【原创】流动相的故事1：流动相的配制

楼主有心，多谢很直观！

希望大家支持后续部分。
补充一下：分别量取是最准确地；用多元泵分别吸取时由于梯度混合延迟时间，保留时间会延长。

不错，以前都没注意。 还有吗？期待中

感谢提出问题并解答

第三种才是正确的方法

WHY ??????????

3、分别量取600ml甲醇和400ml水混匀.图中的第二种是最准确的。
第一图和第四图把一个往另一个里加，因为甲醇和水任意比混溶，400ml甲醇和600ml水合起来的最终体积并不是1000ml，而是比1000少很多，多以第一图和第四图方法做出的流动相的比例其实不是6：4，直接吸取时混和器的影响会有延时，混和效果不会很好，有可能还会出现峰保留时间重现性不好的后果。所以，分别吸取然后混和，以混和物做流动相的方法是最好的

有心人，应该是第二种比较好

楼主真的很细心，佩服，但这的原因具体是什么呢？

yjxia 发表:甲醇水混合体系是HPLC系统中溶剂混合效果最差的。不同的溶剂混合方式，会使保留时间发生明显的差异。
现配制60%甲醇水流动相，4.6*250 C18色谱柱。有四种不同的溶剂混合方式：1、将甲醇倒入400ml水中至1000ml；2、将水倒入600ml甲醇中至1000ml；3、分别量取600ml甲醇和400ml水混匀；4、用多元泵按比例6：4吸取纯甲醇和水。
以上四种方式对保留时间有什么影响呢？以下就是运行的色谱图。