小口径的色谱柱分析很快的
比如2.1*50的小柱，3min就可以分析好，而同样的样品，4.6*150的要13min左右，不过这种小柱子只适合简单样品快速分析。

高效液相最关键的就是泵,色谱柱和检测方法的选用,一般这样的话一般可达到检测要求,其实仪器能否长久的使用和日后的维护有很大的关系.

我觉得关键的地方还是柱子，，，，由柱子基本决定分离效果。。。。。流动相条件是可以自己摸索的。

样品制备的过程十分关键。尤其是做梯度洗脱的时候。系统的管路要保持清洁。

觉得还是流动相的选择比较难，毕竟柱子没几种，而且换柱子成本比较高

感觉现在普通的HPLC前途有些渺茫,高端的都开始在做LC/MS,LC/MS/MS了,普通的也用UPLC来代替HPLC了.HPLC越来越普及，会做的人越来越多，但真正懂行的却越来越少。

我觉得选择合适的流动相很重要.另外做完有缓冲盐的流动相系统清洗非常重要.

我说的也是，不过怎么样维护还是最关键？还有使用方法有关。

从我个人的观点来看，在使用上仪器的维护很重要，我使用的是ｗａｔｅｒｓ的，问题还不是很多，但一旦出现问题，分析就会碰到困难；然后就要注意色谱条件的优化，这就需要在开始建立方法时多优化一些条件。个人观点是最好使用质量好一点的仪器和色谱柱，价格虽然贵一点，但耐用。