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色谱图基线问题

液相色谱(LC)

  • 跑出来的色谱图基线一直是波动锯齿状,尤其是前20分钟,上一个柱子跑的图没有这种情况,换了根新柱子就变成这样了,求大神指教一下问题在哪
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  • mingxiaoyan

    第1楼2021/12/23

    有如下可能:
    1、流通池有东西
    流通池里面可能有东西,出不来,在那儿来回。建议:换个流动相能走平之后,再换回去,看看能否走平(波长不要调)
    2、压力脉动
    3、有气泡

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  • JOE HUI

    第2楼2021/12/23

    应助达人

    楼主可以排查下:1.流动相里面有气泡.可以通过观察泵压是否稳定,一般波动很小,否则应赶气泡不仅是流动相的,有的气泡在泵头应用注射器抽头;
    2.色谱柱问题.重新换了根柱子依然出现锯齿状,可排除柱子原因,可用二通不接色谱柱,用50%异丙醇冲洗包括检测器可能被污染,处理方法很多,你可搜索一下;
    3.排除流动相原因可用纯甲醇冲洗观察,另外甲醇又是赶气泡的一个比较好的溶剂;
    不在现场,只能简单判断,放心,不是大问题!若不行再慢慢排查,

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  • 安平

    第3楼2021/12/24

    应助达人

    楼主详细说说具体分析条件为好,什么流动相,什么柱子,什么样品?


    流动相是单泵输送还是两相输送?

    继续再进样的话 ,谱图还是这个状态么?



    看上去像是混合不良所致,有可能系统存在气泡等问题

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  • hnteng

    第4楼2021/12/24

    这是应该是有气泡。

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  • 恩恩妍妍

    第5楼2021/12/24

    新柱子里的有机相残留吧,有没有用之前先用流动相平衡

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  • Ins_2d6846ba

    第6楼2021/12/25

    新购色谱柱在使用之前,有必要进行活化操作,以便延长色谱柱的使用寿命,不同类型的色谱柱有不同的活化方法,下面就一些常规的液相色谱柱进行活化方法的介绍:

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    常规反相色谱柱:如最常用的C18柱,先用甲醇或乙腈冲洗20-30倍的柱体积,然后再用流动相平衡10-30倍柱体积。(若使用含盐流动相,则需要使用含原有比例但不含盐的流动相进行中间过渡,以防色谱柱堵塞)

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  • dadgoh

    第7楼2021/12/26

    应助达人

    使用梯度了吗?

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