异丙醇反冲1 小时，用甲醇平衡 0.1ml/min 0.2ml/min 0.3ml/min 0.4ml/min 0.5ml/min 0.6ml/min 0.7ml/min 0.8ml/min 0.91ml/min 1.01ml/min 时间你自己定，低流速平衡长些时间,再由高到低平衡。如果还不行就换吧！

换个保护柱试试

柱效降低，可以进行反冲或柱子再生试试，不行只能换柱子了。

1，每个峰都分叉说明柱子塌陷，或污染，需重新更换入口端的填料，或更换新的色谱柱。
2，就这一个峰分叉，说明有两种物质没完全分离，需将流动相中水的比例增加，使之完全分离。

我也遇到过这种情况，我的原因是样品溶剂太强了。换用初始流动相溶解样品后就好了。
今天还遇到另一个情况：样品用短柱（0.39*15 symmetry shield rp18）做峰形很好，换一根长柱（0.46*25 kromasil c-18）后，峰形就分叉了，正在寻求解决ing。。。