溶液中Fmoc-Tyr(tBu)-OH检测方案(有机质谱仪)

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LAAN-A-LM-E129 ApplicationNNo.C159News岛津SHIMADZUhttp：//www.shimadzu.com.cn用户服务热线电话： 800-810-0439第一版发行日：2017年7月400-650-0439 直接探针电离质谱仪 化学反应的实时监测 在化学领域，为了准确了解进行中的反应类型，监测化学反应的过程和速率非常重要。 探针电喷雾电离 (PESI) 是一种直接电离技术，该技术以恒定频率采集样品，并向探针尖端施加高电压，利用探针电离采集到的目标成分。这种电离技术无需色谱仪即可快速监测样品变化。DPiMS-2020(图1)结合PESI和质谱仪，对要分析的成分实时监测分子量信息的变化，以此准确了解化学反应的进程。 本文介绍了 DPiMS-2020实时分析肽保护基的去保护反应的结果，其中肽保护基在样品板上生成。 T. Murata 肽去保护反应 将23.0 mg Fmoc-Tyr(tBu)-OH(N-(9-芴甲氧羰基)-0-叔丁基-L-酪氨酸)溶于5mL DMF(溶液①)，将哌辰和 DMF的溶液以 1：4的比例混合(溶液②)。当溶液①与溶液②混合时，将在室温下发生 Fmoc 基团的去保护反应(图2)。将4.5 uL的溶液①和溶液②注射到 PESI溶液分析所用的小(10uL)样品板中以诱导发生去保护反应，并实时分析反应过程。 表1列出了PESI 探针的驱动条件，表2列出了质谱仪的分析条件。 小样品板 图1 DPiMS-2020 图 2 Fmoc-Tyr(tBu)-OH的去保护反应 表 1 PESI驱动条件 电离位置 ：-37mm 电离停止时间 ： 100 msec 采样位置 ：-46 mm 采样停止时间 ： 50 msec 探针速度 ：250 mm/s 探针加速度 ：0.63G 表2质谱仪分析条件 DL温度 ：250°C 加热模块温度 ： 50°C 离子源接口电压 ：-2.45kV (ESI-负模式) 扫描速度 ：5，000 u/sec 反应过程的实时监测 利用扫描获得的质谱图监测Fmoc-Tyr(tBu)-OH负离子强度的衰减，能够以0.1分钟的间隔实时监测去保护反应。图3显示在溶液混合后， Fmoc-Tyr(tBu)-OH的负离子强度从3分钟标记降低到4.5分钟标记。 因挥发所致采样体积减少的影响 尽管我们的目的在于通过在样品板上混合两种类型的溶液来监测反应，但是由于样品板直接放在DL 下方，并设置为高温，因此溶液混合的体积可能会在分析过程中因挥发而减少。这可能导致探针所采集溶液的体积减少，并使离子强度降低。为了消除这种影响，并只监测去保护反应进展所导致的离子强度降低情况，通过将 m/z 474 处的离子设为内标峰，并绘制 m/z 458 和 m/z 474强度比与溶液混合后时间的图(图4)来确定溶液混合后反应进展的速度。因此，我们可以实时监测去保护反应的进度。 图3去保护反应的时间系列质谱 去保护反应过程 图4去保护反应的时间序列变化 ( 致谢 ) 名古屋大学医学研究院的副教授 Kei Zaitsu 和助理教授 Yumi Hayashi 在数据采集和样品制备方面提供了指导，我们对此深表感谢! 岛津应用云 ( 免责声明： ) ( 岛津企业管理(中国)有限公司岛津(香港)有限公司 ) ( *本资料未经许可不得擅自修改、转载、销售； ) ( *本资料中的所有信息仅供参考，不予任何保证。如有变动，恕不另行通知。 ) 探针电喷雾电离（PESI）是一种直接电离技术，该技术以恒定频率采集样品，并向探针尖/端施加高电压，利用探针电离采集到的目标成分。这种电离技术无需色谱仪即可快速监测样品变化。DPiMS-2020（图1）结合PESI和质谱仪，对要分析的成分实时监测分子量信息的变化，以此准确了解化学反应的进程。