【求助】SDS-Page蛋白条带总是很粗，求原因分析

tianru的爸爸,进来帮忙解决下吧

有好几年没有做过电泳了……
pH值确定准确吗？可以尝试增加浓缩胶的长度或者调整电压

高手呀，救命啊，

现在应该是你的目标蛋白出现的问题：其它蛋白的结果还是可以看清楚的，并且蛋白条带分离的效果也可以，只是目标蛋白处有严重的问题——前展。

你的蛋白溶解性如何？如果不好的话，把整个体系的SDS加倍量（正常应该是0.1%的SDS，必要时加量，甚至更多）。如果很好，再检查盐浓度，你的样品盐浓度是否与电泳用样品缓冲液的盐浓度相当，差的多（高的多不好，低的多，也不好），就用透析或类似的方法换换液再电泳。

另外降低电压可以减少拖尾，一般至少要降低25%的电压才有显著效果。

必要时加一个BSA的样品作对照用（电泳效果对照），这样可以判断是样品有问题，还是电泳体系（电泳胶、样品缓冲液、电极缓冲液、电压电流与温度）有问题。

有问题再问，大家在一起总会有办法解决的。

怀疑是样品本身的问题！
从胶上看有点象是分离纯化的过程中间品，样品本身的pH，离子强度有会有影响。建议在问题不明确的时候，即使不用标准品，也要加一个对照品，如BSA等，这样才能确定是样品问题，还是电泳的问题了。

我做的不多；不过建议还是把电压降低一下，看看效果如何再说
说不定是由于小问题造成的

看你的胶 有点皱眉 应该是胶的浓度不太均匀 然后 你的样品脱盐了么 或者是你的样品溶解性不太好 你上面那块胶是什么条件跑的 你跑的也是不连续SDS-PAGE电泳么 你可以换一下电泳缓冲液 再试试

样品条带粗 可以用不连续试一下 再说了 你可以减小上样量的 你上多少微升啊