第4季“仪器心得”+TU-1810SPC紫外/可见分光光度计使用心得

TU-1810SPC紫外/可见分光光度计使用心得

十月

TU-1810SPC紫外可见分光光度计是北京普析通用仪器有限责任公司生产的产品，可独立完成光度测量、定量测定、光谱扫描、时间扫描、DNA/蛋白质测量及三维图谱分析等功能，其波长范围为190-1100 nm，光谱带宽：0.5、1、2、5 nm（四档可变狭缝），波长准确度：±0.3 nm，光度范围：-0.3～3.0Abs，光度准确度：±0.002 Abs（0～0.5 Abs），该款分光光度计具有出色的技术指标及稳定可靠的工作特性，流畅的人机对话操作（测定结果稳定可靠，操作简便），可满足用户各种分析工作的需求诸如光度测量、光谱扫描、时间扫描及三维图谱分析等，且售后服务良好，深受广大分析工作者的喜爱，在基层实验室有广泛的装备应用。本实验室在2005年装备了该款分光光度计，主要用于光度测量、定量测定、光谱扫描、时间扫描，现就光谱扫描、时间扫描应用情况谈几点体会。

1、光谱扫描:主要是为了测量某物质的吸收光谱曲线以获得该物质的最大吸收波长(λ_max)，这对于没有光谱扫描功能的光度计而言则是比较麻烦且费时的，特别是对于稳定性较差的物质要想获得准确的λ_max还是比较困难的，但对于有光谱扫描功能的光度计而是非常容易的，所以应用好仪器的光谱扫描功能，可以很方便测定出某物质的吸收光谱曲线，而后通过峰值检出来确定该物质的λ_max并用于该物质的光度测定。

进行光谱扫描时，首先是要确定扫描的波长范围即起始和终止波长，一般可根据待扫描物质的性质如颜色等大致确定其λ_max，如红色物质其λ_max位于500 nm左右，那么其光谱扫描的波长范围可选择400～600 nm，例如：盐酸氯丙嗪可氧化成红色化合物，经对350～600 nm波长范围扫描确定其λmax位于525 nm波长处，试剂空白的λmax位于360 nm波长处，见图1。

λ/nm

图1 盐酸氯丙嗪氧化产物扫描光谱图

而对于蓝色物质其λ_max位于600 nm左右，那么其光谱扫描的波长范围可选择500～700 nm，例如：蓝色的铁（Ⅱ）-硫代紫尿酸配合物，经对300～800 nm波长范围扫描确定其具有两个吸收峰分别位于658 nm和384nm波长处，图2。具体扫描时先可以选择一个大致的波长范围进行扫描，再根据情况进行适当调整，以便获得合适的扫描光谱图。

图2 铁（Ⅱ）-硫代紫尿酸配合物扫描光谱图

图3 CN^--异烟酸-硫代巴比妥酸体系在525 nm（0～20min）和642nm（0～60min）处的时间吸收曲线