第47页((二)吸附剂(填料)保留杂质) 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 PC1001 2535.00 250mg/3ml 50 PC2503 1435.00 200mg/3ml 50 PC2003 1435.00 250mg/6ml 30 PC2506 1035.00 500mg/3ml 50 PC5003 2400.00 500mg/6ml 30 PC5006 1445.00 1g/6ml 30 PC0006 2320.00 1g/10ml 20 PC00010 1550.00 2g/10ml 20 PC00020 2615.00 10g/瓶 PC0010 520.00 100g/瓶 PC0100 Inquiry 50mg/2ml/well 96孔板 PC0502-W 1680.00 100mg/2ml/well 96孔反 PC1002-W 1880.00 产品介绍： Cleanert Alumina N 中性氧化铝萃取柱(pH=7.5)；强极性吸附剂。表面呈中性易保留杂环类(含氮，，磷，硫基)，芳香烃和有机胺等富电化合物。经过特殊去处理，以保证样品的前处理。 基质指标： 吸附型填料，粒度：150pm；平均孔径：58A。 应用： a.广泛用于苏丹红和孔雀石绿的样品前处理 b.维生素，抗菌素，芳香油，酶，糖苷，激素 使用方法：请参考第47页((二)吸附剂(填料)保留杂质) 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 AL1001-N 1080.00 200mg/3ml 50 AL2003-N 520.00 500mg/3ml 50 AL5003-N 690.00 500mg/6ml 30 AL5006-N 520.00 1g/6ml 30 AL0006-N 690.00 10g/瓶 AL0010-N 150.00 100g/瓶 AL0100-N 1200.00 50mg/2ml/well 96孔反 AL0502-N-W 1680.00 100mg/2ml/well 96孔反 AL1002-N-W 1880.00 Cleanert Alumina A (酸性氧化铝) 产品介绍： Cleanert Alumina A 酸性氧化铝萃取柱(pH=4.5)，可作为强极性吸附和中等阳离交换剂。经过特殊去活处理，以保证样品的回收率。 基质指标： 吸附型填料，粒度：150um；平均孔径：58A. 应用： a.原油的萃取 b.可做为中等阳离子交换剂 使用方法：请参考第47页((二)吸附剂(填料)保留杂质) 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 AL1001-A 1080.00 200mg/3ml 50 AL2003-A 520.00 500mg/3ml 50 AL5003-A 690.00 500mg/6ml 30 AL5006-A 520.00 1g/6ml 30 AL0006-A 690.00 10g/瓶 AL0010-A 150.00 100g/瓶 AL0100-A 1200.00 50mg/2ml/well 96孔板 AL0502-A-W 1680.00 100mg/2ml/well 96孔反 AL1002-A-W 1880.00 产品介绍： Cleanert Alumina B 碱性氧化铝萃取柱(pH=10)，经过特殊去活处理，以保证样回收率。 基质指标： 吸附型填料，，粒度：150um；平均孔径：58A。 应用： 可用于除去有机酸，酚类等 使用方法：请参考第47页((二)吸附剂(填料)保留杂质) 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 AL1001-B 1080.00 200mg/3ml 50 AL2003-B 520.00 500mg/3ml 50 AL5003-B 690.00 500mg/6mL 30 AL5006-B 520.00 1g/6mL 30 AL0006-B 690.00 10g/瓶 AL0010-B 150.00 100g/瓶 AL0100-B 1200.00 50mg/2ml/well 96孔板 AL0502-B-W 1680.00 100mg/2ml/well 96孔板 AL1002-B-W 1880.00 4.。混合型和专用柱系列：C8/SCX，Pesticarb/NH，，SUL-5，DNPH-Silica。 Cleanert C8/SCX 产品介绍： 以硅胶为基质的C8和强阳离子交换 (SCX) 萃取柱(C8/SCX)，最常用于从尿液利血液样品中萃取碱性(阳离子)药物，也可以有效的从各种水溶液基质中萃取一系列化合物。 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 50mg/3ml 50 CS0503 900.00 130mg/3ml 50 CS1303 960.00 300mg/3ml 50 CS3003 980.00 500mg/6ml 30 CS5006 910.00 1g/6ml 30 CS0006 990.00 10g/瓶 CS0010 800.00 100g/瓶 CS0100 Inquiry 50mg/2ml/well 96孔板 CS0502-W 1680.00 100mg/2ml/well 96孔板 CS1002-W 1880.00 三、热点应用新产品： PestiCarb/NH. 产品介绍： PestiCarb/NH，：由等量的石墨化碳(PestiCarb) 和氨基 (NH，)装填而成，广泛应用于农产分析中，特别是日本肯定列表中的一些农药的检测。 应用： 主要用于农残分析中色素、脂肪酸及酚类的去除，特别是茶叶中有机磷的提取。样品前处理方法：乙腈：甲苯=3：1预淋洗；上样后，乙腈：甲苯=3：1洗脱。 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 500mg/500mg/6ml 30 PN0006 1890.00 背景： “肯定列表制度”是日本为加强食品中农业化学品残留管理而采取的一项新举举于2006年5月29日起执行。在该制度下，日本对所有农业化学品(个别豁免物质除外)在所有食品中的残留均制定了严格的限量要求：：对于日本认为有科学依据的则制定限量要求，对无科学依据的物质则采用0.01mg/kg的一律标准。对未列出的加工食品，如干燥蔬菜、浓缩果汁等，则算为鲜样进行判定。对于日本认为有科学依据的具体限量指标，我们经过加工整理后建立了数据库，共有数据671条。