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色谱峰拖尾问题

  • Insm_72d8a690
    2022/08/30
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 做的物质是25羟基维生素D2及D3,D2这个峰拖尾,调了流动相酸度了,峰型锐化了,拖尾还是没有改善,求助一下各位老师,应该要怎么调整?
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  • 123

    第1楼2022/08/30

    应助达人

    调整流动相的ph<3或者换根柱子

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  • xiaolanzi5

    第2楼2022/08/30

    应助达人

    峰拖尾考虑几点:1.柱头堵塞或塌陷2.样品有没有过载3溶剂与样品是否匹配4缓冲液不合适5假拖尾6次保留效应,等等

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  • Insm_72d8a690

    第3楼2022/08/31

    老师我们这是根新柱子应该不是柱子问题,样品应该也没有过载,D2这个浓度只有120ng/mL,这个溶剂是筛选过得了,是流动相溶的,我们是用的AB液质做的,流动相没有放缓冲盐,怕影响离子强度,优化的时候试过把流动相的酸度从0.2%的甲酸提高到了0.4%,峰型没有什么太大的变化。梯度也已经优化过了,目前不知道还应该向哪方面优化

    xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:峰拖尾考虑几点:1.柱头堵塞或塌陷2.样品有没有过载3溶剂与样品是否匹配4缓冲液不合适5假拖尾6次保留效应,等等

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  • myoldid

    第4楼2022/08/31

    应助达人

    看样子是系统有死体积,既然柱子是新的,那重新连接一下柱子,包括保护柱。另外注意一下保护柱的填料要和你用的注意填料一致

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  • Ins_9070be6a

    第5楼2022/09/15

    保留有点弱。可以换载碳量高,或者碳链更长填料的柱子。或者减少进样量

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