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紫外可见分光光度计测出的标准曲线斜率过大怎么回事?R2在三个九以上

  • Ins_bc37ebf2
    2024/02/23
  • 私聊

紫外可见分光光度计(UV)

  • 按照参考文献,配置0.1mg/ml对照品溶液。分别吸取0.5mL、0.75mL、1 mL、1.25mL、1.5mL对照品溶液,置于25mL容量瓶中,加入显色试剂2.5mL,摇匀,加入7%碳酸钠溶液6.25mL,蒸馏水定容,70°C水浴反应40min,采用紫外分光光度法,在波长760nm处测定吸光度值。以质量浓度为横坐标(X),吸光度值为纵坐标(Y)绘制标准曲线,得到标准曲 线回归方程,斜率很大,做了四次实验,R2都在三个九以上,但是斜率基本都很大,怎么解决?
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  • 通标小菜鸟

    第1楼2024/02/23

    应助达人

    比色法出现斜率过大的原因:
    1、浓度问题,校正点中被测因子的实际浓度高于曲线浓度。
    2、吸光度问题,在显色反应中,某个干扰物与显色剂反应并产生干扰,使得吸光度变大。
    3、考虑做实验用的试剂和器皿受到污染。

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  • 等一个晴天

    第2楼2024/02/23

    应助达人

    斜率大,截距也很大,核查一下试剂有没有污染或者是开瓶时间较长,贮存不当变质了

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  • ztyzb

    第3楼2024/02/23

    应助达人

    1、楼主没做零浓度点空白吗?考虑是纯水或者试剂的影响;2、建议自行配制标准品用有证标准标准溶液或者标准样品验证准确度,有可能是配制标准溶液本身的问题;3、考虑同步做仪器比对和人员比对查找原因。

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  • oscar_2007

    第4楼2024/02/24

    应助达人

    1. 加上空白零点,看看纯试剂有没有问题。
    2.考虑试剂污染问题及干扰因素,建议重新配制,注意器皿的清洁。
    3.做个人员比对看看结果是否一样分析原因。

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  • 夕阳

    第5楼2024/02/25

    应助达人

    相关系数三个9太棒了!本底空白高可以采取扣除背景方式(但是需要使用双光束仪器)来解决。

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  • m3316431

    第6楼2024/02/25

    需要做零点空白,如果高的话,就在试剂纯度上找问题。

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  • Insp_ab748ec4

    第7楼2024/02/28

    大神的观点很精辟

    通标小菜鸟(v3141805) 发表:比色法出现斜率过大的原因:1、浓度问题,校正点中被测因子的实际浓度高于曲线浓度。2、吸光度问题,在显色反应中,某个干扰物与显色剂反应并产生干扰,使得吸光度变大。3、考虑做实验用的试剂和器皿受到污染。

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  • Ins_bc37ebf2

    第8楼2024/03/03

    谢谢大佬!因为可能也是我个人操作问题,已经排除了试剂干扰,空白组也已做,还是没办法做好这个标曲,所以换了其他文献参考做标曲,谢谢大佬们提的建议!????

    通标小菜鸟(v3141805) 发表:比色法出现斜率过大的原因:1、浓度问题,校正点中被测因子的实际浓度高于曲线浓度。2、吸光度问题,在显色反应中,某个干扰物与显色剂反应并产生干扰,使得吸光度变大。3、考虑做实验用的试剂和器皿受到污染。

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  • Ins_bc37ebf2

    第9楼2024/03/03

    谢谢大佬!因为可能也是我个人操作问题,已经排除了试剂干扰,空白组也已做,还是没办法做好这个标曲,所以换了其他文献参考做标曲,谢谢大佬们提的建议!

    等一个晴天(m3170710) 发表:斜率大,截距也很大,核查一下试剂有没有污染或者是开瓶时间较长,贮存不当变质了

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  • Ins_bc37ebf2

    第10楼2024/03/03

    谢谢大佬!因为可能也是我个人操作问题,已经排除了试剂干扰,空白组也已做,还是没办法做好这个标曲,所以换了其他文献参考做标曲,谢谢大佬们提的建议!????

    ztyzb(zxz19900120) 发表:1、楼主没做零浓度点空白吗?考虑是纯水或者试剂的影响;2、建议自行配制标准品用有证标准标准溶液或者标准样品验证准确度,有可能是配制标准溶液本身的问题;3、考虑同步做仪器比对和人员比对查找原因。

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