色谱柱使用保养

1、    定人定机：为了更好地使用和管理液相色谱仪，实行定人定机的管理较为有效，一方面可以使操作人更熟悉仪器性能，熟悉仪器操作，同时可以加强责任心，便于检查考核。具体操作可单人也可以分组。
2、    实行一机一柱的管理模式，除特殊填料外，一台仪器只领用一支色谱柱，对色谱柱的柱号，初始柱压进行登记。
3、    更换色谱柱，将失效的那支交给保管人，办理领用登记手续。
4、    实验结束后，非必要应不拆柱进行冲洗，确需拆柱冲洗应注意密封，防止干裂失效。
5、    色谱柱冲洗使用的水应采用超纯水（电导率≤2µμs/cm），或重蒸馏水。
6、    反相填料，用5%～10%HPLC级甲醇水冲洗；缓冲溶液、酸性溶液应至少用20倍体积冲洗（250×4.6mm柱子用量约为80ml）→再用甲醇冲洗（0.5 ml/min不少于120分钟）。
7、    确认是否冲洗合格，主要指标要看柱压，在相同温度下，应冲洗到相近的压力，确保冲洗时间是色谱柱再生的关键。
8、    冲洗时应有一定的室温和柱温，在室温太低，且不可克服时，应提高柱温至38℃，以利于强保留成分被洗脱。日常冲洗时，也可高于使用温度5～10℃进行冲洗。
9、    纯水会滋生微生物，尽可能用5%甲醇水溶液，并且在室温高于10度时，当天使用当天配制，不要使用旧瓶，而应尽可能用当天装甲醇的空瓶装水。
10、    缓冲液冲洗时，注意用5%甲醇水溶液过渡，防止结晶，堵塞管路，磨损进样阀。
11、    过滤缓冲液后，应用纯水清洗过滤装置。
12、    水系滤膜绝对不可以过滤有机溶剂，有机系可以过滤水。
13、    随着使用时间或进样次数的增加，会出现柱压升高，色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰，柱效下降的现象，如柱压超过初始压力1Mpa，最好交还我司进行再生。
14、色谱柱最好保留在甲醇或乙腈中，取下时用堵头拧紧，贮存于室温中，防止柱床干裂。
15、造成色谱峰不对称的原因及解决方法
① 筛板堵塞 ② 填料塌陷 ③ 柱头污染 ④ 样品超载
⑤ 样品溶剂不合适 ⑥重金属污染 ⑦ 柱外效应
⑧ 缓冲容量不足或不合适 ⑨ 化学效应
峰拖尾的解决方法：
①    流动相加入30mMol三乙胺（用于碱性化合物）或醋酸胺（用于酸性化合物）。
②    如仍解决不了，可换成二甲基辛胺或醋酸二甲基辛胺。
③    降低进样量至<1μg。
④    柱头污染可用二氯甲烷-甲醇-氢氧化铵（95：4：1）冲洗，或由专业人员拆下清洗。
⑤    减小进样体积。
⑥    缩短管路体积（最佳长度为<20cm,内径为1/16）。
⑦    重金属可用95%0.05M硫酸-甲醇液冲洗。
⑧    水相贮瓶应勤换（最好每天换），或加入少量5-10%甲醇。

南昌辰丰医药科技有限公司
0791-8103497 13870958992
2115011（F）
色谱柱使用保养

1、    定人定机：为了更好地使用和管理液相色谱仪，实行定人定机的管理较为有效，一方面可以使操作人更熟悉仪器性能，熟悉仪器操作，同时可以加强责任心，便于检查考核。具体操作可单人也可以分组。
2、    实行一机一柱的管理模式，除特殊填料外，一台仪器只领用一支色谱柱，对色谱柱的柱号，初始柱压进行登记。
3、    更换色谱柱，将失效的那支交给保管人，办理领用登记手续。
4、    实验结束后，非必要应不拆柱进行冲洗，确需拆柱冲洗应注意密封，防止干裂失效。
5、    色谱柱冲洗使用的水应采用超纯水（电导率≤2µμs/cm），或重蒸馏水。
6、    反相填料，用5%～10%HPLC级甲醇水冲洗；缓冲溶液、酸性溶液应至少用20倍体积冲洗（250×4.6mm柱子用量约为80ml）→再用甲醇冲洗（0.5 ml/min不少于120分钟）。
7、    确认是否冲洗合格，主要指标要看柱压，在相同温度下，应冲洗到相近的压力，确保冲洗时间是色谱柱再生的关键。
8、    冲洗时应有一定的室温和柱温，在室温太低，且不可克服时，应提高柱温至38℃，以利于强保留成分被洗脱。日常冲洗时，也可高于使用温度5～10℃进行冲洗。
9、    纯水会滋生微生物，尽可能用5%甲醇水溶液，并且在室温高于10度时，当天使用当天配制，不要使用旧瓶，而应尽可能用当天装甲醇的空瓶装水。
10、    缓冲液冲洗时，注意用5%甲醇水溶液过渡，防止结晶，堵塞管路，磨损进样阀。
11、    过滤缓冲液后，应用纯水清洗过滤装置。
12、    水系滤膜绝对不可以过滤有机溶剂，有机系可以过滤水。
13、    随着使用时间或进样次数的增加，会出现柱压升高，色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰，柱效下降的现象，如柱压超过初始压力1Mpa，最好交还我司进行再生。
14、色谱柱最好保留在甲醇或乙腈中，取下时用堵头拧紧，贮存于室温中，防止柱床干裂。
15、造成色谱峰不对称的原因及解决方法
① 筛板堵塞 ② 填料塌陷 ③ 柱头污染 ④ 样品超载
⑤ 样品溶剂不合适 ⑥重金属污染 ⑦ 柱外效应
⑧ 缓冲容量不足或不合适 ⑨ 化学效应
峰拖尾的解决方法：
①    流动相加入30mMol三乙胺（用于碱性化合物）或醋酸胺（用于酸性化合物）。
②    如仍解决不了，可换成二甲基辛胺或醋酸二甲基辛胺。
③    降低进样量至<1μg。
④    柱头污染可用二氯甲烷-甲醇-氢氧化铵（95：4：1）冲洗，或由专业人员拆下清洗。
⑤    减小进样体积。
⑥    缩短管路体积（最佳长度为<20cm,内径为1/16）。
⑦    重金属可用95%0.05M硫酸-甲醇液冲洗。
⑧    水相贮瓶应勤换（最好每天换），或加入少量5-10%甲醇。

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谢谢楼主分享……真是非常感谢……