非洲猪瘟病毒ASFV中数字PCR检测方案(PCR)

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利用 Stilla Naica 数字 PCR 方法检测非洲猪瘟病毒 ASFV 非洲猪瘟 (ASF， Africa Swine Fever) 是由非洲猪瘟病毒引起猪的一种急性、高度接触性传染病。由于该病病原学和流行病学的复杂性，且没有有效的疫苗用于防疫，因而被世界动物卫生组织(OIE)列为实时通报的动物疫情，我国将其列为一类动物疫情。 据联合国粮食及及业组织推荐，现行 ASFV (非洲猪瘟病毒)主要实验室检测方式分为 ASFV 病毒检测和 ASFV 抗体检测。 ASFV 病毒检测分为基因检测、病毒分离和抗原检测三种，基因检测方法为聚合酶链式反应 (PCR)法，近年来荧光定量 PCR 广泛应用，对于特急性、急性或亚急性 ASF 感染病例， qPCR 成为首选的检测技术。病毒分离、抗原检测法为直接荧光抗体法与酶联免疫吸附 (ELISA) 法。 数字 PCR是继普通PCR和 qPCR(real time PCR， 实时荧光定量 PCR)之后的第三代PCR 技术，与qPCR相比，数字PCR 具有更高的灵敏度，且无需标准品，采用终点信号扫描计数，不依赖 Ct 值，能有效克服 PCR 抑制剂的影响，能灵敏地验出 ASFV 病毒，深蓝云生物科技开发非洲猪瘟病毒的数字 PCR 检测方法，尽早发现，有效防控。 重复性 深蓝云生物科技开发的非洲猪瘟数字PCR检测方法针对同一浓度样本进行重复检测，结果的CV值小于4.5%。 讨论 非洲猪瘟检测现多用荧光定量PCR方法进行定性检测，仅判断病毒有无，不能准确定量，且需要预扩增提高检测灵敏度。 深蓝云生物科技的非洲猪瘟数字PCR检测方法，无需标准品，无需预扩增步骤，直接给出待测样本中的病毒绝对含量，同时具备更高的特异性性灵敏度。实现猪场一线的早处理、早隔离，做到精准防控，降低损失。冻肉、肉制品、其他深加工食品中的特异性和超灵敏检测。 法国Stilla Technologies 公司开发的Naica Crystal微滴数字PCR系统，以创新型微流控芯片作为唯一耗材，形成25，000-----30，000个微滴的2D阵列，以单层平铺方式进行PCR扩增实验，反应完成后对微滴进行三通道成像，从而得到精准的核酸绝对数量。两个半小时之内，可快速获得结果。 Nacia数字PCR是继普通PCR和qPCR(real time PCR，实时荧光定量PCR)之后的第三代PCR技术，与qPCR相比，数字PCR具有更高的灵敏度，且无需标准品，采用终点信号扫描计数，不依赖Ct值，能有效克服PCR抑制剂的影响，能灵敏地验出ASFV病毒，深蓝云生物科技开发非洲猪瘟病毒的数字PCR检测方法，尽早发现，有效防控。