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【求助】有谁用液相测过琥珀酸(丁二酸)的含量?
chongziliang
2008/06/26
私聊
液相色谱(LC)
查了很多资料,好像没有使用
液相
单独测定琥珀酸的含量,一般都是测定有机酸的(同时测定几种有机酸,其中包括琥珀酸)。
今天我按照参考文献做了琥珀酸的测定。
条件如下
色谱柱:Shimadzu C18柱(5um粒径 250×4.6mm)
流动相:5% CH3OH – 0.10 mol/ L KH2PO4(pH 3.0)缓冲溶液(V/ V)
流速:1 mL/ min
柱箱温度:室温(22 ±2 ℃)
检测波长:215 nm
进样量:20μL
资料说此条件下琥珀酸的保留时间为7-8min,线性范围0-600ug/mL.
今天分别进了1mg/L,10mg/L的标样,可是20min内一直不出峰,怀疑是标样的浓度太低,后来又进了1mg/mL 的标样,结果20mi内仍然不出峰。
(我是新手,当时没有继续延长时间.....)
我以为此方法测不出来,后来用甲醇冲洗柱子时在60min左右出现了几个很大的峰。
我不知道是我的标样琥珀酸的峰,还是其他的物质?? 比如柱子里的其他残留物? 不过我觉得进样前柱子已经冲洗干净了
哪位大侠测过琥珀酸的,能不能给些指导?
液相
是不是不适合低或是微含量琥珀的测定。先跪谢
@
哭谢!!
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Easy-Boy
第1楼
2008/06/27
应该是的,你需要使用梯度洗脱吧,而不是只用盐溶液做流动相。
0
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