初乳素（保健食品）中免疫球蛋白IgG检测方案(液相色谱柱)

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采用 TSKgel 色谱柱参考 GB 5009.194-2003分析保健食品中免疫球蛋白 IgG 免疫球蛋白GImmunoglobulin G 【基本信息】 IgG 是免疫球蛋白 G(Immunoglobulin G， lgG)的缩写，是血清主要的抗体成分，约占血清 lg 的75%。其中40~50%分布于血清中，其余分布在组织中。IgG 是唯一可以通过胎盘的免疫球蛋白。IgG 的功能作用主要在机体免疫中起保护作用，大多数抗菌、抗病毒；应对麻疹、甲型肝炎等，能有效地预防相应的感染性疾病。免疫球蛋白分为五类，即免疫球蛋白G(lgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白D (IgD) 和免疫球蛋白E(IgE)。 【分析条件】 仪器： UltiMate3000 色谱柱： TSKgel ProteinA-5PW (4.6 mmI.D.x3.5 cm) 流动相A： pH6.5， 0.05 mol/L 磷酸盐缓冲液 流动相B：pH2.5， 0.05 mol/L 甘氨酸盐酸盐缓冲液 流速：0.4mL/min 柱温：35℃ 进样体积： 20pL 检测器： UV280 nm 梯度洗脱表见表1。 表1.梯度洗脱表 时间/(min) 流速/(mL/min) A/(%) B/(%) 梯度 0 0.4 100 0 一 4.5 0.4 100 0 6 5.5 0.4 0 100 6 15.0 0.4 0 100 6 15.5 0.4 100 0 6 22.0 0.4 100 0 6 分析结果： 图1IgG对照品溶液谱图 图2初乳素样品溶液谱图 表2.采用 TSKgel ProteinA-5PW 色谱柱分析初乳素中 IgG 样品峰参数结果 峰号 名称 保留时间(min) 理论塔板数 分离度 2 IgG (Immunoglobulin) 9.08 35565 18.99 IgG 与前面杂质峰的分离度Rs 为 18.99，两次进样测定结果的算术平均差值与算术平均值比值为0.26%，满足算术平均差值与算术平均值比值小于10.0%。 结论 采用上述方法可以满足国标 GB 5009.194-2003 对 IgG 分析测定要求。 附图：是 GB 5009.194-2003 的 IgG、初乳素分离谱图。 色谱图 图11IgG标准色谱图 图2初乳素色谱图 本方法中采用了亲和色谱柱TSKgel Protein A-5PW（4.6 mmIDX3.5cm）分析初乳素中IgG含量。结果表明该方法可以满足国标GB 5009.194-2003保健食品中免疫球蛋白IgG的测定要求。