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安捷伦1290超高效液相色谱,想鉴定某种植物里某种化合物的含量,自己前期有分离出该种化合物的纯品,但是不同浓度的标准品的出峰时间不一样,且样品中的该化合物的峰要么是出峰时间与标准品不一样,要么就是分不开,是什么原因呢?还有基线总是跑不平,流动性是乙腈比水为4:6

  • Ins_9173df71
    2023/11/19
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 想鉴定某种植物里某种化合物的含量,前期有分离出该种化合物的纯品,但是后期做定量时,不同浓度的标准品的出峰时间有细微差别,且样品中的该化合物的峰要么是出峰时间与标准品不一样,要么就是分不开,是什么原因呢?还有基线总是跑不平(如图所示),流动性是乙腈比水为4:6,
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  • 通标小菜鸟

    第1楼2023/11/20

    应助达人

    1、楼主的图没有传上来,因而看不到,可以再补一下。
    2、走样基线不平,这个问题考虑是否是仪器系统的问题,不管做什么分析,仪器首先要保证是状态好的,比如观察平衡时的系统压力是否有波动,如果平衡时压力波动就比较大,那不管是你的样品还是基线肯定走不好。
    3、走的标品和样品出峰时间不一致,还有峰分不开,对于这种情况,我怀疑楼主走的样品本身性质也有点关系,是否测试过pH值?我看楼主走的是等度,且流动相中未加入其它物质,建议楼主在样品中加入缓冲盐,这样有利于保留时间的稳定,同时对于分离度不好,也可以考虑将等度优化为梯度。
    总而言之,先在仪器本身方面下手,维护好仪器,确保仪器没有问题,排除仪器系统不稳定造成的出峰异常。然后再从分析方法本身入手进行优化,比如调节流动相,设置梯度洗脱等等。

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  • xiaolanzi5

    第2楼2023/11/21

    应助达人

    会不会是有旋光异构的情况,不同浓度下会相互转换,导致出峰时间不一致?

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