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测定糖皮质激素回收率特别低

  • Ins_d528703c
    2022/06/06
  • 私聊

液质联用(LCMS)

  • 前处理
    取样品乳粉2g,加5ml纯水,使用涡旋振荡仪震荡5min,加10ml乙腈,涡旋震荡10min,加入均质石,分别称取1gNaCl5gMgSO4,震荡5min。以8000r/min转速离心5min,收集上清液。

    收集的上清液加入依次加入0.5gPSA0.5g无水MgSO40.5gC18,涡旋10min10000r/min离心5min,收集上清液转入15ml离心管内,加入5ml正己烷震荡2min,,静置5min,取5ml乙腈层,40℃氮吹至干,1ml乙腈溶解残渣,0.20μm滤膜过膜,待LC-MS/MS测定。

    检测小白,每次的上机浓度都是2ppb,但是测出来的浓度连1ppb都不到。请大佬们帮帮忙解决一下,我的问题出在哪里了。
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  • 123

    第1楼2022/06/06

    应助达人

    可以参考一下https://m.zhangqiaokeyan.com/academic-journal-cn_big-technology_thesis/0201281622429.html

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  • wuyuzegang

    第2楼2022/06/06

    应助达人

    回收率低一般是前处理的问题,特别是最后的氮吹定容等环节一定要精确

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  • hujiangtao

    第3楼2022/06/06

    应助达人

    楼主检测的糖皮质激素含量较低,首先要优化好液相、质谱条件让目标物响应达到最好:由于糖皮质激素与甲酸根能够形成共轭离子[M HCOO]-,因此甲酸是糖皮质激素诱导解离过程不可缺少的物质。所以甲酸含量过低,会影响糖皮质激素与甲酸根离子的结合;甲酸浓度过高,影响糖皮质激素的解离。因此,糖皮质激素虽然是在负离子模式下检测,但是在分析时往系统里加一点甲酸,灵敏度会有一个很大程度的提高。
    前处理过程中氮吹近干即可,不要完全吹干不然会影响回收率;最后定容最好不要用纯有机相,会产生溶剂效应同时基质影响离子化效率,最好加1:1的水相,外标法定量的话要用基质标

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