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axia92
第26楼2011/11/19
我想问下，一般721/722分光光度计都是4个格，如果用试剂调零之后，我还有空白管、标准管、测试一、测试二，而且测试一和二来自于同一个样本，我能在调零后将试剂取出，再把这四个管放进去测么？还是说必须将试剂留着，将测试一和测试二分两回测？
清水寒烟(sxysky) 发表:1 应以溶剂调节仪器零点
要制作校准曲线，必须先测定标准系列中不同浓度标准液的仪器响应信号值(如吸光度等)。这里首先遇到的是对“零管”响应值的处理。所谓“零管”，是指标准系列中未加被测物质的那一管。有的方法中规定用“零管”对仪器调零，本文认为这是不妥当的，应以溶剂调零。这是因为标准系列中除了被测物质的响应值与其含量之间关系呈现一定的规律外，还存在着除被测物质以外各种因素综合产生的背景响应信号值。零管响应值所反映的就是这样一种背景信号值。在以后各管的测定中，仪器所产生的响应信号值是被测物质响应值与溶液背景响应值两者的叠加。
需要指出的是这个背景响应值在标准系列各管中不是一个恒定的值，往往随着标准系列中各管组成的不同而变异，表现为背景响应值在标准系列中随着被测物质浓度增大而减小，或背景响应值在标准系列中随着被测物质浓度的增大而增大。因此，不能简单地以零管响应值作为背景信号值从标准系列各测定值中扣除，即不能以零管对仪器调零。
从理论上讲，只有在背景响应值不随标准系列中各管浓度的变化而改变的情况下，可以将零管响应值从各管测定值中扣除，这种理想的情况很少碰到。然而，溶剂对响应值的贡献是一个固定值。因此，应该以溶剂对仪器调零。
2 校准曲线应该包括“零管”响应值
从上述分析中可知，零管响应信号值是反映标准系列中除被测物质外各种因素综合作用的背景响应值。它指示着当被测物质含量为零时，校准曲线在纵坐标上的位置。因此，在制作曲线或进行回归时，理应包括这一点。除个别特殊情况外，如在浓度半对数对响应信号值的关系曲线中，由于“0”没有对数，故可不包括这一点
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