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  • 守单车的蜻蜓

    第11楼2009/08/10

    其中液相色谱又根据流动相和固定相极性差别分为正相色谱法和反相色谱法。流动相的极性大于固定相的极性的成为反相色谱法;流动相的极性小于固定相的极性的成为正相色谱法。
    反相色谱法是应用最广的色谱法,主要用于分离非极性至中等极性的各类分子型化合物,因为键合相表面的官能团不流失,溶剂的极性可以在很大范围内调整,因此应用范围很宽。由它派生的反相离子对色谱法与离子抑制色谱法,可以分离有机酸、碱、盐等离子型化合物。用反相液相色谱法,可以解决80%左右的液相色谱课题。
    在作正相洗脱时,流动相的极性增大,洗脱能力增加,K减小,t减小;反之k与t增大。分离结构相近的组分时,极性大的组分后出柱

    agnz1106 发表:(1) 按两相状态分类:以流动相状态为标准划分类型。用气体作为流动相的色谱法称为气相色谱法Gaschromatography (GC);用液体作为流动相的色谱法称为液相色谱法 Liquid chromatography LC.

      (2) 按样品组分在两相间的分离机理分类:利用组分在流动相和固定相之间的分离原理不同而命名的分类方法。包括,吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法、凝胶渗透色谱法、离子色谱法和超临界流体色谱法等十余种方法。

      (3) 按色谱技术分类:为提高组分的分离效能和高选择性,采取了许多技术措施,根据这些色谱技术的性质不同而形成的色谱分类法。例如,程序升温气相色谱法、反应气相色谱法、裂解气相色谱法、顶空气相色谱法、毛细管气相色谱法、多维气相色谱法、制备色谱法等七种方法。

      (4) 按固定相存在形态分类:根据固定相在色谱分离系统中存在的形状,可分为柱色谱法(其中又含填充柱色谱法和开管柱色谱法)、平面色谱法(其中又含纸色谱法和薄层色谱法)等九种方法。

      (5) 按色谱动力学分类:根据流动相洗脱的动力学过程不同而进行分类的色谱法,例如,冲洗色谱法、顶替色谱法和迎头色谱法等。

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  • 羽香

    第12楼2009/08/10

    (一)按两相物理状态分
    1. 气相色谱法 (gas chromatography 简称 GC)用气体作流动相的色谱法。

    2. 液相色谱法 (liquid chromatography 简称 LC)用液体作流动相的色谱法。

    3. 超临界流体色谱法 (SFC)
    用超临界状态的流体作流动相的色谱法。
    超临界状态的流体不是一般的气体或流体 , 而是临界压力和临界温度以上高度压缩的气体 , 其密度比一般气体大得多而与液体相似 ,
    故又称为 “ 高密度气相色谱法 ”

    (二)按分离原理分
    1. 吸附色谱法( adsorption chromatography ):
    根据吸附剂表面对不同组分物理吸附能力的强弱差异进行分离的方法。
    如:气一固色谱法、液-固色谱法——吸附色谱
    2. 分配色谱法 (partition chromatography ):
    根据不同组分在固定相中的溶解能力和在两相间分配系数的差异进行分离的方法。
    如:气-液色谱法、液-液色谱法——分配色谱
    3. 离子交换色谱法(ion exchange chromatography )
    根据不同组分离子对固定相亲和力的差异进行分离的方法。
    4. 排阻色谱法( size exclusion chromatography):
    又称凝胶色谱法 (gel chromatography ),
    根据不同组分的分子体积大小的差异进行分离的方法。
    其中:以水溶液作流动相的称为凝胶过滤色谱法 ;以有机溶剂作流动相的称为凝胶渗透色谱法。
    5. 亲合色谱法 (affinity chromatography)
    利用不同组分与固定相共价键合的高专属反应进行分离的方法。
    (三)按固定相的形式
    1. 柱色谱法(column chromatography ):
    固定相装在柱中 , 试样沿着一个方向移动而进行分离。
    包括 填充柱色谱法:固定相填充满玻璃管和金属管中
    开管柱色谱法:固定相固定在细管内壁(毛细管柱色谱法)
    2. 平板色谱法 (planer chromatography ):
    固定相呈平面状的色谱法。
    包括 纸色谱法: 以吸附水分的滤纸作固定相;
    薄层色谱法:以涂敷在玻璃板上的吸附剂作固定相。