其中现行标准10118条；暂定标准56752条；其他标准为270条。涉及农业学品794个，食品254个。 专用SPE 柱-Cleanert SUL-5(磺胺专用柱) 产品介绍： Cleanert SUL-5(磺胺专用柱)以碱性氧化铝为原料，经过特殊工艺处理，用于NY5029-2001方法中五种磺胺类药物[磺胺二甲基嘧啶(SM2)、磺胺间甲氧嘧啶(SMM)、磺胺甲唑(SMZ)磺胺二甲氧嘧啶(SDM)、磺胺喹啉(SQ)]前处理，经实验证明柱保留留收率均在95%左右，回收率均可达到90%以上。 应用： 用于动植物组织中磺胺药物的检测。本产品应用于猪肉中五种磺胺的提取(两个添加浓度，六个重复处理)，回收率良好。方法见NY 5029-2001附录E。样品前处理方法如下： a.柱平衡：95%乙腈5ml b.上样：95%乙腈样品溶液3ml c.预淋洗：95%乙腈5ml d.洗脱：70%乙腈10ml 猪肉中五种磺胺药物回收率实验结果 猪肉中五种磺胺回收率(Cleanert SUL-5柱) 猪肉中五种磺胺回收率(Cleanert SUL-5柱) 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 2g/10ml 20 SUL-5 1890.00 产品介绍： Cleanert DNPH-Silica气体样品采集管利用衍生剂DNPH(2，4-二硝基苯肼)与羰化合物中的羰基专一性反应，生成的衍生物再经过色谱分离。主要用于车内、室内空气中醛酮类污染物的采集。 14种醛酮的DNPH衍生物经Cleanert DNPH-Silica加样回收后， 经Venusil XBP-C18色谱柱分离后的典型色谱图 产品介绍： Cleanert Plus SPE采用了经粒径优化的填料，，新型筛板材料和设计以及独特的预活化工艺，使用时具有快速、简便和可靠的优良特性。可节省1/3的工作量和免粘稠样品可能带来的柱子堵塞的常见问题。使样品前处理更简单、更快速、夏省心、更放心。 柱流速稳定，抗堵塞： 使用球形填料或粒度分布均匀的无定形填料，保证了流速的均一性，同时新的筛板材料设计保证粘稠样品的流速，避免粘稠/较脏样品造成的柱堵塞。 反相柱免活化： 采用新的填料表面处理技术和产品预活化工艺；免去了反相柱使用时的活化步步可节省1/3的工作。 正相柱预除水： 采用特殊设计，，预除水，保证了萃取效果。 1) Cleanert C18-N Plus SPE：经预活化处理的SPE柱，客户使用时可直接上在不影响回收率的情况下，节省近1/3的时间。 Cleanert C18-N使用方法和回收率 Cleanert C18-N Plus使用方法和回收率 a.5ml甲醇，5ml甲醇一异丙醇(1：1)活化 b.5ml水平衡 c.上样：2ml样品 上样：2ml样品 (土霉素Mcllvaine buffer-EDTA溶液) (土霉素Mcllvaine buffer-EDTA溶液) d.水淋洗，抽干 水淋洗，抽干 e.3ml甲醇洗脱 3ml甲醇洗脱 f.N，吹干，2ml流动相溶解，过滤膜， N，吹干，2ml流动相溶解，过滤膜， 供HPLC分析 供HPLC分析 g. 平均回收率：83.8% 平均回收率：88.4% 1)小鼠血清中土霉素SPE-HPLC分析；；汤流速及回收率的测定 Cleanert PEP使用方法和回收率 Cleanert PEP Plus使用方法和回收率 h.上样：2ml样品(含土霉素10 ppm的 h.上样：2ml样品(含土霉素10 ppm的 小鼠血清)；32分钟 小鼠血清)；5分钟 i.水淋洗，抽干 i.水淋洗，抽干 j.3ml甲醇洗脱 j.3ml甲醇洗脱 k.N，吹干，2ml流动相溶解，过滤膜， k.N，吹干，2ml流动相溶解，过滤膜， 供HPLC分析 供HPLC分析 1.平均回收率：83.2% 1.平均回收率：81.4% 订购信息： 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 181001-P 1420.00 200mg/3ml 50 182003-P 830.00 500mg/3ml 50 185003-P 950.00 500mg/6ml 30 185006-P 660.00 1000mg/6ml 30 180006-P 790.00 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 181001-N-P 1420.00 200mg/3ml 50 182003-N-P 830.00 500mg/3ml 50 185003-N-P 950.00 500mg/6ml 30 185006-N-P 660.00 1g/6ml 30 180006-N-P 790.00 规格 包装(支/包) 订货号 价格 30mg/1ml 100 PE0301-P 2052.00 60mg/1ml 100 PE0601-P 2376.00 60mg/3ml 100 PE0603-P 2484.00 150mg/6ml 30 PE1506-P 1584.00 500g/6ml 30 PE5006-P 2160.00 规格 包装(支/包) 订货号 价格 30mg/1ml 100 AX0301-P 2280.00 60mg/1ml 100 AX0601-P 2640.00 60mg/3ml 100 AX0603-P 2760.00 150mg/6ml 30 AX1506-P 2052.00 500g/6ml 30 AX5006-P 2640.00 规格 包装(支/包) 订货号 价格 30mg/1ml 100 CX0301-P 2280.00 60mg/1ml 100 CX0601-P 2640.00 60mg/3ml 100 CX0603-P 2760.00 150mg/6ml 30 CX1506-P 1752.00 500g/6ml 30 CX5006-P 2400.00 规格 包装(支/包) 订货号 价格 500mg/500mg/6ml 30 PN0006-P 2268.00 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 FS1001-P 1296.00 200mg/3ml 50 FS2003-P 600.00 500mg/3ml 50 FS5003-P 780.00 500mg/6ml 30 FS5006-P 600.00 1g/6ml 30 FS0006-P 780.00 规格 包装(支/包) 订货号 价格 100mg/1ml 100 AL1001-N 1296.00 200mg/3ml 50 AL2003-N 624.00 500mg/3ml 50 AL5003-N 828.00 500mg/6ml 30 AL5006-N 624.00 1g/6ml 30 AL0006-N 828.00 GB/T 17592-2006方法包-—纺织品中禁用偶氮染料前处理 (P/N： GB/T 17592-2006GB/T 17592-2006方法包是针对国标方法《纺织品/禁用偶氮染料的测定》中使的提取柱和试剂而设计的简便、快捷的产品。