儒雅凤
第1楼2010/11/13
方法验证过程:
1 色谱条件的确定
大多数磺胺类药物常以磷酸/乙腈体系做为流动相,而磺胺喹恶啉在该体系下出峰时间是56min,影响检测效率。改用磷酸盐/甲醇体系做流动相。
通过改变磷酸盐和甲醇的比例,磺胺喹恶啉的保留时间发生了变化。
磷酸盐 : 甲醇 磺胺喹恶啉保留时间 (min)
70 : 30 4.86
75 : 25 7.80
80 : 20 12.32
出峰早磺胺喹恶啉与杂质峰相互干扰,出峰晚影响检测效率,峰形变宽。磷酸盐与甲醇比例75:25较为合适。
2 方法线性与最小检出限
对5.0、10.0、20.0、100.0 mg/kg的添加浓度按上述方法测定。
方法最小检出浓度为5.0mg/kg。磺胺喹恶啉的使用剂量鸡配合饲料是60g/t,能够检出低于用量10倍浓度已能满足检测需要。
3 方法的准确度与精密度
根据磺胺喹恶啉在配合饲料中允许使用量为60 mg/kg,取配合饲料分别制成5、60、100mg/kg的磺胺喹恶啉添加试样,每个浓度做5个平行,提取,上机测定,计算回收率及方法变异系数。