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谢谢楼上热心帮助的兄弟！
经过检查，排除了系统压力的问题，应该是色谱柱管路之后的问题，反冲柱子后压力确实下降比较明显，再后来怀疑了色谱柱后的接头处管道有堵，更换了，然后系统洗完后，压力基本恢复了以前洗柱子的压力，不过还没有做样品还不知道是否已经洗干净了.
我用的是5%甲醇--10%甲醇--40%甲醇--70%甲醇各1h，100%甲醇4h封柱，请教下这样洗的方法会不会太繁琐了呀？平常大家都是用几个梯度来洗缓冲盐或反相柱子的？

可以分段检查，确定那个地方堵了再看如何处理