cjf123
第22楼2008/07/05
有用到盐时,可以先用5%的甲醇冲洗30min,再过渡到80%的甲醇冲洗10-20个柱体积(特别是当最近还要用到此柱时,没有必要用100%甲醇冲洗).如果盐的浓高的话,可以把柱子拆下,用100%水冲洗系统30-60min.如果有Seal-Wash功能的就一定洗下柱塞密封.
柱体积计算公式:V=3.14*r*r*L*0.6
如:4.6*150mm,5vm的柱子,V=3.14*0.23*0.23*15*0.6=1.5ml左右
另外,并不是所有的柱子都不能用100%的纯水冲洗:
当小孔径、端基封口良好的反相填料色谱柱使用接近100%的水为流动相时,有时会发生分离突然丧失及被分析物质保留明显降低或完全不保留的现象,这就是疏水坍塌。此现象是由流动相不浸润固定相表面而致。挽救的办法实现用含大量有机组分的流动相浸润固定相,再用高水含量的流动相进行平衡。由是色谱柱长期储存也会发生此现象。使用内嵌极性基团的反相色谱柱(如Waters SymmetryShield RP色谱柱)或非端基封口的色谱柱(如Waters Resolve色谱柱)也可避免发生坍塌,后面这的两种柱子其实都可以用100% 的纯水冲洗的。
希望对大家有帮助!!!
sepu0898
第27楼2008/07/22
估计会有点问题,根据不同的柱子首先大家都应该明白要用不同的冲洗方法了。如果按照“5%甲醇。。。。。。”这种公式化的做法,那么如何解决特异性的柱子呢?尤其还有有点,即使是缓冲盐溶液,特异性也非常大吧?用“公式”肯定是错误的。
所以,怎么冲洗?问厂家那是最正确的做法!