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  • 提拉米苏

    第22楼2009/08/25

    可能是没有恒温或者梯度走完后没有平衡时间的原因

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  • shalin

    第23楼2009/08/25

    楼主：从你的情况看。既然你都排除了这么多的可能因素。那么依我看。估计是你的液相泵的比例阀出了问题。平时使用是一定要做好泵的维护。由于时间关系。就给你说这些。

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  • icefire2009

    第24楼2009/08/25

    你给我一个吧

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  • yuan_log

    第25楼2009/08/25

    猪哥哥的解释比较中肯了，呵呵。看了后面的帖子发现楼主的一些问题，想在这里问一下：
    1、似乎没有在针与针之间进行有效平衡，楼主在针与针之间如何（洗脱条件）进行平衡的，平衡多长时间（体积）？
    2、洗脱条件比较奇怪，前面6分钟似乎属于无意义洗脱，因为你的目标物质没有那个时间出来的，6－－7分钟流动相变化相当剧烈，建议调缓些。

    03yx2 发表:先别急。
    液相碰到不能重复的也是较常见的。
    要重现就一定要保持条件重现。包括：色谱柱平衡情况，柱温，流动相准确性、PH精确度等。
    你的实验变数确实很大。建议首先更换一根色谱柱来试试；如果不行，更换一台仪器试试。如果上述都没有问题，需要从仪器本身来看。首先需要注意的是你的流动PH值一定要测准了，PH不同，影响是很大的。还有乙酸铵溶剂分解，一定注意密封，且保持温度在20几度左右。梯度因为没有发图，应该问题不大。还有注意的是柱子一定要密封在柱温箱中。最后就是柱子平衡时间长些。同时注意系统压力，可能哪里堵了导致保留时间变化也是可能的。

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  • zlzlp2009

    第26楼2009/08/25

    请问下这个针与针之间怎么洗脱,我不是很懂?没尝试过.我只是在进针前跑30MIN的基线,后进针时,针与针之间用液体冲洗几遍!这样符合要求嘛???
    后面的梯度我也在怀疑,我为什么要用梯度呢?直接用76/24的比例不就好拉,都在那时候出峰呢?可师姐之前这么做的,我也就没管那么多,现在就请教下你为什么呢?

    yuan_log 发表:猪哥哥的解释比较中肯了，呵呵。看了后面的帖子发现楼主的一些问题，想在这里问一下：
    1、似乎没有在针与针之间进行有效平衡，楼主在针与针之间如何（洗脱条件）进行平衡的，平衡多长时间（体积）？
    2、洗脱条件比较奇怪，前面6分钟似乎属于无意义洗脱，因为你的目标物质没有那个时间出来的，6－－7分钟流动相变化相当剧烈，建议调缓些。

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  • 〓猪哥哥〓

    第27楼2009/08/26

    针与针之间用初始流动相比例平衡。
    如果后面还有杂质，可以设置梯度冲出，然后再用初始流动相比例平衡

    zlzlp2009 发表:请问下这个针与针之间怎么洗脱,我不是很懂?没尝试过.我只是在进针前跑30MIN的基线,后进针时,针与针之间用液体冲洗几遍!这样符合要求嘛???
    后面的梯度我也在怀疑,我为什么要用梯度呢?直接用76/24的比例不就好拉,都在那时候出峰呢?可师姐之前这么做的,我也就没管那么多,现在就请教下你为什么呢?

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  • zlzlp2009

    第28楼2009/08/26

    谢谢大家的帮助,我问题已经解决拉!
    主要是设置的问题
    跑完后没有回到原来的初始浓度!

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