shaweinan
第53楼2009/04/10
[div]原文由 ylylttt 发表: 死时间峰的出现大多可能是溶剂峰或进样阀切换时所产生的吸收峰,这句话是存在很大问题的。往往溶剂峰并不是死时间峰,应该说绝大多数情况下都不是。
对于反相色谱而言,死时间的测量需要用到与固定相几乎不保留的物质(离子化)尿嘧啶、苯黄酸等物质,所测得死时间峰要比溶剂峰提前好多。[/div]
从死时间的定义来讲,确实是在固定相上不发生任何作用的组分从进样到出峰所用的时间,但从jdg1128发问情况看,他应该不知道死时间的定义,他所指的死时间峰这里很可能是在每次测样时经常可以看到的色谱图中在分析组分前通常是1~2min或2~3min处出的峰,它很少会到5min。如果是这样的话,那么你认为这个峰是什么峰呢?
退一步讲,这里的很多人使用液相都是做定量分析的,那么在处理样品时最后通常都会有一步定容过程,当然,定容时最理想的溶剂是流动相,但有时因为流动相的溶解能力不是很好,可能还要适当另加某种溶剂,所选用的溶剂除了溶解性能外,还要考虑被测样品组分在其中的稳定性,同时还有一点也非常重要,就是尽可能不与液相色谱的固定相产生相互作用,因为溶剂的量要比被分离和测定组分的量大很多,所以长期下去会极大地影响色谱柱的分离性能和使用寿命。所以从这一角度看,将jdg1128所说溶剂峰视为死时间峰也未尝不可。
你说对于反相色谱而言,“死时间的测量需要用到与固定相几乎不保留的物质(离子化)尿嘧啶、苯黄酸等物质”,但反相色谱现在主要是指流动相的极性大于固定相极性的液-液分配色谱,它的固定相除了C18、C8外还有其它一些固定相,因此并不一定在任何情况下都非要用这两中物质来测色谱系统的死时间,而且在一般情况下,人们在进行色谱分析时通常也不会特意去加这两种物质来测死时间。
再者说了,死时间的大小是与液相色谱仪的厂家和型号、梯度淋洗的方式、进样阀到色谱柱及色谱柱的末端至检测器的流路(这实际是决定前两项的因素)、色谱柱的内径及长短、填料粒径的大小、流动相的流速等诸多因素有关。而溶剂峰的保留时间除与上述因素有关外,还与溶剂的性质、色谱柱的固定相、进行色谱分析时所用的流动相等有关。你说你得到的死时间峰要比溶剂峰提前好多,不知是测的什么样品中的什么组分,样品用的是什么溶剂,用的是什么色谱柱和流动相,流速是多少,测出的死时间是多少,溶剂峰的保留时间是多少,各被测组分的保留时间又分别是多少?能将色谱图发上来吗?我的求知欲比较强,很想见识一下。