其中硅藻土提取柱是艾杰尔公司司新产品。经过加工处理的硅藻土(Celite) 具有高纯度、高表面积、高吸水量、表面惰性的特点，经比对实验，产品质量和性能在同类产品中具有明显的优势。方法包包括以下产品： a).硅藻土SPE柱(已装填好的成品柱) b).萘-d8，2，4，5-三氯苯胺，蒽-d10的标准品使用方法：请参考第72页(纺织品中禁用偶氮染料的测定GB/T 17592-2006) 产品名称 规格 订货号 价格 硅藻土提取柱 20支/盒 GB/T 17592-2006-1 799.00 萘-d8；2，4，5-三氯苯胺；蒽-d10混标溶液 1000ppm/2ml GB/T 17592-2006-2 399.00 NY1380-2007方法----蔬菜水果中51种农药多残留前处理方法包 基质分散固相萃取 (Matrix Solid Phase Dispersion-extraction，卜MSPD)是一种新的提取净化技术，其基本操作是：试样经提取后与适量的固体基质(硅胶，FlorisilC18，C8)混匀，离心后取上清液，涡旋后再离心，待测。基质固相萃取将样品的提取和净化一步完成，避免了样品的均化、转溶、乳化、浓缩造成的待测组分的损失，一般萃取液可直接分析检测，适用于各种农药残留的提取净化。方法《蔬菜、水果中51种农药多残留的测定气相色谱-质谱法》 (NY1380-2007) 中，样品的净化处理采取MSPD方法，该方法包中包括所用到的关键试剂与材料应用方便快速，大大节了分析人员的时间和精力。 NY/T 1380-2007方法包包括以下产品： a. PSA吸附剂 b. C18吸附剂 c. 无水硫酸镁 d.50ml聚苯乙烯具塞离心管 e.两种保护剂(①3-乙氧基1，2-丙二醇溶液(纯度98%)；②山梨醇(纯度98%)) 使用方法：请参考第53页(蔬菜、水果中51种农药多残留的测定气相色谱-质谱法NY/T 1380-2007) 订购信息： 产品名称 规格 订货号 价格 NY1380-2007方法包 一套 NY1380-2007 4999.00 分项报价： Cleanert PSA吸附剂 100g PA0010 2800.00 Cleanert C18吸附剂 100g 180100 1600.00 无水硫酸镁 500g 7487-88-9 60.00 50ml聚苯乙烯具塞离心管 30个 PSP50 120.00 3-乙氧基1，2-丙二醇(纯度98%) 1g 1874-62-0 660.00 山梨醇(纯度98%) 0.5g 50-70-4 330.00 离子色谱样品前处理小柱 Cleanert Pre-IC 在离子色谱样品的前处理过程中，对一些复杂的样品需要进行去除杂质的处理。我们发挥自己作为填料专业生产厂家的优势，推出一系列的前处理小柱，可以清足这一需求。该系列所使用的填料洁净度高，符合离子色谱的要求。经过实验，验证了除杂能力优秀，效果很好。 产品信息： 订货号 填料 粒度 交换容量 应用 IC-RP 聚苯乙烯/二乙烯苯 高聚物 40um 0.3g/1cc 去除疏水性化合物尤其是 不饱和化合物和芳香化合 物 IC-P 吡咯烷酮取代聚苯乙 烯/二乙烯苯高聚物 40um 0.35g/1cc 具有RP柱的功能，同时对 极性的物质具有很好的选 择性 IC-A 碳酸氢型强碱性阴 80um 0.7meq/1cc 去除阴离子污染物、中和 离子交换树脂 样品溶液强酸性 IC-H H型强酸性阳离子交 换树脂 40um 2.0-2.2meq/1cc 去除碱土金属离子、过渡 金属离子和碳酸根离子，也 用来中和样品溶液的强碱性 IC-Na Na型强酸性阳离子 交换树脂 40um 2.0-2.2meq/1cc 去除碱土金属离子、过 渡金属离子 IC-Ag Ag型强酸性阳离子 交换树脂 40um 2.0-2.2meq/1cc 去除CI-，Br-，I-， AsO3， CrO，CN，MoO2，PO 3- 4 SeO，2， SO3，SeCN，S²， SCN-和WO 2- IC-Ba Ba型强酸性阳离子 交换树脂 40um 2.0-2.2meq/1cc 去除SO2，使用时需要含CI 溶液活化，后接IC-Ag柱除CI IC-M 氨基型螯合树脂 40um 0.4meq/1cc 去除过渡金属、碱和碱土金属 IC-Ag/H Ag、H型强酸性阳 离子交换树脂复合 功能相当于Ag、H柱的串联使用 IC-Ba/Ag/H Ba、Ag、H型强酸性 阳离子交换树脂复合 功能相当于Ba、Ag、H柱的串联使用 产品对照表 Agela Waters Supelco Aglient Varian C18(封端) CleanertC18 Sep-pakC18 ENVI-18：LC-C18 Bond ElutC18 C18 (未封端) CleanertC18-N AccuBONDC18 Bond ElutC18-OH C8 CleanertC8 Sep-pakC8 ENVI-8 AccuBONDC8 Bond ElutC8 氰基 CleanertCN Sep-pakCN LC-CN AccuBONDCN Bond ElutCN 氨基 CleanertNH. Sep-pakNH. LC-NH2 AccuBONDNH， Bond ElutNH， 丙基乙二胺 CleanertPSA Bond ElutPSA 季铵盐 (强阴离子交换柱) CleanertSAX LC-SAX AccuBOND SAX Bond ElutSAX 羧基柱 (弱阳离子交换柱) CleanertCOOH LC-WCX Bond ElutCBA 丙磺酸柱 CleanertPRS Bond ElutPRS 苯磺酸 (强阳离子交换柱) CleanertSCX LC-SCX AccuBONDSCX Bond ElutSCX 硅胶柱 CleanertSilica Sep-pakSilica LC-Silica AccuBONDSilica Bond ElutSilica 二醇基 CleanertDiol Sep-pakDiol LC-Diol AccuBONDDiol Bond ElutDiol 聚苯乙烯/二乙烯苯 CleanertPS ENVI-Chrom P AccuBONDENV PS-DVB 极性高分子柱 CleanertPEP OasisHLB Bond ElutPlexa 混合型的阴离子交换柱 CleanertPAX OasisMAX 混合型的阳离子交换柱 CleanertPCX OasisMCX 磺酰脲专用柱 CleanertHXN 第三章固相萃取方法的建立 固相萃取技术使用起来虽然比液液萃取简单，但建立一个固相萃取的方法并无无捷方式可走。