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单糖的PMP衍生化遇到问题,困扰许久,请各位大侠帮忙。

测试版面

  • 我现在做标准单糖的PMP衍生化,用HPLC检测,用的是C18柱,对照品是葡萄糖、甘露糖、半乳糖,鼠李糖,阿拉伯糖和木糖,出现的问题是:各单糖对照品在同一个时间出峰,混和各单糖标品后也只出现一个峰,到底是怎么回事呢???流动相比例我也尝试很多种,可还是出现同样的问题,实验进行不下去,头疼啊!!!!具体的实验方法
    单糖混合液的制备:
    配制浓度为0.36μg单糖标准品溶液,取其100μL与0.6mol/LNaOH溶液100μL混合,再加入0.5mol/LPMP甲醇溶液200μL混匀。70℃水浴反应100min,冷却至室温10min后,加0.3mol/LHCl溶液200μL中和,加水900μL,混匀,加入氯仿1.5m萃取,混匀,静置,弃氯仿相,依法萃取3次,水相经0.45μm滤膜过滤后进样。
    色谱条件:
    进样量20μL,流动相为17%的乙腈-磷酸盐缓冲液,流速1mL/min
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  • Ins_66420a99

    第1楼2022/11/07

    楼主怎么解决的 我也遇到了这个问题 太难了

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  • Ins_58898441

    第2楼2023/09/11

    请问你们解决了吗?我也是PMP的峰特别高,单糖标准品很低。

    Ins_66420a99(Ins_66420a99) 发表:楼主怎么解决的 我也遇到了这个问题 太难了

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