尼莫地平注射液含量方法学研究
尼莫地平为1,4-二氢吡啶类钙通道拮抗剂。其药理特性是阻断中枢神经系统内细胞膜的钙通道,有效地调节细胞内钙的水平,使之保持正常的生理功能。下面是含量方法学研究。
含量测定照高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录Ⅴ D)测定,避光操作。
1.色谱条件:
色谱柱:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;
流动相:甲醇:乙腈:水=35:38:27;
检测波长:235nm;
进样量:20ul;
柱温:35°C
流速:1.0ml/min。
2.精密度试验
精密称取尼莫地平对照品约20mg,置100ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取5.0ml,分别置50ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,精密量取20μl注入液相色谱仪,记录色谱图,重复进样6次,计算精密度。结果见表1。
由试验结果可知,RSD小于1%,表明该方法精密度良好。
3.线性关系
精密称取尼莫地平对照品约20mg,置100ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取2.0、3.0、5.0、6.0、7.0、8.0ml,分别置50ml量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,分别精密量取20μl注入液相色谱仪,记录色谱图,结果见表2。
线性方程为A=67935.82C-1996.73;r=0.9999。
结论:本品在8.06~32.24μg/ml范围内,浓度与峰面积呈线性关系。
4.溶液的稳定性试验取本品适量,加流动相稀释制成1ml中约含20μg的溶液,在避光条件下放置,分别于0,1,2,4,8小时,精密量取20μl注入液相色谱仪,记录色谱图,结果见表3。
试验结果表明:本品溶液在8小时内测定稳定。
5.回收率试验
精密称取尼莫地平约8、10、12mg各三份,分别置50ml量瓶中,分别加入处方量的辅料空白溶液,超声助溶后,加水稀释至刻度,摇匀,滤过,量取续滤液1.0ml,置10ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,精密量取20μl注入液相色谱仪,记录色谱图;另取尼莫地平约20mg,用流动相稀释制成每1ml中约含20μg的溶液,同法测定,按外标法以峰面积计算,即得。测定结果见表4。
平均回收率为99.65%;RSD为0.33%
结论:由以上结果知,本品含量测定方法准确度较高。
6.含量测定重复性试验
取本品(######),照含量测定项下方法测定含量,重复6次的测定结果见表5。
平均值;101.2%;RSD=0.54%
结论:本品含量测定方法重复性较好。
7.含量测定
取本品,加流动相稀释制成1ml中约含20μg的溶液,取20μl注入液相色谱仪,记录色谱图;另取尼莫地平适量,同法测定。按外标法以峰面积计算,结果见表6。