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第11楼2007/10/27
红芪薄层层析
(1) 氨基酸的检查 样品制备:取本品粉末(40目)3g ,加水15ml冷浸过夜,滤过,滤液适当浓缩,供点样用。吸附剂:硅胶G(青岛海洋化工厂)湿法铺板,105℃活化40分钟。展开剂:乙醇-氨水-水(7:1:2)。展距20cm。显色剂:吲哚醌试剂喷雾,105℃烤10分钟,斑点显不同颜色。在以上展开系统中脯氨酸与γ-氨基丁酸Rf值接近,可以采用纸层析(Whatman滤纸),以乙醇-氨水(9:1)为展开剂,将二者分开,茚三酮显色,结果如图:(图左、中)
(2) 胡萝卜甙、谷甾醇的检查 样品制备:取本品粉末(40目)2g ,加甲醇10ml冷浸,放置过夜,滤过。滤液中加石油醚(60~90℃)5ml提取,分取石油醚液,浓缩至1 ml,供点样用。吸附剂:同上。展开剂:氯仿-无水乙醇(8:2)。展距20cm。显色剂:10%磷钼酸试剂喷雾,105℃烤10分钟,显蓝色斑点。(图右)
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第12楼2007/10/27
薄层层析样品制备:取本品粉末4g,加0.1%硫酸80ml冷浸,放置过夜,滤过,将滤液倾入经予处理过的苯乙烯磺酸钠型树脂柱(1×22cm),调节适度的流速,样品液流完以后,将树脂倒出,用蒸馏水洗数次,滤去水分,置盘中干燥(使水分不超过60%),加入适量10%氨水碱化,静置20分钟,置沙氏提取器中加氯仿回流洗脱(至无生物碱反应),氯仿液用水洗至中性,加无水硫酸钠少量,滤过,滤液蒸干,加氯仿1ml溶解,此液代表脂溶性总生物碱,吸取0.6μl点样。上述用氯仿回流过的树脂挥尽氯仿后,加乙醇回流洗脱,收集乙醇液减压蒸干,加甲醇1ml溶解,此液代表水溶性总生物碱。吸取0.6μl点样。吸附剂:硅胶G(青岛)加0.4%氢氧化钠溶液,湿法铺板,105℃活化1小时。展开剂:脂溶性总生物碱部分用氯仿-甲醇(10∶1)*。水溶性生物碱部分用氯仿-甲醇-氨水(15∶4∶1)。展距18cm。在荧光灯(254nm)下观察斑点情况。显色剂:用改良碘化铋钾-碘碘化钾(1∶1)混合试液显色,生物碱斑点呈橙色。 *:1.如果条件控制不好,粉防己碱和西法安生,小檗胺和箭毒碱往往出现同样的Rf值。为了得到较好的分离,前两者可采用苯-丙酮-无水乙醇-二乙胺(50∶40∶10∶1ml)。后两者可采用苯-氯仿-异丙醇(8∶8∶2),并在层离槽内置一浓氨水小杯。2.采用另一展开系统,海南地不容及小叶地不容则没有与异紫堇定碱相对应的斑点。
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第13楼2007/10/27
血散薯 薄层层析样品制备:取本品粉末4g,加0.1%硫酸80ml冷浸,放置过夜,滤过,将滤液倾入经予处理过的苯乙烯磺酸钠型树脂柱(1×22cm),调节适度的流速,样品液流完以后,将树脂倒出,用蒸馏水洗数次,滤去水分,置盘中干燥(使水分不超过60%),加入适量10%氨水碱化,静置20分钟,置沙氏提取器中加氯仿回流洗脱(至无生物碱反应),氯仿液用水洗至中性,加无水硫酸钠少量,滤过,滤液蒸干,加氯仿1ml溶解,此液代表脂溶性总生物碱,吸取0.6μl点样。上述用氯仿回流过的树脂挥尽氯仿后,加乙醇回流洗脱,收集乙醇液减压蒸干,加甲醇1ml溶解,此液代表水溶性总生物碱。吸取0.6μl点样。吸附剂:硅胶G(青岛)加0.4%氢氧化钠溶液,湿法铺板,105℃活化1小时。展开剂:脂溶性总生物碱部分用氯仿-甲醇(10∶1)*。水溶性生物碱部分用氯仿-甲醇-氨水(15∶4∶1)。展距18cm。在荧光灯(254nm)下观察斑点情况。显色剂:用改良碘化铋钾-碘碘化钾(1∶1)混合试液显色,生物碱斑点呈橙色。
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第16楼2007/10/28
地黄 薄层层析:样品制备:取本品干燥细粉2g,加甲醇20ml浸泡过夜,滤过。滤液中加入1倍生药量的氢型强酸阳树脂,浸泡过夜,滤过。滤液浓缩至一定量,用分液漏斗以石油醚抽提。石油醚抽取液和甲醇液分别点样。吸附剂:硅胶G(青岛)铺板,120℃活化2小时。展开剂:正丁醇-甲酸乙酯-甲醇(20:10:5)。展距14cm。显色剂:Godin试剂*(1%香草醛乙醇溶液和3%高氯酸水溶液,临用时等量混合)。喷雾后,室温挥干溶剂,80~90℃烤5分钟后显出斑点。
*:Maclennan,A.P.et al.:Anal.Chem.,1959,31,2020.
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第17楼2007/10/28
地榆 薄层层析
(1) 皂甙元的薄层层析 样品制备:取本品粉末5g,置圆底烧瓶中加15%硫酸50ml,振摇后加氯仿50ml,回流2小时,放冷,滤过,收集氯仿层并回收氯仿至少量,供点样用。吸附剂:硅胶G(上海荧光化学厂)。展开剂:氯仿-丙酮-环己烷(30:30:40);展距16cm。显色剂:25%磷钼酸试液。
(2)鞣质的薄层层析 样品制备:取本品粉末5g,加乙醇冷浸,滤过,滤液供点样用;以儿茶酚、没食子酸作对照。吸附剂:聚酰胺(尼龙6 6g加88%甲酸30ml溶解后,加乙醇24ml铺板,干燥,再用水洗净多余甲酸,干燥备用)。展开剂:甲醇-水-乙酸(80:16:4);展距15cm。显色剂:2%三氯化铁试液与1%铁氰化钾试液。用时等量混合。
展开后先在荧光灯(254nm)下观察,地榆在原点处有一黄色荧光斑点;而长叶地榆在原点处有一淡蓝色荧光斑点。喷显色剂后,均显数个蓝色斑点。