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第1楼2024/04/01
相对定量
相对定量是一种比较性的分析方法,它用于比较不同样品中目标化合物的相对含量或表达水平。在这种方法中,不需要知道目标化合物的绝对浓度值,而是通过比较样品之间的峰高或峰面积来确定相对差异。
特点:
- 不需要已知浓度的标准品来建立校正曲线。
- 通常使用内标法来校正样品处理和仪器分析过程中的变异。
- 重点在于样品间的比较,而非获得精确的浓度值。
- 适用于表达水平变化的研究,如基因表达分析、蛋白质定量等。
绝对定量
绝对定量旨在获得目标化合物的精确浓度值。这种方法需要使用已知浓度的标准品来建立校正曲线,通过比较样品中目标化合物的响应与标准曲线上的响应来计算其浓度。
特点:
- 需要制备一系列已知浓度的标准溶液,用于建立校正曲线。
- 可以是外标法或内标法。外标法通过比较样品中目标化合物的响应与标准曲线上的响应来定量;内标法则在样品中加入已知浓度的内标物,以校正样品处理和仪器分析过程中的变异。
- 适用于需要精确浓度信息的研究,如药物代谢、环境污染物检测等。
应用场景
相对定量:常用于生物学研究,如比较不同处理条件下细胞或组织中特定蛋白质或代谢物的变化。
绝对定量:适用于药物开发、环境监测、食品安全等领域,需要准确知道化合物的浓度水平。
在液质联用分析中,选择相对定量还是绝对定量取决于实验目的、数据精度要求以及可用的标准品等因素。相对定量提供了一种快速、简便的比较手段,而绝对定量则提供了更精确的测量结果。