〓猪哥哥〓
第15楼2008/10/14
峰拖尾、峰宽太宽的问题要根据实际情况判断。一般可以分为四个方面的问题:
(1)色谱柱问题,比如柱效降低、柱中保留了杂质、柱头塌陷或者选择的柱子类型与样品不匹配,应该清洗、再生或更换柱子,可选择封尾良好的柱子。保护柱长时间使用后污染了也会出现同样的情况。另外注意保护柱与分析柱的填料是否匹配。
(2)流动相问题。最常见的是分离酸或碱性样品产生峰拖尾或变宽,调节流动相的pH,或者改变流动相的组成、比例:对酸可以用乙酸或三氟乙酸调节流动相pH为3左右,会有一定效果;也可以试试加三乙胺等改性剂。流动相的选择同色谱柱的性质和类型有关,由于样品性质和类型复杂,没有一个通用的方法可参考,主要根据经验。
(3)样品溶解及进样问题。注意样品溶剂与流动相的极性不要相差太大,特别是反相色谱流动相含大量水的时候。如果样品不能用流动相溶解,就尽量用极性溶剂溶解,可以减少进样体积,保证峰形。再有就是进样不要过载。
(4)仪器问题,一般是死体积太大,好的仪器系统的死体积是非常小的,泵、进样阀、管路(孔径大小有不同规格)、管路接头(接头不匹配易造成死体积增大)以及检测器的检测池中任何故障和部件更换都会影响死体积。例如进样阀被污染或者泄漏、过滤头污染,以及管路孔径过大、管路接头之间不匹配有孔隙。应该设法缩短管路,选择合适的管路孔径以及连接接头,并清洗管路、进样阀、过滤头,把松了的地方拧紧。
另外,检查检测器的设置和流速,采集数据的频率不合理也会影响峰宽,但不会影响峰拖尾,因此不要轻易改变参数。