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  • 白水山石

    第51楼2009/04/10

    请教两个问题:
    1、长期使用分析纯的甲醇对仪器有没有损害?色谱纯的太贵了。我们分析的样品基本上没有浓度特别低的。
    2、蒸发光散射检测器中有一个NOISE FILTER,它的单位为什么是秒,它是用来消除哪一部分NOISE的?它的工作原理或过程是什么?
    谢谢!

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  • 麦田里的守望者

    第52楼2009/04/10

    溶剂没有处理好的话主动阀过滤垫更换的频率增加,石墨密封垫更换的频率也增加甚至可能会磨损泵的活塞干,pergue阀的过滤小白头更换的频率也将增大,严重的可能脏的东西在柱头累积破坏柱子降低柱效,也可能出现鬼峰,基线不稳,压力波动等

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  • shaweinan

    第53楼2009/04/10

    [div]原文由 ylylttt 发表:  死时间峰的出现大多可能是溶剂峰或进样阀切换时所产生的吸收峰,这句话是存在很大问题的。往往溶剂峰并不是死时间峰,应该说绝大多数情况下都不是。
      对于反相色谱而言,死时间的测量需要用到与固定相几乎不保留的物质(离子化)尿嘧啶、苯黄酸等物质,所测得死时间峰要比溶剂峰提前好多。[/div]

      从死时间的定义来讲,确实是在固定相上不发生任何作用的组分从进样到出峰所用的时间,但从jdg1128发问情况看,他应该不知道死时间的定义,他所指的死时间峰这里很可能是在每次测样时经常可以看到的色谱图中在分析组分前通常是1~2min或2~3min处出的峰,它很少会到5min。如果是这样的话,那么你认为这个峰是什么峰呢?
      退一步讲,这里的很多人使用液相都是做定量分析的,那么在处理样品时最后通常都会有一步定容过程,当然,定容时最理想的溶剂是流动相,但有时因为流动相的溶解能力不是很好,可能还要适当另加某种溶剂,所选用的溶剂除了溶解性能外,还要考虑被测样品组分在其中的稳定性,同时还有一点也非常重要,就是尽可能不与液相色谱的固定相产生相互作用,因为溶剂的量要比被分离和测定组分的量大很多,所以长期下去会极大地影响色谱柱的分离性能和使用寿命。所以从这一角度看,将jdg1128所说溶剂峰视为死时间峰也未尝不可。
      你说对于反相色谱而言,“死时间的测量需要用到与固定相几乎不保留的物质(离子化)尿嘧啶、苯黄酸等物质”,但反相色谱现在主要是指流动相的极性大于固定相极性的液-液分配色谱,它的固定相除了C18、C8外还有其它一些固定相,因此并不一定在任何情况下都非要用这两中物质来测色谱系统的死时间,而且在一般情况下,人们在进行色谱分析时通常也不会特意去加这两种物质来测死时间。
      再者说了,死时间的大小是与液相色谱仪的厂家和型号、梯度淋洗的方式、进样阀到色谱柱及色谱柱的末端至检测器的流路(这实际是决定前两项的因素)、色谱柱的内径及长短、填料粒径的大小、流动相的流速等诸多因素有关。而溶剂峰的保留时间除与上述因素有关外,还与溶剂的性质、色谱柱的固定相、进行色谱分析时所用的流动相等有关。你说你得到的死时间峰要比溶剂峰提前好多,不知是测的什么样品中的什么组分,样品用的是什么溶剂,用的是什么色谱柱和流动相,流速是多少,测出的死时间是多少,溶剂峰的保留时间是多少,各被测组分的保留时间又分别是多少?能将色谱图发上来吗?我的求知欲比较强,很想见识一下。

    jdg1128 发表:我提问:
    HPLC为什么会有死时间峰?
    原文由 shaweinan 发表:  在液相色谱中的死体积应该是色谱柱内填料颗粒间隙和从进样到检测期间色谱柱外管路及连接部分的空间总和。流动相通过这一路径到达检测器所需要的时间被称为死时间。现在随着色谱柱技术的不断提高,色谱柱填料颗粒的粒径越来越小,色谱柱的柱效越来越高,色谱柱的长度会越来越短,特别是超高效液相色谱的出现,由外流路产生的死体积所占的比例将越来越大,可能将会成为死体积的主要部分。
      死时间峰的出现大多可能是溶剂峰或进样阀切换时所产生的吸收峰。

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  • guthouyizh07

    第54楼2009/04/10

    ,上次去考试考了这么一道题,请例举HPLC在环境污染物分析中的应用,请至少写出五种物质。
    晕啊,我当时写不出来。

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  • 〓猪哥哥〓

    第55楼2009/04/10

    引用:HPLC已在环境监测中得到广泛应用,特别适用于分子量大、挥发性低、热稳定性差的有机污染物的分离和分析如多环芳烃、酚类、多环联苯、邻苯二甲酸酯类、联苯胺类、阴离子表面活性剂有机农药、除草剂等

    guthouyizh07 发表:,上次去考试考了这么一道题,请例举HPLC在环境污染物分析中的应用,请至少写出五种物质。
    晕啊,我当时写不出来。

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  • 〓猪哥哥〓

    第56楼2009/04/10

    分析纯的甲醇对仪器有一定得危害。我上次就看到有人用过了,不宜长期使用。否则仪器,柱子很容易就堵塞。色谱甲醇也不贵,十多块左右。

    tianzhen 发表:请教两个问题:
    1、长期使用分析纯的甲醇对仪器有没有损害?色谱纯的太贵了。我们分析的样品基本上没有浓度特别低的。

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  • flytiger603

    第57楼2009/04/12

    做的很不错
    学习一下
    版主辛苦了!

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  • sunpoppy2004

    第58楼2009/04/12

    我有问题请教,请专家指点。
    色谱柱填料的极性、流动相的极性以及待测物质极性之间究竟又怎样的关系?
    这三者该怎样组合才能得到好的分离度与灵敏度?
    谢谢!

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  • shaweinan

    第59楼2009/04/13

      样品中被分离组分的性质与固定相越接近,相互作用就越大,保留时间就越长;与流动相的性质越接近,就越容易洗脱,保留时间就越短。所以说应根据分离分析样品的要求来选择好分离条件。分析的灵敏度则主要是与选用的检测器有关。

    sunpoppy2004 发表:  我有问题请教,请专家指点。
      色谱柱填料的极性、流动相的极性以及待测物质极性之间究竟又怎样的关系?
      这三者该怎样组合才能得到好的分离度与灵敏度?
      谢谢!

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  • 〓猪哥哥〓

    第60楼2009/04/13

    不错。一般选择的是分离样品的性质与固定相性质接近的。如反相色谱分离的主要适合极性小和中等极性的样品,对于极性比较大的样品,一般选择正相色谱来分析,如氨基柱,氰基柱等。

    shaweinan 发表:  样品中被分离组分的性质与固定相越接近,相互作用就越大,保留时间就越长;与流动相的性质越接近,就越容易洗脱,保留时间就越短。所以说应根据分离分析样品的要求来选择好分离条件。分析的灵敏度则主要是与选用的检测器有关。

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