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  • pchduan

    第11楼2008/06/22

    讲的太好了,我常常将样品稀释后再测,但影响较大,结果不够理想

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  • calfstone

    第12楼2008/06/22

    给点个人意见,供参考.
    1、不同型号分光光度计对结果的影响体现在结果的不确定度上面。测量是一个判定真值所在区间的一系列活动。影响肯定存在,在没有量值溯源的保证下,无法判定好与坏。
    2、参比只是给我们测定值一个零位,这个零位的给定会影响测定值的精密度(仪器在不同测量范围有不同的精密度),从而影响我们的线性。建议用蒸馏水参比,因为这样可以提供试剂(显色剂)的纯度信息,而用零管无法提供该信息。
    3、若样品吸光度为零,带入到方程中求出样品含量为负值。这个现象非常普遍,有时有吸光度带入到方程中求出样品含量也可能为负值。标准曲线是统计意义上的理论曲线,如果考虑到标准曲线引用所引入的不确定度,样品含量的负值可能跟0没有统计学上的差异。如何报告这样的结果以及如何判断截距跟零的统计差别,可以参照数据处理版面的相关介绍。
    4、理论上光程跟Abs.有线性关系,这是理论上的东西,实际测量总以统计的方法来描述关系(如最小二乘),如同我们做标准曲线一样的道理。
    5、吸光度值非常低,而线性好带来的影响同样是测定值的不确定度增大。简单的比喻就是你测出来的真值范围就比灵敏度高的真值范围要大。结果可能一样,但你在判断该测量结果是否超标的时候,可能犯统计错误的几率就大。
    P.S. 对于样品稀释的问题不能一概而论,稀释的效应是改变基体,没有标准参考物质的验证,稀释还是光程改变的好坏无从判定。

    zhouyuhu 发表: 我最近在用4-氨基安替比林比色法测苯酚含量。想问几个问题,请您多多赐教:
    1 不同型号分光光度计对测量结果有影响吗?
    2 国标上说以蒸馏水为参比液,把零号管的吸光度扣除,做标准曲线。可不可以直接用零号管作为参比溶液?
    3 若样品吸光度为零,带入到方程中求出样品含量为负值怎么办?怎样解释呢?
    4 比色皿的不同光程之间测出值是否成倍数关系?
    5 做标准曲线的吸光度值非常低,但线性很好,可以用吗?

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  • 太白金星

    第13楼2008/06/23

    这是用水作参比的真正意义。他考虑了以试剂空白作参比可能发生变化误差。
    偶记得在多次理论考核中涉及到这个问题。

    zmxorhhxa 发表:第二点 应该是可以 但建议你记一个以纯水为参比的空白样值 每次都查一下如果发现空白发生明显偏差就要找原因了~~

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