液相色谱某个峰保留时间变化很大

应助达人

方法开发中也发现这种情况，首先看压力稳不稳，压力稳，仪器没问题的话就是该化合物与流动相不匹配导致的。通常目标物在流动相中会离子化，有时会有离子态有时是分子态，离子态在c18柱上保留弱，出峰早，分子态相对容易保留，出峰晚。当化合物的pka与流动相ph差的不大时，目标物在流动相中有时是离子态有时是分子态，这就造成保留时间的不稳定。所以要根据化合物的pka值调整流动相ph值。

应助达人

如果仅有某个组分发生问题，可能与色谱柱或流动相不良有关。

与仪器无关。


建议更换色谱柱或流动相，修改梯度洗脱程序实验。

应助达人

楼主详细描述具体的分析条件为好

就是只有一个峰在变
0.01-15 min，10%-50% ACN；15.01-16 min，50% ACN；16.01-30 min, 10% ACN，30 ℃

这是最近两天的

压力是正常的，我前一个半月跑出来都是重复的结果，就最近两周在变。离子态会这样吗？那这个峰我是不知道结构是什么的，我要怎么去调pH呢？

应助达人

梯度洗脱结束后，需要重新平衡系统，否则容易出现类似的问题。建议你尝试一下把梯度洗脱程序设置的平衡时间长一点对比一下看看。

感谢回答，在水相中加了0.1%甲酸，这个峰就尖尖的了，确实是个酸性化合物。

应助达人

不错不错！