kuenlin
第5楼2009/07/24
樓上幾個先進的說法已經將問題解釋得非常清楚,不過我在這裡用數學的觀點來解釋。
首先探討PE軟體的計算方法。
我們在分析時順序為Cal. Blank-STDs.-Reagent Blanks-Samples。這應該沒有什麼問題。
儀器得到的都是Intensity值,所以分析的時候我們會得到Cal. Blank的Intensity值,我們叫作ICB;接下來分析STDs,我們會得到ISTD,檢量線製作就是以ISTD - ICB,以濃度作X軸I值為Y軸進行回歸製作檢量線。我想大家都可以理解這樣的製作,也應該跟大家的想法一樣。
接下來作Reagent Blank,我們會得到IRB,不過此時軟體就會計算濃度了,濃度的計算就是IRB - ICB得到的值帶入檢量線中,求得Reagent Blank的濃度,我們叫作CRB。所以大家在做Reagent Blank的時候會得到一個濃度值。分析樣品的時候我們會得到IS,樣品的濃度怎麼算呢?是IS-ICB帶入檢量線算出濃度,然後得到濃度還要減掉CRB(Reagent Blank的濃度),才會得到樣品的濃度。
所以在原始報告上面會看到樣品的Corr. Int.只有扣掉Cal. Blank的強度,濃度則是有扣掉Reagent Blank的濃度。這是最大的差異。
另外會產生問題的還有檢量線方程式跟Reagent Blank的部分。Reagent Blank的部分比較簡單,有兩種可能性:一、RB的背景很高,甚至比樣品高,這樣子你的值有可能會是負的,這有可能是RB拿錯或汙染;二、RB背景很低,甚至比CB低,這樣子你的樣品會被加成上去,造成你的樣品值超出標準。
檢量線部分都用線性方程式:Y=AX+B,當你B值(截距)很高的時候,你的樣品分析後帶入檢量線會被先扣掉B值,所以有可能成負的,所以你調方程式調整過原點後就解決了,因為方程式變成Y=AX而以,所以不會被扣掉截距。另外也有可能截距是負值,那你的樣品可能就會由沒有值變成有值。