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【求助】进样后不出峰??

  • pengyan033
    2009/10/28
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 2005年版中国药典中规定用梯度洗脱测三七药材中的含量.我在做此试验时,条件都按药典规定的设置完后,开始做的空白梯度挺好.当进第一针对照后出来的三个色谱峰也不错.可连续进第二针对照后,最后一个峰却没有在同样的保留时间内走出来.接着我又进第三针对照,可是还没有出峰.为什么会这样?究竟是什么原因呢?我设置的时长是75分钟.最后一个峰在65分钟左右出峰.请高手们多多指教.
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  • Alex0802

    第1楼2009/10/28

    只有最后一个峰没出来吗?前面两个峰都出来了啊?很奇怪哦!
    以前我遇到过不出峰是因为柱的出液口管路有裂痕,样品就没进检测器!

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  • 有水有渝

    第2楼2009/10/28

    应助达人

    有对照品吗?有的话进一个对照品看看是否也是一样的结果

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  • nnsss

    第3楼2009/10/29

    梯度准吗,色谱柱平衡时间够吗(进样间隔)

    pengyan033(pengyan033) 发表:2005年版中国药典中规定用梯度洗脱测三七药材中的含量.我在做此试验时,条件都按药典规定的设置完后,开始做的空白梯度挺好.当进第一针对照后出来的三个色谱峰也不错.可连续进第二针对照后,最后一个峰却没有在同样的保留时间内走出来.接着我又进第三针对照,可是还没有出峰.为什么会这样?究竟是什么原因呢?我设置的时长是75分钟.最后一个峰在65分钟左右出峰.请高手们多多指教.

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  • pengyan033

    第4楼2009/10/30

    对照品出峰。可样品就走不出来。我怀疑是梯度没有平衡好,可是我设置了90分钟还是不出。间隔时间有20分钟左右。

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  • 哇咔咔

    第5楼2009/10/30

    如果对照品有,样品没有,考虑下工艺是否有问题.是否提取出来了,或者药材本身含量.

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  • 有水有渝

    第6楼2009/11/01

    应助达人

    对照品有,而样品没有,那就要从工艺和前处理上找一下原因。

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  • 西湖醉鱼

    第7楼2009/11/02

    样品可能有问题

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  • wangjuan55

    第8楼2009/11/02

    你的意思是样品处理都按药典,第一针三个峰都出现了,后面最后一峰没有出现。有意思。我做过一个样品,是因为有一个成分不稳定,流动相选择不好,保留时间改变比较大,而且吸收发生改变,所以找了很久。建议查下相关文献,看下第三成分。新手,自己也不懂。

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  • cunsou

    第9楼2009/11/02

    我也怀疑样品是不是有问题

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  • bright1016

    第10楼2009/11/02

    柱子冲洗的时间不够长,就是平衡时间。
    样品的处理有问题。
    查看检测器,进一针标准品。

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