高效液相色谱法测定四环素类药物
氧四环素和四环素同属四环素类药物,它们是由链霉菌产生或经半合成制取的一类碱性广谱抗生素,是人类常用的一种消炎药,效果较好,但属抗毒素,少用较好。四环素类药物也是一种常用的兽药,经常用于动物注射和加于动物饲料等动物性食品中。至于加的量,国家是有最高残留限量的标准的,各相关单位必须严格执行。
氧四环素化学式:C22H24N2O9=460.44
四环素化学式:C22H24N2O8=444.43
原理
准确称取适量药物(或含药物的饲料、食品等),粉碎,溶解,过滤,浓缩,定容,注入高效液相色谱系统,经C18色谱柱分离,荧光检测器检测,色谱工作站计算处理(色谱峰保留时间定性,峰面积定量)。
仪器
高效液相色谱仪:配一台或两台高压输液泵,荧光检测器,自动进样器,柱温箱,在线脱气机
超声波振动仪
溶剂过滤器
分析型天平
试剂
甲醇:色谱纯
咪唑
乙二胺四乙酸二钠
醋酸镁
乙酸
二次蒸馏水
色谱条件
色谱柱:Venusil XBP C18(4.6 X 250mm,5ul)
V9520525CK0043
流速:1.2mL/min
流动相:咪唑缓冲液:甲醇=17:3(V:V)
咪唑缓冲液:68.08 克咪唑、0.37 克乙二胺四乙酸二钠、10.72 克醋酸镁用水溶解成800mL,溶液加乙酸调节pH=7.2,用水定容至1000mL
波长:激发波长:380nm,发射波长:520nm
柱温:40℃
进样量:20μL
标准品色谱图:
某药物中氧四环素和四环素测定色谱图: