新冠病毒中新冠病毒流式标本处理检测方案

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实验室新冠病毒流式标本处理的4大注意事项！ 在进入正题之前，杰懋小编有话说： 自2019年12月以来，新型冠性病毒已经疯狂施虐了我们2个月的时间，这场无声的硝烟比我们想象中的要来得激烈，这场战争比我们想象中要更持久，经过千千万万位白衣天使的努力和付出，经过广大民众以及社工人员的坚持和努力，疫情总算在一点一点得到控制。 然而，在最近两天，网上突然铺天盖地般地出现了人群开始松懈、摘掉口罩聚集的消息，这是一件多么可怕的事情！截止2020年2月23号，钟南山战士称当前疫情仍然严峻，目前已达到最吃劲的时候，所以，希望广大民众在安全响应解除之前都别掉以轻心，否则白衣天使的夜以继日的拼命就白费了，之前足不出户的坚持都白费了！ 国家卫健委批准，1月25日发布的《北京协和医院关于“新型冠状病毒感染的肺炎”诊疗建议方案（V2.0)》第二条“2019-nCoV病人的诊疗-诊断标准中提到：对于急性发热对于急性发热（72h内，体温大于37.5度）且肺部影像学正常者，若外周血淋巴细胞绝对值小于0.8×109/L，或出现CD4及CD8 T细胞计数明显下降者，即使核酸检测未呈现阳性，均应居家隔离密切观察。病人常规检查中提到：1、筛查病例，就诊当日可酌情查炎症因子（IL-6,IL-10,TNF-α）、TB亚群11项.2、确诊病人序贯检查，第5-7天若有条件可复查TB淋巴细胞亚群11项。 因为免疫受到临床的重视，许多新冠病人的定点医院都开展了流式的检测。对于流式工作的老师，除了结果的准确及解读以外，也需要关注生物安全的防护。 下面就整理的流式样本处理过程中一些注意事项，献给我们的流式工作者们。 01样本加样： 建议在生物安全柜进行实验操作，如有液体溅出，用浸湿75%酒精的纱布覆盖后擦拭。个人按照3级生物安全进行防护。 2019-nCov 生物安全防护措施：  一级生物安全防护：医用外科口罩、乳胶手套、工作服、医用防护帽，加手卫生  二级生物安全防护：医用防护口罩或N95口罩、乳胶手套、工作服、外隔离衣、医用防护帽，加手卫生，酌情可加护目镜。  三级生物安全防护：医用防护口罩或N95、双层乳胶手套、面屏、护目镜、工作服外防护服、双层医用防护帽，加手卫生、必要时双层口罩（外医用防护口罩，内N95）。 02溶血及固定： 根据卫生部2011年发布的《流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南》，尽量使用含固定剂的溶血素可以达到灭活病毒的作用。 如使用其他不带固定剂成分的溶血素如氯化铵，也可以配制0.1%-2.0%的多聚甲醛或甲醛，或者稀释好的细胞保存液在溶血时一起加入，并且放置30min，可以达到灭活病毒的作用。 03混匀、离心等步骤防护： 灭活前的样品处理步骤，须严格按照三级防护，谨防气溶胶污染，例如：  使用带生物安全密封盖或密封杯的离心机进行离心（如德国NACHT纳赫特高速冷冻离心机NACHTC-30R配套的透明密封杯系列），样品管/流式管最好带密封盖离心，不使用自动脱帽离心功能；  即使室温离心，也选用密封更良好的制冷型离心机（如德国NACHT纳赫特NACHTC-30R），并置于负压抽风区域；  离心后静置10-30分钟再开盖，仔细观察样品无泄漏后，再把透明密封杯移至生物安全柜再开盖取样。 04仪器的清洗及维护： 如有样本的洒溢，请用浸湿75%酒精的纱布覆盖30min后擦拭，包括样本进样针。 流式细胞仪的废液桶中需要装有占其体积 1/10的0.71mol/L次氯酸钠 (未稀 释的家用漂白剂)。 实验室设备应该用具有灭活传染源作用的溶液或新配制的 10%家用漂白剂消毒 ,尤其在设备维修和保养前给予严格消毒。 在这紧要的关头，奋战在一线的战士希望你们平安健康，还未可出门的朋友希望你们继续坚持一下，已经复工的小伙伴们希望你们千万注意防护和安全，待到疫情结束，我们再去武汉看樱花，再看祖国这大好山河的春意盎然。 参考资料： 1. 《北京协和医院关于“新型冠状病毒感染的肺炎”诊疗建议方案（V2.0)》 2. 2019新型冠状病毒相关实验室检测的生物安全指南（试行第一版）--中华医学会检验分会 3. 流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南--2011版卫生部行业标准 免责声明：本文部分内容摘自网络，如侵请联系。 国家卫健委批准，1月25日发布的《北京协和医院关于“新型冠状病毒感染的肺炎”诊疗建议方案（V2.0)》第二条“2019-nCoV病人的诊疗-诊断标准中提到：对于急性发热对于急性发热（72h内，体温大于37.5度）且肺部影像学正常者，若外周血淋巴细胞绝对值小于0.8×109/L，或出现CD4及CD8 T细胞计数明显下降者，即使核酸检测未呈现阳性，均应居家隔离密切观察。病人常规检查中提到：1、筛查病例，就诊当日可酌情查炎症因子（IL-6,IL-10,TNF-α）、TB亚群11项.2、确诊病人序贯检查，第5-7天若有条件可复查TB淋巴细胞亚群11项。 因为免疫受到临床的重视，许多新冠病人的定点医院都开展了流式的检测。对于流式工作的老师，除了结果的准确及解读以外，也需要关注生物安全的防护。 下面就整理的流式样本处理过程中一些注意事项，献给我们的流式工作者们。 01样本加样： 建议在生物安全柜进行实验操作，如有液体溅出，用浸湿75%酒精的纱布覆盖后擦拭。个人按照3级生物安全进行防护。 2019-nCov 生物安全防护措施：  一级生物安全防护：医用外科口罩、乳胶手套、工作服、医用防护帽，加手卫生  二级生物安全防护：医用防护口罩或N95口罩、乳胶手套、工作服、外隔离衣、医用防护帽，加手卫生，酌情可加护目镜。  三级生物安全防护：医用防护口罩或N95、双层乳胶手套、面屏、护目镜、工作服外防护服、双层医用防护帽，加手卫生、必要时双层口罩（外医用防护口罩，内N95）。03混匀、离心等步骤防护： 灭活前的样品处理步骤，须严格按照三级防护，谨防气溶胶污染，例如：  使用带生物安全密封盖或密封杯的离心机进行离心（如德国NACHT纳赫特高速冷冻离心机NACHTC-30R配套的透明密封杯系列），样品管/流式管最好带密封盖离心，不使用自动脱帽离心功能；  即使室温离心，也选用密封更良好的制冷型离心机（如德国NACHT纳赫特NACHTC-30R），并置于负压抽风区域；  离心后静置10-30分钟再开盖，仔细观察样品无泄漏后，再把透明密封杯移至生物安全柜再开盖取样。更多内容请查看附件!