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我的HPX-87H色谱柱可能进了高浓度葡萄糖导致色谱柱堵塞了,这种情况要怎么办呀

  • Ins_4ad0cca6
    2024/04/16
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 实验室HPX-87H色谱柱本科生稀释样品的时候好像漏样导致色谱柱堵住了,现在压力稳定,基线也很稳定,对称性很好,但是就是样品重复性很差,一个样品五针进去能出三个结果,这种情况要怎么办呀,继续冲洗还是再生呢,已经用流动相冲了好多天了
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  • 通标小菜鸟

    第1楼2024/04/17

    应助达人

    楼主,检查压力是否和以前一样,如果一样,说明堵塞问题解决了,接下去就是样品残留问题,一般进高浓度之后可能会有仪器残留,楼主可以连续进几针空白溶剂,看一下目标物出峰位置是否有残留峰。如果有,那需要继续冲洗管路,如果没有,准备一个浓度适中的标样,连续进6针,统计保留时间和峰面积RSD%,用以评估仪器的稳定性。

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  • ztyzb

    第2楼2024/04/17

    应助达人

    楼主,柱效没有明显下降的话不需要再生的,可以参考以下方式查找和解决堵塞问题
    查堵的方法是从尾向前逆向分段拆开,仔细观察压力数值,如果某一个部件(柱子除外)装上和拆下时的压力差别很大,可发展变化判断。至于柱的堵塞,可以通过换同样规格的柱的压力是否一致来判断。具体检测步骤:
    首先断开真空泵的入口处,此时PEEK管里充满液体,使PEEK管低于溶剂瓶,看液体是否自由滴下,如果液体不滴或缓慢滴下,则是溶剂过滤头堵塞。处理方法:用30%的硝酸浸泡半个小时,在用超纯水冲洗干净。如果液体自由滴下,溶剂过滤头正常,再检查;
    打开冲洗阀(purge阀),使流动相不经过柱子,如果压力没有明显下降,则是过滤白头堵塞。处理方法:将过滤白头取出,用10%的异丙醇超声半个小时。如果压力降至100PSI (6.7 Bar)以下,过滤白头正常,在检查;
    把色谱柱出口端取下,如果压力不下降,则是柱子堵塞。处理方法:如果是缓冲盐堵塞,则用95%的水冲至压力正常。如果是一些强保留的物质导致堵塞,则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降,则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上,用流动相冲洗柱子。这时,如果柱压仍不下降,只有换柱子入口筛板,但一旦操作不甚,很容易造成柱效下降,所以尽量少用。

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  • 液相色谱柱维护

    第3楼2024/04/19

    柱头物理性损伤。我们修复过不少这种情况。类似板结在柱头部分,冲洗不掉的

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  • hujiangtao

    第4楼2024/04/19

    应助达人

    把前面筛板换一下

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  • Ins_5fedf754

    第5楼2024/07/17

    HPX-87H色谱柱能承受多大糖浓度呀?

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  • Ins_5fedf754

    第6楼2024/07/17

    HPX-87H色谱柱能承受多大糖浓度呀?

    通标小菜鸟(v3141805) 发表:楼主,检查压力是否和以前一样,如果一样,说明堵塞问题解决了,接下去就是样品残留问题,一般进高浓度之后可能会有仪器残留,楼主可以连续进几针空白溶剂,看一下目标物出峰位置是否有残留峰。如果有,那需要继续冲洗管路,如果没有,准备一个浓度适中的标样,连续进6针,统计保留时间和峰面积RSD%,用以评估仪器的稳定性。

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  • Ins_5fedf754

    第7楼2024/07/17

    HPX-87H色谱柱能承受多大糖浓度呀?

    ztyzb(zxz19900120) 发表:楼主,柱效没有明显下降的话不需要再生的,可以参考以下方式查找和解决堵塞问题
    查堵的方法是从尾向前逆向分段拆开,仔细观察压力数值,如果某一个部件(柱子除外)装上和拆下时的压力差别很大,可发展变化判断。至于柱的堵塞,可以通过换同样规格的柱的压力是否一致来判断。具体检测步骤:
    首先断开真空泵的入口处,此时PEEK管里充满液体,使PEEK管低于溶剂瓶,看液体是否自由滴下,如果液体不滴或缓慢滴下,则是溶剂过滤头堵塞。处理方法:用30%的硝酸浸泡半个小时,在用超纯水冲洗干净。如果液体自由滴下,溶剂过滤头正常,再检查;
    打开冲洗阀(purge阀),使流动相不经过柱子,如果压力没有明显下降,则是过滤白头堵塞。处理方法:将过滤白头取出,用10%的异丙醇超声半个小时。如果压力降至100PSI (6.7 Bar)以下,过滤白头正常,在检查;
    把色谱柱出口端取下,如果压力不下降,则是柱子堵塞。处理方法:如果是缓冲盐堵塞,则用95%的水冲至压力正常。如果是一些强保留的物质导致堵塞,则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降,则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上,用流动相冲洗柱子。这时,如果柱压仍不下降,只有换柱子入口筛板,但一旦操作不甚,很容易造成柱效下降,所以尽量少用。

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  • Ins_5fedf754

    第8楼2024/07/17

    HPX-87H色谱柱能承受多大糖浓度呀?

    液相色谱柱修复(Ins_9070be6a) 发表:柱头物理性损伤。我们修复过不少这种情况。类似板结在柱头部分,冲洗不掉的

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