建立固相萃取方法必须考虑与萃取过程相关的多种因素，归纳起来可从三个方面考虑： ·确定萃取的目的及要求 ·建立初步的固相萃取方法 ·方法的优化 下表给出了如何建立固相萃取方法的示意图。 一、确定萃取的目的及要求 ·2→ ② 建立初步的方法 选择萃取方法 选择萃取材料 选择洗脱溶剂 选择样品体积 选择样品基体处理方法 二、初步固相萃取方法的建立建立初步的萃取方法要考虑： ·选择合适的SPE柱 ·选择合适的固相萃取方法 方法的优化 1.固相萃取柱的选择 1)柱填料的选择 根据目标化合物与干扰物的差异，如极性，：，分子量， pKa值等，选择合适的填料 2)固相萃取柱规格的选择 对于反相、正相和吸附型固相萃取柱来说，被萃取目标物的质量不超SPE柱填填的5%；离子交换型的固相萃取柱，必须考虑离子交换的容量。SAX和SCX其吸附容量为0.2mg/g。(下表附SPE小柱的容量和洗脱参数) SPE柱规格及上样容量和洗脱参数 规格 上样量 最小洗脱体积 100mg/1ml 5mg 250pl 200mg/3ml 10mg 500pl 500mg/6ml 25mg 1.2ml 1g/6ml 50mg 2.4ml 2.选择合适的固相萃取方法 固相萃取的保留机制可分为两种： (一)吸附剂(填料)保留目标化合物：绝大多数化合物应用此机制，其保留目标组分，通过淋洗步骤去除吸附在柱上的少量杂质，最后选择合适的(洗脱)溶剂把目标组分洗脱下来。 根据吸附剂的保留机理可进一步分为： (1)反相(C18，C8， CN， Phenyl， C4， C1) ·分析物：非极性至中等极性 ·基质：：水溶性 ·方法：a.活化：通常用水溶性有机溶剂，如甲醇淋洗，」2然后用水或缓冲溶液淋洗 b.淋洗：含5-50%极性溶剂的缓冲溶液淋洗 c.洗脱：极性或非极性溶剂洗脱 (2)正相 (Silica， Florisil， Alumina， Diol，NH) ●·分析物：中等极性到强极性 ·基质：非极性至中等极性 ·方法：a.活化：通常用提取液所在的有机溶剂(样品基体)进行活化 b.淋洗：含少量(1-5%)中等极性到弱极性有机溶剂的非极性溶剂 (3)阳离子交换(SCX， PRS， COOH， WCX， PCX) 分析物：阳离子(碱性)化合物 方法：a.活化：用于提取非极性有机溶剂中的样品时，可用样品溶剂来活在用于提取极性溶剂中的样品时，，可用水溶性有机溶剂过寸后，再用适当pH值的，并含有一定有机溶剂和盐的水溶液进平衡。 b.上样：样品溶液pH值要小于其pKa两个单位(以保证其带电荷) c.洗脱：：洗脱溶液pH值要大于其pKa两个单位(中和分析物的电荷)(4)阴离子交换 (SAX，PSA， NH，， WAX，PAX) 分析物：阴离子(酸性)化合物 ·方法：a.活化：用于提取非极性有机溶剂中的样品时，可用样品溶剂来淋洗在用于提取极性溶剂中的样品时，，可可用水溶性有机溶剂淋》后，再用适当pH值的，并含有一定有机溶剂和盐的水溶液进淋洗。 b.上样：样品溶液pH值要大于其pKa两个单位(以保证其带电荷) c.洗脱：洗脱溶液pH值要小于其pKa两个单位(中和分析物的电荷) (二)吸附剂(填料)保留杂质：食品中色素等杂质的去除多用此机制。此种吸附保留杂质而不保留或只保留极少量的目标组分，所以上样后即开始收集目标组分最后用目标物所在的溶剂进一步洗脱。合并两部分收集液。 a.活化：以提取液所在的有机溶剂活化(1-2柱管体积) b.上样：提取液转移至柱内，并收集流出液 c.洗脱：用目标化合物所在的有机溶剂进一步洗脱，收集流出液。合并上样和洗脱流出液 物质 常见问题 处理方法 土壤，污水 被测组分会在土壤表面吸附 使用非极性溶剂提取，用极性填料分离干扰杂质 原油 极性低 使用非极性溶剂提取，用极性填料分离干扰杂质 软膏，奶酪 很难分离水性和油性组分 油性：非极性溶剂提取，用极性填料分离干扰杂质；水性：极性溶剂提取，水稀释，如有需要使用非极性溶剂富集被测组分 油脂 弱极性 使用非极性溶剂溶解，用极性填料分离干扰杂质 葡萄酒 含糖类等极性物质 水稀释，非极性填料富集。如使用离子交换填料，则需调节上样液的pH值 谷物 含有脂肪物质 非极性溶剂提取，极性填料分离干扰物质或使用非极性溶剂除酯后，以极性溶剂提取，水稀释后使用非极性填料富集被测组分 水果，蔬菜 极性溶剂提取，水稀释后，非极性填料富集被测组分 药理样品，尿，血，动物组织等 蛋白含量高 用水/缓冲盐稀释，使蛋白沉淀，然后以非极性填料富集被测组分 水 含有腐殖性物质 用氨基填料消除腐殖性物质，使用非极性填料富集被测组分 三、固相萃取方法的优化 1.影响萃取效率的因素 1)填料(固定相)——核心 选择合适的SPE柱填料是保证理想结果的前提。 2)洗脱溶剂的强度： ·采用正相固定相时，溶剂强度随其极性增增而增强； ·采用反相固定相时，溶剂强度随极性减弱而增强。 3)pH值： 离子交换固定相、被分析物和干扰物质的pKa各不相同。通过调节pH大小，可以使固定相带电荷，被分析物带相反电荷，而使干扰物质不带电荷；；或者反过来，使固定相带电荷，，-干扰物质带相反电荷，而使被分析物不带电荷，从而达到分离纯化的目的。 2.常见问题及解决方法 ·分析物回收率低 ●萃取重现性差 洗脱馏分中含有干扰物 ·SPE柱流速降低或阻塞 1)分析物回收率低 ·未保留? ·被淋洗? 。未被洗脱或部分洗脱? 首先要把上样液、淋洗液、洗脱液分步收集，分别进样分析， 确定问题来源： 2)重现性差 3)洗脱馏分中含有干扰物 a.在洗脱分析物之前选用中等极性的 溶剂将干扰物洗涤出SPE柱 干扰物与分析物同时被洗脱 b.选用对分析物亲合力更大而对干扰 物亲合力小的SPE柱 干扰物来自SPE柱 在柱子预处理之前用洗脱溶剂洗涤SPE柱 4) SPE柱流速降低或阻塞 第四章应用 一、常用应用中SPE柱的选择 (一)农残、食品领域常用SPE柱及其应用 特点：色素较多，需去除大量色素 2.