旋转蒸发仪在茶叶中农药多残留测定中的作用

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旋转蒸发仪在茶叶中农药多残留测定 气相色谱/质谱法中的作用（根据中华人民共和国国家标准GB/T 23376-2009）一、原理本实验由茶叶试样中的有机磷、有机氯、拟除虫菊酯类农药经加速溶剂萃取仪用乙腈十二氯甲烷提取，提取液经溶剂置换后用凝胶渗透色谱）（GPC）净化、浓缩后，用气相色谱-质谱仪进行检测，选择离子和色谱保留时间定性外标法定量。二、使用试剂1. 环己烷2. 乙酸乙酯3. 正己烷4. 有机相微孔滤膜：孔径0.45um5. 36种农药标准物质（纯度大于98%）6. 农药混合标准储备溶液：根据每种农药在仪器上的响应灵敏度确定其在混合标准储备液中的浓度，用SOCOREX 826可调微量移液器移取适量100ug/ml单种农药标准样品于10ml容量瓶中，用正己烷定容，配置36种农药混合标准储备溶液7. 基质混合标准工作溶液三、使用仪器1. 气相色谱-质谱仪：配有电子轰击电离源（EI）2. 加速溶剂萃取仪（ASE）3. 凝胶渗透色谱仪（GPC）4. 旋转蒸发仪5. 氮气吹干仪6. 高速离心机7. 分析天平8. 粉碎机9. 移液器：100ul、1ml各一只四、分析步骤1. 提取称取磨碎的均匀茶叶试样5g，加适量的水润湿，移入加速溶剂萃取仪的34ml萃取池中，用乙腈十二氯甲烷作为提取溶剂，在10.34MPa（1500psi）压力、100℃条件下，加热5min，静态萃取5min，循环1次。用池体积60%的乙腈十二氯甲烷冲洗萃取池，并用氮气吹扫100s，萃取完毕，将萃取液转移到100ml鸡心瓶中，于40℃水浴中减压ChemTron STRIKE 285旋转蒸发仪近干，然后用适量乙酸乙酯+环己烷溶解残余物后转移至10ml离心管中，再用乙酸乙酯+环己烷定容至10ml。将此10ml溶液用WIGGENS BIOCEN 22R微量台式离心机高速离心（10000r/min，5min）后过0.45um滤膜，待凝胶色谱净化。2. 净化取上述提取液5ml按照凝胶色谱条件【净化柱：填料50gBio-beads-X,柱径25mm；柱床高32cm；流动相：环己烷+乙酸乙酯；流速：5ml/min；排除时间:1080s；收集时间：600s】净化，将净化液置于氮气吹干仪上（≤40℃）吹至今干，用正己烷定容至0.5ml，用GC/MS测定。3. 测定（1） 参考分析条件a. 色谱柱：DB-17ms（30mX0.25mmX0.25um）石英毛细管柱或柱效相当的色谱组b. 色谱柱升温程序：60℃保持1min，然后以30℃/min升温至160℃，再以5℃/min升温至295℃，保持10minc. 载气：氦气（纯度≥99.999%），恒流模式，流速为1.2ml/mind. 进样口温度：250℃e. 进样量：1ulf. 进样方式：无分流进样，1min后打开分流阀g. 离子源：EI源，70eVh. 离子源温度：230℃i. 接口温度：280℃j. 测定方式：选择离子检测（SIM）。每种目标化合物分别选择1个定量离子，2个~3个定性离子。每组所有需要检测的离子按照保留时间的先后顺序，分时段分别检测。（2） 定性测定进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品一致，在扣除背景后的样品质谱图中所选择的离子均出现，且所选择的离子丰度比与标准样品的离子丰度比一致，则可判断样品中存在这种农药化合物。（3） 定量测定本标准采用外标校准曲线法单离子定量测定。为了减少基质对定量测定的影响，需用空白样液来制备所使用的一系列基质标准工作溶液，用基质标准工作溶液分别进来绘制标准曲线。并且保证所测样品中农药的响应值均在仪器的线性范围内。4. 空白实验五、结果计算六、注意事项1. 所需试剂 农药混合标准储备溶液配置完成后应当避光4℃保存，可使用一个月2. 基质混合标准工作溶液应现配现用旋转蒸发仪在茶叶中农药多残留测定气相色谱/质谱法中 的作用 (根据中华人民共和国国家标准GB/T 23376-2009) 一、原理 本实验由茶叶试样中的有机磷、有机氯、拟除虫菊酯类农药经加速溶剂萃取仪用乙腈十二氯 甲烷提取，提取液经溶剂置换后用凝胶渗透色谱)(GPC) 净化、浓缩后，用气相色谱-质谱 仪进行检测，选择离子和色谱保留时间定性外标法定量。 二、使用试剂 1.环己烷 2.乙酸乙酯 3.