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  • 皑思

    第11楼2008/06/17

    原来只是听所里其他老师说试验结束后用水冲洗柱子中的盐分,再用甲醇溶液冲洗柱子来保证柱子处于不适宜细菌生长的条件,现在听du老师一说,又明白了一点:C18柱在纯水里长时间会导致其倒伏,从而导致组分无有效的保留!
    又学了一招,非常感谢!

    duliuhui 发表:你用的纯水相么?一般的C18柱子在纯水相里长时间会导致C18链(因为疏水性)的倒伏,从而导致组分没有有效的保留,柱子不具备分离能力。经过有机相(甲醇)的活化(再生),C18链重新舒展开来,能与样品相互作用,根据相互作用的不同使不同组分在不同的时间流出,达到分离的目的。
    建议:适当增加有机相的比例,以保持柱子的分离能力,工作结束后,用溶剂冲洗再浸泡过夜。
    另外,215nm,甲醇应该有一定吸收了吧?能否增大波长?或者改用乙腈可减小流动相的吸收。

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  • hplc0729

    第12楼2008/06/17

    受益匪浅!谢谢!

    duliuhui 发表:你用的纯水相么?一般的C18柱子在纯水相里长时间会导致C18链(因为疏水性)的倒伏,从而导致组分没有有效的保留,柱子不具备分离能力。经过有机相(甲醇)的活化(再生),C18链重新舒展开来,能与样品相互作用,根据相互作用的不同使不同组分在不同的时间流出,达到分离的目的。
    建议:适当增加有机相的比例,以保持柱子的分离能力,工作结束后,用溶剂冲洗再浸泡过夜。
    另外,215nm,甲醇应该有一定吸收了吧?能否增大波长?或者改用乙腈可减小流动相的吸收。

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  • myreebok

    第13楼2008/06/17

    样品残留。。。很有可能,因为冲洗以后正常了

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