calfstone
第12楼2009/01/20
吸光度太低,怎么做都是不太精确的。这是指你做出来的结果的不确定度比较大,结果的准确性与否实验室本身没办法评价,必须借助于标准参考物质的比较或实验室间的比对。不过建议按国家标准方法的浓度系列设置来,大家都按这样做,要错大家一起错(有点严重)。最佳建议是调整前处理过程,使样品的吸光度在标准曲线的重心附近。如果你降低浓度系列的范围,表观的结果可能你的标准曲线不太好做,因为低浓度的吸光度随机误差比较大。
按Lanbert-Beer定律的理论推导,在固定5%T仪器相对误差条件下,相对误差最小的吸光度范围在0.4-0.7之间(相对误差<5%)。这样的理论推导多少带来很多误导,因为实际的标准曲线设置要远远比理论推导来得宽,而且也会有吸光度比较小的浓度点,甚至空白。因为我们同样要测定低含量的样品,但我们此时的结果不确定度就比较大了。换句话说,就是对于低含量的物质你必须牺牲你的不确定度。其实现有的国家标准方法的浓度范围内其吸光度基本也在0.2-0.8之间。