首先 非常感谢您的解答
有个疑问 A%：B% 是 甲醇：水?还是 水比甲醇？

这里 是对你的疑问的回复
希望通过我的回复 您能给与我更好的解答
1 本身色素是 有机物还是 无机物 我未知 不知有什么判断方法？
2 它易溶于水和 甲醇 所以 我用硅胶层析时，用的 是 氯仿：甲醇按照全氯仿，10：1，8：1，5：1 这么个 梯度来的 上面的图形 大都是 5：1 浓缩后 用水复溶的
3 我用水溶解 主要是 因为 要再用C18（43~60um）层析 所以 用水溶解
（图一时 我用20%甲醇 层析的图片 没浓缩 所以很低浓度，从中看出 我应该用5%火10%甲醇 先洗 或许效果好些）
4 我做了空白了 可以 基本判断不是 溶剂缝了
5 DAD 惭愧 不是很明白。。
6 之前 我做过 梯度的
是 10%甲醇起
1 10%
2 20%
15 95%
17.5 95%
19 100%
21 100%
出现的图形 为下图2 基本上 集中在中间了
我目的 就是分得一到两种物质 就达到目标了
所以 我选择极性低的 60%甲醇 才出现了 你看到的图片
至于 你后面35min 又变成 25：75 我没用用 下次 采用你的建议 看看

我的色素 在酸性条件下 溶解很好很漂亮颜色
碱性下 浑浊了 我想 应该 用1%甲酸吧?
最后一个问题 1%磷酸 是 磷酸直接配置？还是 用磷酸盐呢？
我 初次作 液相 有些问题可能问的很没水平 请勿见笑

谢谢 你的帮助

接上 你看看 我刚刚发的 图一 4.1min 和 6.1min 这两个 按照 你的解释 是不是 4.1min的 是 甲醇的溶剂峰呢？ 因为 我 进样时 没浓缩 含20%甲醇
在一个倒峰 是 水的？

是4.5min

应助达人

有时流动相只调PH，如加入1%甲酸等，有时加入磷酸二氢钾再调PH，流动相的组成不一样，楼上的梯度我觉得比例变化太大，把甲醇按成乙腈试试，比例变化小一点。