摘要:使用北京聚芯追风Acrichi DK802A全自动顶空进样器,依据《GB 5009.262-2016 食品安全国家标准 食品中溶剂残留量的测定》,测定食用油中溶剂(六号溶剂)残留量…
食用植物油的加工工艺一般分为压榨法和浸出法;浸出法指的是利用油脂和有机溶剂相互溶解的性质,使用溶剂将油料中的油脂萃取出来,然后再通过加热汽提,脱除油脂中溶剂的方法。浸出法常用的溶剂是一种以六碳烷烃为主要成分的烷烃、环烷烃、芳香烃的混合物,统称六号溶剂,其对产品的流变学、色泽、气味、氧化稳定等理化性质产生重大影响,同时其毒性也对油脂的食用安全性构成潜在威胁。
本实验依据《GB 5009.262-2016 食品安全国家标准 食品中溶剂残留量的测定》,使用北京聚芯追风Acrichi DK802A全自动顶空进样器-与安捷伦7890A气相色谱仪测定食用植物油、食品加工用粕类中溶剂(六号溶剂)残留量。
一 实验条件
1.1 仪器设备
安捷伦科技 7890A气相色谱仪;
北京聚芯追风Acrichi DK802A全自动顶空进样器;
1.2顶空进样器条件
1.3色谱条件
1.3.1 温度
进样口:250℃;
检测器温度:300℃
柱箱:50℃;
温度程序(程序升温,共18.83min;):50℃(3min);1℃/min,55℃(3min);30℃/min,200℃(3min);
1.3.2 流量
载气:氮气
进样模式:分流进样
柱流量:
恒定流量,1mL/min(柱前压77.6kPa);
分流流量:25mL/min
分流比:25:1
1.3.3 色谱柱
KB-5,30m×0.25mm×0.25μm;
1.3.4 样品
顶空进样,顶空条件参考1.1;
顶空瓶内加入样品体积5mL;
顶空进样定量环体积:1mL
内标(正庚烷)配置:
按照以下方法,配置浓度为68mg/kg的正庚烷(内标物)标准工作液。
标准品选择:
标准样品配置:
按照以下方法,配置浓度为0mg/kg、10mg/kg、20mg/kg、50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg的六号溶剂-基体植物油标准溶液。
说明:本实验使用了橄榄油作为基体植物油
1.3.5 检测器
火焰离子化检测器(FID)
空气流量:400ml/min;
氢气流量:30ml/min;
尾吹气(N2):30ml/min;
采样频率:50Hz;
二 色谱图及出峰顺序
2.1定量图谱
以下为浓度0mg/kg、10mg/kg和200mg/kg的六号溶剂-基体植物油标准溶液色谱图:
1)浓度0mg/kg的六号溶剂-基体植物油标准溶液色谱图
在目标位置无干扰峰,内标峰型正常;
2)浓度10mg/kg的六号溶剂-基体植物油标准溶液色谱图
①-⑥号峰为六号溶剂组分,依次分别为:①2-甲基戊烷;②3-甲基戊烷;③正己烷;④甲基环戊烷;⑤环己烷;⑥2,3-二甲基戊烷;⑦号峰为内标峰正庚烷;放大后的图谱如下:
其中,⑥号峰2,3-二甲基戊烷接响应值接近检出限(以3倍基线噪声计),各峰峰型正常,分离度均大于1.5:
说明:上图为利用校准曲线计算浓度为10mg/kg的六号溶剂-基体植物油标准溶液的反算结果。
3)浓度200mg/kg的六号溶剂-基体植物油标准溶液色谱图
①-⑥号峰为六号溶剂组分,依次分别为:①2-甲基戊烷;②3-甲基戊烷;③正己烷;④甲基环戊烷;⑤环己烷;⑥2,3-二甲基戊烷;⑦号峰为内标峰正庚烷;各峰峰型正常,分离度均大于1.5。
说明:上图为利用校准曲线计算浓度为200mg/kg的六号溶剂-基体植物油标准溶液的反算结果。
2.2 标准曲线与线性
本次实验配制浓度为0mg/kg、10mg/kg、20mg/kg、50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg的六号溶剂-基体植物油标准溶液,其响应值、标准曲线及线性如下:
2.2.1 单组分标准曲线与线性
2.2.2 化合物组的标准曲线与线性
依据《GB 5009.262-2016 食品安全国家标准 食品中溶剂残留量的测定》的规定,在定量时需要“以标准溶液与内标物浓度比为横坐标,标准溶液总峰面积与内标物峰面积比为纵坐标绘制标准曲线”,因此,需要使用到工作站的“组校准”功能。
有关使用安捷伦气相色谱工作站实现“组校准/组校正”的详细内容,本文不再介绍。
三 分析方法讨论
本次分析需要使用工作站的“组校准”功能,本文不涉及;除此之外,在定量计算过程中,会涉及到化合物的识别和积分。
六号溶剂是由多种化合物组成,在定量计算时,应当计算标准溶液多个峰的总峰面积;对于较低浓度的标准样品溶液,以下图浓度为10mg/kg的六号溶剂-基体植物油标准溶液色谱图为例,环己烷和2,3-二甲基戊烷使用默认参数一般难以识别,为了避免手动积分划基线,建议通过更改积分参数来实现:
说明:①-⑥号峰为六号溶剂组分,依次分别为:①2-甲基戊烷;②3-甲基戊烷;③正己烷;④甲基环戊烷;⑤环己烷;⑥2,3-二甲基戊烷;⑦号峰为内标峰正庚烷;
如果采用默认积分参数,,积分结果如下图:
可调整积分参数,使需要的峰被系统自动积分,下图:
下图展示了更改前的积分参数和更改后的积分参数对比:
调整积分参数后,色谱图积分如下:
可以看到,未积分的峰(4min之前)被积分,但是积分划线方式略不符合习惯,可以继续调整,下图:
最终,通过调整积分参数,使谱图的色谱峰达到较好的积分效果,避免了手动积分带来的一系列问题,如积分不准确、重复性不好、数据真实性存疑等。
需要说明的是,应当根据谱图的实际情况,调整积分参数;积分参数将会存储在校正方法中,对使用该校正方法的所有数据使用同样的参数。
声明:本文在公众号“气相色谱分析”同步发表。