不只楼主现在问题解决进展的如何了，有没有在继续的尝试。

看了楼主 也做了不少工作, 都是液相部分的工作, 为什么不检查质谱问题呢?
建议调谐一下质谱 ,有可能是质谱污染和分辨率问题

这个不可能，因为楼主做其他项目正常。

我觉得流动相和定容溶液的可能性比较大。尤其是定容溶液。我以前也做过这类实验。比较了用乙腈稀释的标准品溶液和乙腈混合甲酸水（乙腈：0.5%甲酸水=10：90）稀释的，前者出来的峰的峰形要差很多很多，响应倒是提高了不少。可能跟溶剂的溶解度和极性有关。在分析农药残留的时候，乙腈比例过高，也会导致峰形很差，甚至拖尾。

谢谢大家的帮助！经过连续N天的奋战，终于把问题解决了，最终换了一根SB-C18的柱子做出来了，峰型很好，如新窦上传图片的峰型。原先试的那几根新柱子不知道为什么就是不行，有一根还是同一型号的，都是没怎么用过的，分析其他项目峰型都还好，就是做沙星类峰型不好，难道当初给我的柱子就是用过的柱效下降了的吗？还得到一个结论就是甲酸对保留时间有一定得影响，在乙腈中也添加0.1%甲酸与不添加比较，保留时间略有差别，慢0.1-0.2min左右，响应面积大一点。另外，想请教一下，色谱柱不用时大家都是怎么保护的啊？特别是几个月不用的话。

用纯的有机相封存啊

用纯的有机相封存啊[/quote]

柱子里充满有机相就行了吧？不需要再泡在装有机溶剂的缸里吧，如果很久不用的话。

我觉得，很久不用的话，最好用高比例的有机试剂，如95%甲醇水或者乙腈水。我个人不提倡用纯有机溶剂。因为纯有机溶剂封存，气温稍高，就会有一定程度的胀柱问题。

不需要再泡在装有机溶剂的缸里。