常用小柱及其应用 SPE小柱 应用 Florisil(1g/6ml) NY-761 PestiCarb， PC/NH， 2 GB/T 19469-2005，日本肯定列表 Alumina-N 苏丹红 NH，2 拟除虫菊酯类杀虫剂 (二)兽残(组织、饲料)领域常用SPE柱及其应用 SPE小柱 应用 SCX/PCX/MCX 克仑特罗 PCX/SCX/MCX 沙丁胺醇 PEP/SUL-5/ Alumina B 磺胺 C18/PEP/Silica 氯霉素 PEP/C18 氟喹诺酮 PEP/C18 硝基咪唑类药物 Silica/C18 己烯雌酚 PEP/C18 四环素 Alumina A/ MCX 莱克多巴胺 PCX 三聚氰胺 Alumina-N 苏丹红 PRS， Alumina-N 孔雀石绿 PEP 硝基呋喃代谢物 Florisil/Silica 氯霉素 (三)环境领域常用SPE柱及其应用 SPE小柱 应用 PEP 水中酚类 HXN 土壤中磺酰脲类 硅藻土 偶氮染料 四)医药领域常用SPE柱及其应用 SPE小柱 应用 C18 血样中类固醇 PEP 血样中有机碱、有机酸 PCX 血样中有机酸 PAX 血样中有机碱 二、应用实例 (一)食品中农残固相萃取方法 蔬菜水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留检测方法(NY/T 761-2004 Cleanert Florisil， P/N：FS0006) 前处理方法：：将氟罗里硅土小柱 (Florisil 1g/6ml， P/N： FS0006)依次用5.0ml丙酮加正己烷(10：90)、5.0ml正己烷预淋条件化。当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即倒入样品溶液，用15ml刻度离心管接收洗脱液。用5ml丙酮加正己烷(10：90涮洗烧杯后淋洗硅酸镁柱，并重复一次。将盛有淋洗液的离心管置于氮吹仪上，在水浴温度50℃条件下，氮吹蒸发至小于5ml。用正己烷准确定容至5.0ml，在旋涡混合器上混匀。分别移入两个2ml自动进样器样品瓶中，待测。 (P/N：NY/T 1380-2007) 1)原理：：试样中的农药经乙腈提取，键合硅吸附剂固相分散净化后，用气相色色-质谱仪测定，选择离子定性和内标法定量。 2)试样的制备：按GB/T8855提取的蔬菜、水果样品取可食部分1000g~5000g切碎，先用食品加工器搅碎，取约200g搅碎的样品，用高速组线匀浆机(转速22000r/min)进一步匀浆至糊状，放入聚乙烯瓶中于-16℃~-20℃条件下保存。 3)提取：称取15g试样(精确至0.01g)于50ml聚苯乙烯具塞离心管中，加入15m冰乙酸-乙睛溶液，加入6g无水硫酸镁，1.5g无水乙酸钠，剧烈震荡1mir后，以5000r/min的转速离心1min， 取出后待净化。 4)净化：：称取0.1g PSA， 0.1g C18， 0.3g无水硫酸镁置于5ml玻璃具塞离心管中：吸取上清液2ml至此离心管中，在漩涡混合器上混合1min，以5000r/mir的转速离心1min，移取上清液1ml于1ml容量瓶中。 5)添加内标物和分析保护剂溶液： 将4)中的容量瓶放在氮吹仪上，，缓缓通入氮气，室温下浓缩至低于0.8ml，分别准确添加100um内标物工作溶液和100ul分析保护剂泪合溶液，用乙腈准确定容至1.0ml，，在漩涡混合器上混匀，待测。 乙酰甲胺磷净化及分析方法(Cleanert PEP， P/N： PE0603) 1)乙酰甲胺磷理化性质： [溶解度]：易熔于水、、甲醇、乙醇、丙酮等极性溶剂和二氯甲烷、、二二氯乙烷等卤代烃类，在苯、、甲苯、.二甲苯中溶解度较小 [稳定性]：在碱性介质中易分解 [化学结构式]： 2)HPLC条件： 色谱柱：：Venusil MP-C18色谱柱(4.6×150mm，5um，P/N：VA951505-0) 流动相：：乙腈：水=10：90；)；UV=214nm；柱温：30℃ 3)SPE条件： 小柱：： Cleanert PEP 60mg/3ml (P/N： PE0603) 样品处理：母液以乙腈配制(1000ppm)， 取50pl母液以水稀释定容至5ml即10ppm在稀释后的样品中加入1.25g硫酸胺，充分溶解后待用。 SPE小柱方法：a.2ml甲醇，2ml水活化 b.上样：：4ml c.淋洗：：1ml水d.先脱：5ml的甲醇洗脱。 洗脱液氮气吹干，水定容进样。 Praziquantel(吡喹酮)前处理及分析方法(Cleanert PEP， P/N： PE0603)1) Praziquantel(吡喹酮)性质： [溶解度 (1g/100ml)]：乙醇9.7，氯仿56.7，，水0.04， (25℃C) [化学结构式]： 2)HPLC方法： 甲醇：水=70：30， UV=263nm，色谱柱：： Venusil MP C18， 4.6×150mm，5um(P/N： VA951505-0) 3)SPE方法： 小柱：：Cleanert PEP 60mg/3ml (P/N： PE0603) 样品处理：母液以甲醇配制，0.2%乙酸水溶液稀释进样。添加80ug，最后定容至4ml，即20ppm。 SPE小柱方法：a.2ml甲醇、2ml水活化 b.上样：4ml(母液以0.2%乙酸水溶液稀释) c.淋洗：1ml水 d.洗脱：4ml甲醇，收集洗脱液进样。 图谱： min 胺苯磺隆 (ethametsulfuron)前处理及分析方法 (Cleanert PAX， IP/N： AX0603 1)SPE方法： 小柱：：(Cleanert PAX，60mg/3ml (P/N： AX0603) SPE小柱方法：a.1ml甲醇，1ml水活化 b.上样：2ml(样品溶液以2%氨水稀释) c.淋洗：1ml2%氨水，1ml甲醇 d.洗脱：：22ml含2%乙酸的甲醇溶液洗脱。 2)HPLC条件： 色谱柱：'Venusil MP C18，4.6x250mm，5um， P/N：VA952505-0 流动相：甲醇：0.2%乙酸水溶液=70：30；1UV=355nm 柱温：30℃ 烟嘧磺隆 (nicosulfuron)前处理及分析方法(Cleanert PAX， P/N：AX0603)1)SPE方法： 小柱：：(Cleanert PAX：60mg/3ml(P/N：AX0603) SPE小柱方法：a.1ml甲醇，1ml水活化 b.上样：2ml(样品溶液以纯水稀释) c.淋洗：1ml2%氨水，1ml甲醇 d.洗脱：：2ml含2%乙酸勺甲醇溶液洗脱。 2)HPLC条件： 色谱柱：1MP C18 4.6×250mm，5um (P/N： VA952505-0) 流动相：甲醇：0.2%乙酸水溶液=60：40；；UV=355nm 主温：30℃图谱： DAD1 A， Sig=235 4ReF=360100(AGELA07041207.D) 阿特拉津前处理及分析方法 (Cleanert PEP， P/N： PE0603) 1)阿特拉津性质： [溶解度]：水中33mg/l(25℃)，易溶于有机溶剂 [稳定性]：在中性、微酸性或微碱性介质中稳定，遇强碱和强酸易分解[化学结构式]：C1 2)HPLC条件： 色谱柱：：Venusil MP C18， 4.6×150mm， 5um(P/N：VA951505-0)； 流动相：乙腈：1mM的KH，PO =60：40；UV=214nm：柱温：30℃ 3)SPE方法： 小柱：：(Cleanert PEP 60mg/3ml (P/N： PE0603) 样品处理：：母液以乙腈配置，0.2%乙酸水溶液稀释进样。 