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第17楼2008/05/25
看你的流动相,加酸应该是为了使待测物保持中性增强保留,改善峰形的。黄酮类我记得是属于生物碱吧,所以流动相中加酸。你的流动相可以说不算缓冲盐 ,即使是缓冲盐,结束实验的时候先用水冲洗再用有机相冲洗,开始实验的时候应该是先用水,再用流动相平衡,也就是实验开始和结束冲柱子的时候都要事先用水过渡,以免有机相和缓冲盐直接接触造成晶体析出,造成管路和筛板的堵塞或者是密封圈的磨损。所以我觉得“使用前,用100甲醇冲洗30min”是没有必要的,因为在上次实验结束的时候你已经把系统冲洗干净了,再开始实验的时候用水过渡就可以了。
注:过渡用的水最好含5%有机相,卖柱子的说的再好,纯水对一般的C18还是不好的。
以上只是看到以后想到的,所以提了一下。
现在说一下保留时间提前的问题,因为你说柱压波动比较大,所以我怀疑是输送水的泵有问题(吸滤头堵塞或者单向阀有气泡等)导致流速不准,所以当你用水过渡的时候可以观察一下输送水的泵压力是不是稳定,最好测一下流速,看流速准不准;吸滤头堵塞的现象是泵前管路一直有气泡,也就是吸滤头在吸流动相时能吸到气泡(其实是因为吸滤器部分空隙被堵,泵吸液造成负压)。
当然这只是根据现象的一个推测,我们遇到问题的时候总希望能有针对性的找到问题并马上解决,但实际最有效的方法还是我们根据现象一一排查,只要我们有想法和思路能排查就好,就怕想到的都不能解决问题,就郁闷啦。^_^
所以祝好运……