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  • 羽香

    第13楼2009/08/10

    (1) 按两相状态分类:以流动相状态为标准划分类型。用气体作为流动相的色谱法称为气相色谱法Gaschromatography (GC);用液体作为流动相的色谱法称为液相色谱法 Liquid chromatography LC.
    (2) 按样品组分在两相间的分离机理分类:利用组分在流动相和固定相之间的分离原理不同而命名的分类方法。包括,吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法、凝胶渗透色谱法、离子色谱法和超临界流体色谱法等十余种方法。
    (3) 按色谱技术分类:为提高组分的分离效能和高选择性,采取了许多技术措施,根据这些色谱技术的性质不同而形成的色谱分类法。例如,程序升温气相色谱法、反应气相色谱法、裂解气相色谱法、顶空气相色谱法、毛细管气相色谱法、多维气相色谱法、制备色谱法等七种方法。
    (4) 按固定相存在形态分类:根据固定相在色谱分离系统中存在的形状,可分为柱色谱法(其中又含填充柱色谱法和开管柱色谱法)、平面色谱法(其中又含纸色谱法和薄层色谱法)等九种方法。
    (5) 按色谱动力学分类:根据流动相洗脱的动力学过程不同而进行分类的色谱法,例如,冲洗色谱法、顶替色谱法和迎头色谱法等。

    液相色谱法的分类详解
    1、按溶质在两相分离过程的物理化学原理分类:
      (1)吸附色谱(Adsorption Chromatography)用固体吸附剂作固定相,以不同溶剂作流动相,依据样品中各组分在吸附剂上吸附性能的差别来实现分离。
      (2)分配色谱(Partition Chromatography)用载体在固相基体上的固定液作固定相,以不同极性溶剂作流动相,依据样品中各组分在固定液上分配性能的差别来实现分离。根据固定相和液体流动相对极性的差别,又可分为正相分配色谱和反相分配色谱。当固定相的极性大于流动相的极性时,可称为正相分配色谱或简称正相色谱(Normal Phase Chromatography);若固定相的极性小于流动相的极性时,可称为反相分配色谱或简称反相色谱(Reversed Phase Chromatography)。
      (3)离子色谱(Ion Chromatography) 用高效微粒离子交换剂作固定相,以具有一定PH值的缓冲溶液作流动相,依据离子型化合物中各离子组分与离子交换剂上表面带电荷基团进行可逆性离子交换能力的差别而实现分离。
      (4)体积排阻色谱(Size Exclusion Chromatography) 用化学惰性的多孔性凝胶作固定相,按固定相对样品中各组分分子体积阻滞作用的差别来实现分离。
      (5) 亲和色谱(Affinity Chromatography) 以在不同基体上,键合多种不同特征的配体作固定相,用不同PH值的缓冲溶液作流动相,依据生物分子(氨基酸、肽、蛋白质、核酸、核苷酸、核酸、酶等)与基体上键连的配位体之间存在的特异性亲和作用能力的差别,而实现对具有生物活性的生物分子的分离。
    2 按溶质在色谱柱洗脱的动力学过程分类:
      (1)洗脱法(elution method) 又称淋洗法,如将含三组分的样品注入色谱柱,流动相连续流过色谱柱,并携带样品组分在柱内向前移动,经色谱分离后,样品中不同组分依据与固定相和流动相相互作用的差别,而顺序流出色谱柱。
      (2)前沿法(frontal method)又称迎头法,如将含三个等量组分的样品溶于流动相,组成混合物溶液,并连续注入色谱柱,由于溶质的不同组分与固定相的作用力不同,则与固定相作用最弱的第一个组分首先流出,其次是第二个组分与第一个组分混合流出,最后是与固定相作用最强的第三个组分与第二个和第一个组分混合流出。此法仅第一个组分纯度较高,其他流出物皆为混合物,不能实现各个组分的完全分离,现已较少采用。
      (3) 置换法(displacement method) 又称顶替法,当含三种组分的混合物样品注入色谱柱后,各组分皆与固定相有强作用力,若使用一般流动相无法将他们洗脱下来,为此可使用一种比样品组分与固定相间作用力更强的置换剂(或称顶替剂)作流动相,当它注入色谱柱后,可迫使滞留在柱上的各个组分,依其与固定相作用力的差别而依次洗脱下来,且各谱带皆为各个组分的纯品。置换法现已在大规模制备色谱中获广泛应用,在生物大分子纯品制备中取得良好的效果。

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  • 小卢

    第14楼2009/08/13

    大家停止不前了,
    可以发表一下自己对色谱的看法啊.还有不明白的问题也可以提出啊!!!

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  • 小卢

    第15楼2009/08/13

    再次抛块砖头,看能不能引块玉过来;
    电泳法,分为:
    纸电泳法、
    醋酸纤维素薄膜电泳法、
    琼脂糖凝胶电泳法、
    聚丙烯酰胺凝胶电泳法、
    SDS(十二烷基硫酸钠)-聚丙烯酰胺凝胶电泳法

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