正己烷 4.有机相微孔滤膜：孔径0.45um 5.36种农药标准物质(纯度大于98%) 6.农药混合标准储备溶液：根据每种农药在仪器上的响应灵敏度确定其在混合标准储备液 中的浓度，用 SOCOREX 826 可调微量移液器移取适量 100ug/ml单种农药标准样品于 10ml容量瓶中，用正己烷定容，配置36种农药混合标准储备溶液 7.基质混合标准工作溶液 三、使用仪器 1.气相色谱-质谱仪：配有电子轰击电离源(EI) 2.加速溶剂萃取仪(ASE) 3.凝胶渗透色谱仪(GPC) 4.旋转蒸发仪 5.氮气吹干仪 6.高速离心机 7.分析天平 8.粉碎机 9.移液器： 100ul、1ml各一只 ChemTron STRIKE 285 旋转蒸发仪 WIGGENS BIOCEN 22R 微量台式离心机 SOCOREX 826 可调微量移液器 WIGGENS WB-503G蒸发器、氮吹仪 四、分析步骤 1.提取 称取磨碎的均匀茶叶试样5g， 加适量的水润湿，移入加速溶剂萃取仪的 34ml萃取池中，用乙腈十二氯甲烷作为提取溶剂，在 10.34MPa (1500psi)压力、100℃条件下，加热 5min，静态萃取 5min， 循环1次。用池体积60%的乙腈十二氯甲烷冲洗萃取池，并用 WIGGENS WB-503G 蒸发器、氮吹仪吹扫100s，萃取完毕，将萃取液转移到 100ml鸡心瓶中，于 40℃水浴中减压 ChemTron STRIKE 285 旋转蒸发仪近干，然后用适量乙酸乙酯+环己烷溶 解残余物后转移至10ml离心管中，再用乙酸乙酯+环己烷定容至10ml。将此 10ml 溶液 用 WIGGENS BIOCEN 22R 微量台式离心机高速离心 (10000r/min， 5min) 后过 0.45um 滤膜，待凝胶色谱净化。 2.净化 取上述提取液 5ml按照凝胶色谱条件【净化柱：填料 50gBio-beads-X，柱径 25mm；柱床 高32cm；流动相：环己烷+乙酸乙酯；流速： 5ml/min； 排除时间：1080s；收集时间：600s】净化，将净化液置于氮气吹干仪上(≤40℃)吹至今干，用正己烷定容至0.5ml，用 GC/MS 测定。 3.测定 (1)参考分析条件 a. 色谱柱： DB-17ms (30mX0.25mmX0.25um)石英毛细管柱或柱效相当的色谱组 b. 色谱柱升温程序：60℃保持1min， 然后以30℃/min 升温至160℃， 再以5℃/min 升 温至295℃，保持 10min c. 载气：氦气(纯度≥99.999%)，恒流模式，流速为 1.2ml/min d. 进样口温度：250℃ e. 进样量：1ul f.进样方式：无分流进样， 1min 后打开分流阀 g. 离子源：EI源， 70eV h. 离子源温度：230℃ I.接口温度：280℃ j. 测定方式：选择离子检测 (SIM)。每种目标化合物分别选择1个定量离子，2个~3个 定性离子。每组所有需要检测的离子按照保留时间的先后顺序，分时段分别检测。 (2)定性测定 进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品一致，在扣除背景后的样品质谱 图中所选择的离子均出现，且所选择的离子丰度比与标准样品的离子丰度比一致，则可判断 样品中存在这种农药化合物。 表 1 定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度/% ≥>50 >20~50 >10~20 ≤10 最大允许偏差/% ±10 ±15 ±20 ±50 (3)定量测定 本标准采用外标校准曲线法单离子定量测定。为了减少基质对定量测定的影响，需用空白样 液来制备所使用的一系列基质标准工作溶液，用基质标准工作溶液分别进来绘制标准曲线。并且保证所测样品中农药的响应值均在仪器的线性范围内。 4.空白实验 五、结果计算 试样 中 每种 农 药残留量按 式(1)计算 ： 式中 X ——试 样 中 被测组 分 残留量 ，单位为 毫克 每千 克 (m g /k g )； c——从标 准曲线 上得到 的被测 组 分溶液浓度 ，单 位为 微 克 每老 升(u g /m L)； V—-样品定容体 积 ，单 位为 毫升 (mL)； m——试 样的 质 量 ，单 位为克(g ). 六、注意事项 1.所需试剂农药混合标准储备溶液配置完成后应当避光4℃保存，可使用一个月 2.基质混合标准工作溶液应现配现用