法官
第19楼2007/12/28
油脂脂肪酸甲酯的制备及其气相测定方法
1.脂肪酸甲酯的制备:
1.1适用范围
中性油脂(酸价小于2)
注:若酸价高于2小于10,可加大甲醇钠用量10~20ml。本方法不适用于脂肪酸等高酸价的油脂样品,脂肪酸的酯化制备请参照附录A.
1.1原理
甘油酯在碱性催化剂甲醇钠的作用下与甲醇进行甲酯化
1.2所需仪器
1.2.1加热器。
1.2.2回流冷凝管:具有磨口接头,有效长度200~300mm。
1.2.3磨口平底细颈烧瓶50ML。
1.2.4容量瓶500ML。
1.2.5样品瓶1000ML。
1.2.6量筒10ML一只,20ML一只。
1.3所需试剂
所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水。
1.3.1正已烷或庚烷(若C20以上含量较高时用庚烷萃取较好)
1.3.2甲醇
1.3.3甲醇钠
1.3.4氯化钠
1.3.5水
1.4溶液的配置
1.4.1甲醇钠(0.5Mol/ML)
取13.5g甲醇钠于500ML容量瓶中,用甲醇溶解并定容。
1.4.2氯化钠饱和溶液
取适量的氯化钠于1000ML容量瓶中,加水振荡溶解,可不断加入氯化钠,直到容量瓶底部有大量氯化钠沉淀为止。
1.5操作步骤
1.5.1取油样100mg左右(约2~3滴,工具普通玻璃棒)于50ML烧瓶中。
1.5.2向烧瓶中加入甲醇钠溶液10ML。
1.5.3将冷凝管固定于烧瓶上,并加热至沸腾3~5min(不饱和脂肪酸含量较高时建议从冷凝管顶部通入氮气,氮气含氧量应低于5mg/KG,流速不应过大,防止低碳组分流失)至油滴消失为止。
1.5.4然后从冷凝管顶部加入正已烷10ml,继续煮沸约1min。
1.5.5停止加热,带冷凝管在流水中迅速冷却。
1.5.6冷却后加饱和氯化钠溶液少量并轻摇烧瓶数次,继续加入氯化钠溶液至烧瓶颈口静止30min后备用。
2.气相色谱的测定
2.1色谱条件:
2.1.1GC:Agilent 4890。
2.1.2色谱柱:INNOWAX-30M,柱温:190℃ 保持32mins柱头压=80kpa。
2.1.3 辅助气体H2=12.5psi ,AIR=40psi.
2.1.4进样器温度:270℃,进样:手动进样5ul ,分流比约为100:1(可随意控制,保持定性与测定样品时一致即可)
2.1.5检测器(FID):280℃,采样频率:20Hz.
2.2结果分析
2.2.1定性分析
可用标准样品来确定各组分的保留时间,也可用特性油脂个别组分的差异来逐一定性。
2.2.3定量分析
利用面积百分比来进行粗略定性。若需要知道某组分的准确含量时可使用内标法,内标物可选择C5、C15和C17脂肪酸。