1.正己烷除的是面粉中少量的脂肪;2.偶氮二甲酰胺是易电离的碱性物质,做碱性物质时流动相应调成中性或偏碱性,加乙酸铵起到缓冲作用,维持流动相的pH稳定,并使流动相保持一定的离子强度,减少分析物与残留硅羟基间的相互作用,减少拖尾,改善峰形;3.我有个疑问,偶氮甲酰胺的极性非常大,在常规的C18柱上,不衍生的话,你们是如何做到保留的。
Coyliu(v2727051) 发表:各位高手们,我的实验室正在开发面粉中偶氮二甲酰胺的HPLC方法,目前已经成功实现了,在这里和大家分享一下方法,同时不太明白的问题想请教一下。
步骤:称取1g面粉,加10mL丙酮,振荡15min,离心取5mL上清吹干,乙酸铵溶液复溶,1mL正己烷净化,取下层过膜上机。(我参考了别人的文献)
柱子用的是C18,流动相是乙酸铵:乙腈=80:20
这是我的方法,大家有什么好的建议请提一下。
我的问题是:
1、提取步骤中加入1mL 正己烷的目的是什么?文献上说在这里的作用就是除酯的,可是在实验过程中会有酯产生吗?还是说正己烷加入是有别的目的呢?
2、在选择乙酸铵作为流动相时的根据是什么?因为溶于碱,不溶于汽油、醇、苯、吡啶和水,所以我想请教一下为什么会选择乙酸铵。
非常感谢大家!!