SPE小柱方法：a.2ml甲醇，2ml水活化 b.上样：：4ml c.淋洗：1ml水 d.洗脱：：55ml甲醇洗脱，收集洗脱液进样 图谱 (二)食品或生物基体中兽药残留的固相萃取方法 动物组织中盐酸克伦特罗的测定一气相色谱-质谱法 (Cleanert SCX， P/N： SC5006) 1)原理： 样品在碱化的条件下用乙酸乙酯提取，，合并提取液后，利用盐酸克伦特罗易溶子酸性溶液的特点，用稀盐酸反萃取，萃取的样液pH调至5.2后用SCX固相萃取小柱净化，分离的药物残留经过双三甲基硅烷三氟乙酰胺 (BSTFA)衍生后用带有有量选择检测器的气相色谱仪测定。 2)提取： 取(5±0.05)g动物肝组织――加入15ml乙酸乙酯――加入3ml 10.0%碳酸钠溶液――均质――离心2min――取上层有机溶剂――残渣再次提取――两次合并――加入5ml 0.10mol/L一盐酸――离心2min――重复萃取――合并下层溶液-2.5mol/L氢氧化钠溶液调节pH至5.2。 3)净化： Cleanert SCX小柱 (500mg/6ml， P/N： SC5006)――加5ml甲醇――加5ml水——加5ml 30mM/L盐酸活化――萃取液上样――加5ml水――加5ml甲醇――淋洗柱子――抽干SCX小柱――加5ml4%氨化甲醇溶液――洗脱。 ( 4)衍生化： ) ( 50℃水浴――氮气吹干――加100ml甲苯――加100ml BSTFA-—80℃衍生1小时――冷却――加0.3ml甲苯 ― ―气相色谱-质谱分析。 ) 盐酸克伦特罗前处理及分析方法(Cleanert PCX， P/N： CX0603) 1)SPE方法： (参考NY/T 468-2001) Cleanert PCX 60mg/3ml (P/N： CX0603) SPE小柱方法：a.活化：2ml甲醇，2ml水， 2ml 30mM HCI b.上样：20mM的乙酸胺溶液c.淋洗：水，甲醇 d.洗脱： 4%氨化甲醇，氮气吹干，流动相定容 2)HPLC方法： 色谱柱：'Venusil MP C18 4.6×250mm，5um，(P/N：VA952505-0)，流动相：甲醇/0.05%磷酸水溶液=40/60；UV=244nm. Detector A (244nm) ????????SY1003 Retention Time L 0 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 沙丁胺醇前处理及分析方法(Cleanert PCX， P/N： CX0603) 1)SPE方法： Cleanert PCX 60mg/3ml (P/N： CX0603) SPE小柱方法：a.活化：2ml甲醇，2ml水， 2ml 30mM HCI b.上样：20mM的乙酸胺溶液c.淋洗：甲醇，水 d.洗脱： 4%氨化甲醇，氮气吹干，流动相定容。 2)HPLC方法： 色谱柱：`Venusil MP C18 4.6x250mm，5um，， ((FP/N：VA952505-0) 流动相：甲醇/0.05%磷酸水溶液=40/60；UV=244nm。 Minutes 猪肉中五种磺胺药物的检测(Cleanert SUL-5， P/N： SUL-5) 1)实验材料： A. SPE柱：： Cleanert SUL-5 (2g/10ml) (P/N： SUL-5， Agela Technologies) B..五种磺胺类药物：磺胺二甲基嘧啶(SM2)、磺胺间甲氧嘧啶 (SMM)、磺胺甲唑(SMZ)、磺胺二甲氧嘧啶(SDM)、磺胺喹啉(SQ) C.标准样品工作液 标准样品根据NY 5029-2001附录E配制，浓度为10mg/kg。 2)实验过程： A. 柱保留回收率实验方法 按照NY 5029-2001附录E中的方法进行柱保留实验。具体步骤为：吸取50pl或100ul混合标准工作液于2.95ml或2.90ml95%乙腈中溶解，然后过经5ml 95%腈活化的SUL-5小柱。具体步骤如下： a.柱平衡： 5ml95%乙腈 b.上样：3ml 95%乙腈样品溶液 c. 预淋洗： 5ml 95%乙腈淋洗 d.洗脱：10ml 70%乙腈洗脱 收集洗脱液，进行HPLC分析，进样量为20pl。 B..添加回收率实验 按照NY 5029-2001附录E中的方法进行添加回收率实验。具体步骤为：：称取组织样品5g(精确到0.01g)于已加有10g无水硫酸钠的离心管中，然后加入乙腈25ml以10000r/min以上的速度均质1min后，以3000r/min的速度离心5min。分离后的残渣再用25ml乙腈处理，以3000r/min的速度离心5min。合并两次的上清液，，大加入用正己烷30ml，振荡10min，，以3000r/min的速度离心5min， 取下层液体，加正丙醇10ml，50℃下减压干燥至干，残留物用95%乙腈3ml溶解，过碱性氧化七小柱。用95%乙腈5ml过柱，不收集，再用70%乙腈10ml洗脱后，收集洗脱液进行高效液相色谱仪测定。 结果见下图： 猪肉中五种磺胺药物回收率实验结果 猪肉中五种磺胺回收率(Cleanert SUL-5柱) 三聚氰胺样品前处理及检测方法(Cleanert PCX， P/N： CX0603) 标样：取50mg三聚氰胺标准品，以20%甲醇溶解定容至50ml得到1000ppm的杨准溶液，使用时，以提取液(1%三氯乙酸)稀释至所要的浓度。 1)提取： 称取样品(饲料，猫粮，狗粮或肾等组织)5g，加入50ml1%三氯乙酸提取液，充分混匀，加入2ml2%乙酸铅溶液，超声20min。然后取部分溶液转移至10ml离管中，8000rpm离心10min， 取上清液3ml过混合型阳离子交换小柱(PCX). 2)净化： Cleanert PCX小柱， 60mg/3ml， (P/N： CX0603)： a.活化及平衡：3ml甲醇，3ml水 b.上样：加入提取液3ml c.淋洗：3ml水；【；、3ml甲醇；弃去淋洗液并将小柱抽干 d.洗脱：5ml5%氨化甲醇(V/V)洗脱。(5%氨化甲醇的配制：5ml氨水+95ml甲酉 e.浓缩：50℃，氮气吹干，20%甲醇水溶液定容至2ml， HPLC分析或衍生后GC/MSA析。 