calfstone
第12楼2008/06/22
给点个人意见,供参考.
1、不同型号分光光度计对结果的影响体现在结果的不确定度上面。测量是一个判定真值所在区间的一系列活动。影响肯定存在,在没有量值溯源的保证下,无法判定好与坏。
2、参比只是给我们测定值一个零位,这个零位的给定会影响测定值的精密度(仪器在不同测量范围有不同的精密度),从而影响我们的线性。建议用蒸馏水参比,因为这样可以提供试剂(显色剂)的纯度信息,而用零管无法提供该信息。
3、若样品吸光度为零,带入到方程中求出样品含量为负值。这个现象非常普遍,有时有吸光度带入到方程中求出样品含量也可能为负值。标准曲线是统计意义上的理论曲线,如果考虑到标准曲线引用所引入的不确定度,样品含量的负值可能跟0没有统计学上的差异。如何报告这样的结果以及如何判断截距跟零的统计差别,可以参照数据处理版面的相关介绍。
4、理论上光程跟Abs.有线性关系,这是理论上的东西,实际测量总以统计的方法来描述关系(如最小二乘),如同我们做标准曲线一样的道理。
5、吸光度值非常低,而线性好带来的影响同样是测定值的不确定度增大。简单的比喻就是你测出来的真值范围就比灵敏度高的真值范围要大。结果可能一样,但你在判断该测量结果是否超标的时候,可能犯统计错误的几率就大。
P.S. 对于样品稀释的问题不能一概而论,稀释的效应是改变基体,没有标准参考物质的验证,稀释还是光程改变的好坏无从判定。