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抗原选择攻略:蛋白抗原免疫vs多肽抗原免疫,哪种更适合您?
Ins_bf0c01c3
2023/11/22
私聊
生命科学仪器综合讨论
在免疫学的世界中,抗原的选择是至关重要的。近年来,许多研究者提出了各种不同的抗原类型以供选择,其中最引人注目的两种是蛋白抗原和多肽抗原。这两种抗原各有其独特的优势和特点,那么,如何在这两者之间做出选择呢?本文将为您详细解析两者的差异以及应用场景,帮助您在免疫学研究中做出最佳的选择。
①为什么选择蛋白抗原免疫?
您需要一种适用于多种应用的抗体
您的目标蛋白与其他蛋白的序列相似性低,易于表达和纯化,且无毒
适用于以下应用:
Western Blot
、
ELISA
、
IP/ChIP
、
IHC
……
②为什么选择多肽抗原免疫?
您的预期抗体应用仅包括
WB
,
ELISA
或翻译后修饰检测。
您的目标蛋白与其他蛋白具有高度的序列相似性,很难或不可能表达和纯化。
适用于以下应用:
Western Blot
、
ELISA
、
PTM Detection
多肽抗原是基于天然靶蛋白的序列精心选择的短氨基酸序列。
当目标蛋白的获取受限时,多肽是一种合适的解决方案。
它们也是检测靶蛋白翻译后修饰(
PTM
)位点的理想抗原,因为它们限制了潜在表位的数量。 虽然潜在表位少对于大多数抗体项目和应用来说是缺点,但是当产生
PTM
抗体时,有限数量的表位使得发现仅针对
PTM
位点的反应性抗体更易。
多肽抗原的局限性:
多肽抗原由于其价格低和周期短而具有吸引力,但更重要的是要考虑它的局限性。蛋白质抗原能够诱导针对构象表位的抗体,而针对肽抗原的抗体只能识别线性表位。尽管多肽产生的抗体可以在其他应用中起作用。但多肽抗原的价值主要体现在翻译后修饰检测抗体的制备。例如,抗多肽抗体可以应用于
Western blots
和
ELISA
。然而,线性化蛋白必须包括用于免疫的固有线性多肽抗原的表位,以确保阳性结果。
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