楼主换柱子的目的是什么，换的是新柱子嘛

柱子不适用你的色谱条件,QQ690547631

初始有机相比例再提高的话应该不利于分离啊

很多原因：
你的仪器首先没有稳定好，条件不充分，还有可能是柱子问题，很有可能不匹配

楼主换柱子的目的是什么，换的是新柱子嘛[/quote]

是要提高分离度的，08年9月份的

个人认为，应该用粘度比较大的溶剂冲洗柱子，就我们自己的柱子很脏的话，我们就用异丙醇和正己烷冲，冲的时候注意流速不能太大！仅供参考！

第一根是 RX-C18 第二根是SB-c18,都适合做酸性

你这个第二个柱子你走样时间再长些，为什么换不同柱子呢？前面那个峰是残留还是~~重新配个样品看看，是不是样品稳定性有问题？第二根柱子你多久没用了？保管时条件是否合适？都有可能啊

[quote]原文由 03yx2 发表:从总体来看，峰的分离不好。所以条件尚待改善。

1、比较第一和第二的图谱，有两个差异，一个是峰高，一个是峰的种类。

不知道你第二天进针是不是进了2倍的体积，峰面积较高。从而含量比较小的物质成分也在图谱中表现出来了。这样峰比第一个就多了不少。如果进样量是一致的话，那就应该是柱子残留，即冲柱子的时间不够，建议不要倿嗇冲柱子的时间。一般用5%-10%的甲醇冲40min，再用有机相冲洗一个小时。如果残留比较严重可以小流速的再长时间冲洗下。

2、换了一根柱子之后，第一针的图谱是比较标准的。分离度相比另一根柱子第一针稍微好了些。但是第二次的进样图谱完全变形了。但是看到你的峰高，好像进样量是前一针的一半，当你进样量减小，峰高必然降低，又由于你是梯度，存在漂移，这些原因就会使图谱很难看。建议在针与针之间增加柱子的平衡时间。等到柱子残留很低，再进第二针。

3、至于提高分离度。由于不能看到你的保留时间，只能大概的，建议初始有机相比例提高，在10-16分钟走一个等度，等你要的峰全部出来，再加大有机相知道纯有机相冲洗和平衡。[/quo



表示同意！说的很好！

更换柱子后走的第一针不知道是因为没有完全走出来，还是其他原因，但是除了保留时间和峰面积的数据不知道外，单从图谱上看还可以。


提高有机相的比例不是要整个都提高，是提高最初始的比例，你的初始为10，可以提高到15-20，把前面的出峰时间缩短，对于成分较多的可以用等度试试。