3)检测方法： 方法一：三聚氰胺LC-MS检测方法以上述前处理方法，分别以Venusil ASB C8/C18色谱柱分析，结果如下： a.ASB-C8 4.6x250mm，5pm (P/N： VS852505-0) mAD DAD1A，Sig=240，4 Ref=360，100 (AGELA107052506.D) 缓冲液：100mM的NH，AC 流动相：缓冲液：乙腈=95：5 流 速：：11.0ml/min进样量：样品先用70%ACN溶解成约1mg/ml，用ACN稀释成0.1mg/ml， 进10pl柱温：40℃波长： ：：240nm Rt=3.839min：1；TF(5%)=1.00 b. ASB-C18 4.6x250mm， 5um(P/N： VS952505-0) mAU 缓冲液：100mM的NH4AC 流动相：缓冲液：ACN=95：5 流 速：1.0ml/min进样量：样品先用70%ACN溶解成约1mg/ml用ACN稀释成0.1mg/ml，进10pl 柱温：40℃波 长：：240nm mir Rt=3.651min：7TF(5%)=1.05 方法二：三聚氰胺HPLC-UV方法(FDA方法，离子对HPLC方法) mAU 175 色谱柱：： Venusil ASB-C18 4.6x250mm，5pr(P/N： VS952505-0) 缓冲液：10mM柠檬酸，10mM庚烷磺酸钠 流动相：缓冲溶液：乙腈=85：15 流速： 1.0ml/min 柱温：440℃ 波长：240nm 结果： 添加水平(mg/L) 回收率 空白 0.01 116% 0.1 108% 0.5 92% 2 96% 鱼肉中孔雀石绿的分析方法(Cleanert PCX， P/N： CX0603) 1)孔雀石绿结构图： 由于LMG是MG在水生生物体的主要代谢产物，因此在检测MG的同时，必须检测LMG. 2)前处理步骤： a.活化及平衡：：55ml甲醇，5ml水， 5ml Mcllvaines缓冲液 (pH2.6) b.上样：加入提取液约20ml c.淋洗： 5ml 0.1N HCI酸化；纯水清洗两次，每次5ml；·4ml50%甲醇/水；：66mll正己烷，真空抽干 d.洗脱：10ml 50%乙酸乙酯，45%甲醇，5%氨水 (v/v/v) 洗脱。 e.浓缩：：50℃，氮气吹干，50%乙腈/水定容至100ul， HPLC进样分析。 3)图谱：(图中MG、LMG浓度均为0.4ug/ml) (三)环境中有机物的固相萃取方法 水中酚类的检测(Cleanert PEP， P/N： PE5006) 1)实验材料： a.SPE小柱： Cleanert PEP 500mg/6ml (P/N： PE5006) b.7种酚类：：苯酚，44-硝基酚，间甲酚，2-氯酚，2，4-二氯酚，2，4，6-三氯酚，五氯酚 2)实验过程： a.样品前处理方法 a)5ml甲基叔丁基醚 (v/v=10：90)活化萃取柱， 5ml/min b) 5ml甲醇活化富集柱， 5ml/min c)5ml去离子水活化， 5ml/min d)1000ml的水样过柱， 10ml/min e) 10ml去离子水洗涤， 5ml/min f)空气干燥20min g)2ml甲基叔丁基醚(v/v=10：90)分两步洗脱，收集洗脱液至尖嘴瓶中h)将收集的2ml洗脱液氮气浓缩至1ml b.色谱条件： 流动相：A：1%乙酸水溶液 B：1%乙酸的甲醇溶液 色谱柱： Akasil C18 (4.6x150， 5um) (P/N： AK951505-0) 检测器：UV检测器 梯度洗脱程序： 时间 流动相比例 流速(ml/min) 检测波长 0-15min A：B=50：50 1 275nm 15-30min A：B=15：85 1.8 295nm 七种酚的色谱图 注：1.苯酚；2.4-硝基酚；3.间甲酚；4.2-氯酚；5.2，4-二氯酚；6.2，4，6-三氯酚； 7.五氯酚 3)实验结果： 七种酚在水中的添加回收率见下表 七种酚类在水中的添加回收率结果 标准 空白 加标 平均值 标准偏差 回收率(%) 1 2 3 苯酚 1.472 0.000 1.367 1.541 1.524 1.477 0.096 100.3 4-硝基酚 1.469 0.000 1.229 1.308 1.430 1.322 0.101 90.0 间甲酚 1.374 0.000 1.294 1.540 1.548 1.461 0.144 106.3 2-氯酚 0.613 0.000 0.527 0.684 0.641 0.617 0.081 100.6 2，4-二氯酚 1.630 0.000 1.305 1.613 1.621 1.513 0.180 92.8 2，4，6-三氯酚 1.655 0.000 1.365 1.609 1.511 1.495 0.123 90.3 五氯酚 1.470 0.000 1.259 1.487 1.472 1.406 0.128 95.6 高效液相色谱质谱法测定土壤中10种磺酰脲类除草剂多残留(Cleanert HXN， P/N：HN0301) 1)实验材料： a.SPE柱： Cleanert HXN(100mg/3ml) (P/N：HN0301) b..十种磺酰脲除草剂：烟嘧磺隆、噻磺隆、甲磺隆、、嘧磺隆、、氯磺隆、胺苯磺隆苯磺隆、苄嘧磺隆、吡嘧磺隆、氯嘧磺隆 c.标准溶液：磺酰脲类除草剂用乙腈配制成标准储备液，根据检测需要用乙腈标准储备液稀释成相应的标准工作溶液 2)实验过程： a.提取：称取风干后过20目筛的土壤10g于50ml具塞离心管中，加入提取液[pH7.8， 0.2mM磷酸缓冲液：甲醇(8：2，V/V)]10ml，涡旋3min，超声波振荡5min离心10min (4000r/min)，重复提取3次，合并上清液。85%磷酸调节pH值至2.5待净化浓缩。 b.净化与沐缩：：(Cleanert HXN (100mg/3ml)进行净化： SPE柱先用5ml甲醇浸泡活化30min，淋洗，再用5ml提取液，85%磷酸调节pH值至2.5后预淋洗，，上样，流速控制在1ml/min，样品过完后，抽真空10min， 最后用3ml乙腈：：pH7.8磷酸缓冲液(9：1，V/V)洗脱，收集洗脱液氮气吹定容至1ml。 3)HPLC/UV的分离条件： 色谱柱：'Venusil XBP-C18，250mmx4.6mm， 5um， P/N：VX952505-0 流动相：：乙腈-甲醇-水(0.2%冰醋酸)，流速1ml/min； 柱 温：30℃：；检测波长254nm； 进样量：10pl；梯度洗脱程序列于表1. 表1.梯度洗脱程序 时间(min) 0.2%乙腈水，V/% 乙腈，V/% 甲醇，V/% 00.00 80 10 10 14.00 10 45 45 16.00 4 48 48 18.00 80 10 10 3)实验结果： 图为10种磺酰脲类除草剂混合标准溶液的HPLC/MS总离子流图和选择离子流图土壤中十种磺酰脲除草剂在三个水平下(0.01，0.1，1ug/ml)的添加回收率见表2. 