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HPLC样品组分分离不开怎么办

  • Ins_1048f27a
    2021/07/18
  • 私聊

液相色谱

  • 发酵液测组分用HPLC,标品打了,可以分开,但是打样品的时候峰就分不开了。用的C18反向色谱柱,流动相是甲醇:水:冰醋酸,试了流动相甲醇和水的配比,还是分不开。求高人指点!
    图一是标品,图二是样品
  • }
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  • 安平

    第1楼2021/07/19

    应助达人

    发酵液的组成较为复杂,未必一定能够将目标物和杂质分离开。

    可以考虑调节一下流动相的组成,尽量改善分离度。

    如果是反相色谱系统,一般考虑提高流动相中水相的比例,增加保留,改善分离。

    只要杂质不会严重干扰目标组分的积分,那么就可以定量。

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  • Ins_1048f27a

    第2楼2021/07/20

    我是调整了流动相比例,减少甲醇,到达一定极限的时候,80min标品都出峰不完全了,而样品还是分离不开,挤在一起

    安平(byron1111) 发表: 发酵液的组成较为复杂,未必一定能够将目标物和杂质分离开。 可以考虑调节一下流动相的组成,尽量改善分离度。 如果是反相色谱系统,一般考虑提高流动相中水相的比例,增加保留,改善分离。 只要杂质不会严重干扰目标组分的积分,那么就可以定量。

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