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【求助】谁能来讨论一下这液相图谱

液相色谱(LC)

  • 这是用液相VWD做的苯丙酮酸和苯丙酮酸钙的图谱,出峰后基线上漂。
    有想法的同志指点一二!!



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  • fmwxq

    第1楼2010/08/20

    是等度还是梯度?稳定多长时间?

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  • zouxizhen

    第2楼2010/08/20

    波长210nm,基线很不平稳的。波长太低,溶剂吸收峰也很大

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  • lly81881

    第3楼2010/08/21

    等梯度的。基线走了将近70min。
    我做其他的样同样210波长,没有这样的问题

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  • 有水有渝

    第4楼2010/08/21

    应助达人

    应该是样品的基质可能有影响,上样前先净化一下试试。能不能把样品溶液稀释一下再进?

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  • 乐果

    第5楼2010/08/23

    低流速多洗一段时间

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  • 初晶古恒

    第6楼2010/08/23

    样品溶剂与流动相成分要保持一致,尤其在用到缓冲盐的情况下。

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  • flyyzf

    第7楼2010/08/23

    有可能是流动相的极性与样品不太协调调整极性试一下

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  • lly81881

    第8楼2010/08/23

    怎样调整极性?改一下流动相比例?还是更换流动相?

    应该是样品的基质可能有影响,上样前先净化一下试试,怎样净化样品?过滤一下,还是调些PH,或是什么??

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  • 省部重点实验室

    第9楼2010/08/24

    1、柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。)
    a、控制好柱子和流动相的温度,在检测器之前使用热交换器
    2、流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。)
    a、使用HPLC级的溶剂,高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气,使用中使用氦气。
    3、流通池被污染或有气体
    a、用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要,可以用1N的硝酸。(不要用盐酸)
    4、检测器出口阻塞。(高压造成流通池窗口破裂,产生噪音基线)
    a、取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。
    5、流动相配比不当或流速变化
    a、更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。
    6、柱平衡慢,特别是流动相发生变化时
    a、用中等强度的溶剂进行冲洗,更改流动相时,在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。
    7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成
    a、检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂
    8、样品中有强保留的物质(高K’值)以馒头峰样被洗脱出,从而表现出一个逐步升高的基线。
    a、使用保护柱,如有必要,在进样之间或在分析过程中,定期用强溶剂冲洗柱子。
    9、使用循环溶剂,但检测器未调整。
    a、重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时,使用新的流动相。
    10、检测器没有设定在最大吸收波长处。
    a、将波长调整至最大吸收波长处

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  • 省部重点实验室

    第10楼2010/08/24

    M、 基线噪音(规则的)
    1、在流动相、检测器或泵中有空气
    a、流动相脱气。冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。
    2、漏液
    a、见第三部分。检查管路接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要,更换泵密封。
    3、流动相混合不完全
    a、用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂
    4、温度影响(柱温过高,检测器未加热)
    a、减少差异或加上热交换器
    5、在同一条线上有其他电子设备
    a、断开LC、检测器和记录仪,检查干扰是否来自于外部,加以更正。
    6、泵振动
    a、在系统中加入脉冲阻尼器
    N、 基线噪音(不规则的)

    1、 漏液
    a、见第三部分。检查接头是否松动,泵是否漏液,是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要,更换密封。检查流通池是否漏液。
    2、流动相污染、变质或由低质溶剂配成
    a、检查流动相的组成。
    3、流动相各溶剂不相溶
    a、选择互溶的流动相
    4、检测器/记录仪电子元件的问题
    a、断开检测器和记录仪的电源,检查并更正。
    5、系统内有气泡
    a、用强极性溶液清洗系统
    6、检测器内有气泡
    a、清洗检测器,在检测器后面安装背景压力调节器
    7、流通池污染(即使是极少的污染物也会产生噪音。)
    a、用1N的硝酸(不能用磷酸)清洗流通池
    8、检测器灯能量不足
    a、更换灯
    9、色谱柱填料流失或阻塞
    a、更换色谱柱
    10、流动相混合不均匀或混合器工作不正常
    a、维修或更换混合器,在流动相不走梯度时,建议不使用泵的混合装置

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