十种磺酰脲除草剂的总离子流图 1.烟嘧磺隆；2.噻磺隆；3.甲磺隆；4.嘧磺隆；5.氯磺隆；6.胺苯磺隆；7.苯磺隆； 8.苄嘧磺隆；9.吡嘧磺隆；10.氯嘧磺隆 表2.十种磺酰脲除草剂在土壤中的添加回收率(三个添加水平) 样品名称 添加浓度(ug/mL) 添加回收率(%) RSD(%) 烟嘧磺隆 0.01 94.52 7.22 0.1 97.31 4.07 1 84.83 0.02 噻磺隆 0.01 88.20 0.11 0.1 87.43 9.95 1 82.69 0.02 甲磺隆 0.01 104.52 2.81 0.1 87.57 0.25 1 83.14 0.05 样品名称 添加浓度 (ug/ml) 添加回收率(%) RSD(%) 嘧磺隆 0.01 95.52 8.43 0.1 94.13 4.49 1 80.16 0.14 氯磺隆 0.01 91.41 5.37 0.1 85.53 1.65 1 89.26 0.03 胺苯磺隆 0.01 102.67 12.85 0.1 92.58 14.90 1 87.72 0.01 苯磺隆 0.01 34.79 2.20 0.1 16.57 12.10 1 11.00 0.03 苄嘧磺隆 0.01 90.09 8.58 0.1 83.34 2.15 1 84.01 0.03 吡嘧磺隆 0.01 101.28 12.24 0.1 85.98 1.65 1 86.04 0.03 氯嘧磺隆 0.01 86.70 7.71 0.1 85.54 8.10 1 100.53 0.03 1)原理：：纺织样品在柠檬酸盐缓冲溶液介质中用连二亚硫酸钠还原分解以产生日能存在的禁用芳香胺，用适当的液-液分配柱提取溶液中的芳香胺，浓缩后，用合适的有机溶剂定容，用配有质量选择检测器的气相色谱仪(GC/MSD)进行测定必要时，选用另外一种或多种方法对异构体进行确认。用高压液相色谱/二极管阵列检测器 (HPLC/DAD)或气相色谱/质谱仪进行定量。 2)材料： Cleanert celite提取柱(P/N：GB/T17592-2006-1) 3)试样的制备和处理： a.取有代表性试样，剪成约5mmx5mm的小片，混合。从混合样中称取1.0g，，精确至0.01g，置于反应器中，加入16ml预热到(70±2)℃的柠檬酸盐缓冲溶液，，将反应器密闭，用力振摇，，使所有试样浸于液体中，置于水浴中，并在(70±2)℃保温30min，，使所有的织物充分润湿。然后，打开反应器，加入3.0ml连二亚硫酸钠溶液，并立即密闭振摇，将反应器再于(70±2)℃水浴中保温30min，取出后2minp冷却到室温。 b.涤纶产品按附录B规定的方法进行。 4)萃取和浓缩： a.萃取：用玻璃棒挤压反应器中试样，将反应液全部倒入提取柱内，任其吸附15min，用4×20ml乙醚分四次洗提反应器中的试样，每次需合合乙醚和试样，然后将乙醚洗液滲入提取柱中，控制流速，，收集乙醚提取液于圆底烧瓶中。 b.浓缩：将上述收集的盛有乙醚提取液的圆底烧瓶置于真空旋转蒸发器上，于35℃左右的低真空下浓缩至近1mL，再用缓氮气流驱除乙醚溶液，使其浓缩至近干。 (四)医药领域固相萃取方法实例 人体血清中的吴茱萸碱，吴茱萸次碱的SPE净化及检测(Cleanert C18， P/N： 182003) 1)样品： 人体血清，样品浓度为50ng/ml(纯水稀释2倍) 2)SPE柱： Cleanert C18；200mg/3ml， P/N： 182003 Evodiamine 吴茱萸碱 Rutecarpine 吴茱萸次碱 图1.两种吴茱萸提取物(吴茱萸碱和吴茱萸次碱)的结构式 3)固相萃取步骤： a.柱活化：2ml甲醇，2ml水 b.上样：2ml样品，流速：：0.5ml/min c.淋洗：1ml水淋洗两次，用氮气吹干 d.洗脱：1ml乙酸乙酯洗脱两次，，收集洗脱液 然后将收集的上述洗脱液，在40℃下氮气吹干，然后用1ml甲醇：水(85/15)定容过0.45pm的滤膜，，供LC/MS分析。 LC/MS分析条件： 仪器： Agilent 1100 色谱柱：Venusil XBP-C18， 4.6 x150mm， 5um，P/N： VX951505-0， 流动相：：甲醇：水=85：15 流速：：C0.5ml/min：；温度：25℃；进样量：10pl；MS：： ESI RutecarpineEvodiamine 图2.人体血清中的吴茱萸碱，吴茱萸次碱的总离子流图 图3.人体血清中的吴茱萸碱，吴茱萸次碱的总离子流图 固相萃取法测定血清中的药物成分(Cleanert C18， P/N： 181003) 1)前处理方法：a.活化：3ml甲醇，3ml水 b.上样：加标后的血清样本上样 c.淋汐：3ml水或3ml 5%甲醇水溶液 d.洗脱：3ml甲醇洗脱 2)结果： 分析物 回收率(%) Dexamethasone 地塞米松 97.9 Ethinylestradiol 炔雌醇 96.3 Hydrocortisonum 氢化可的松 74.0 Triamcinolone 曲安奈德 71.9 Levonorgestrel 左炔诺孕酮 93.9 Ganciclovir 更昔洛韦 54.1 Prednisone Acetate 醋酸泼尼公 98.6 Cefalexin 头孢氨苄 58.6 Cefradine 头孢拉定 45.6 m in m inl HPLC法测定人血浆中舒必利浓度及其人体药动学和相对生物利用度研究 (Cleanert C18，，P/N： 181001) 1)样品处理：：精密吸取0.75ml血浆，置2ml离心管中，加入10ul甲氧氯普胺内杨溶液，旋涡混匀。 2)SPE方法：a.活化：2ml甲醇活化，2ml水平衡处理 b.上样：将处理好的血浆上柱 c.淋洗：待血浆全部通过小柱后用1ml水淋洗 d.洗脱：2ml甲醇洗脱，将洗脱液收集并于55℃水浴氮气吹干，残渣用甲醇100pl溶解， 3000r/min离心5min， 取上清液20p进样 牛血清中对乙酰氨基酚的提取净化方法 (Cleanert PEP，PCX P/N：PE0603，CX0603) 1)对乙酰氨基酚结构式： 2)SPE柱：120mg/3cc PEP， 0.6mmol/g60mg/3cc PCX 3)样品制备：：-牛血清用去离子水稀释1倍，加入对乙酰氨基酚，制成10ppm样品溶液 4)SPE步骤：a.活化：2ml甲醇活化，2ml水平衡 b.上样：：将处理好的样品溶液(2ml)上柱 c.淋洗：2ml5%甲醇淋洗 d.洗脱：：2ml甲醇 5)结果： 小柱 处理1 处理2 PEP(0.6/120mg/3ml)+50%血清 86.9 81.6 PCX+50%血清 94.6 94.6 固相萃取技术手册 min