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第14楼2009/12/11
毛细管电泳对样品溶液的理想要求不但要求溶解样品时使用与缓冲液浓度、PH值相同,而且还应该是样品的浓度尽量低。这种要求的原因是为了保证分离体系的稳定性和高度重现性。因为只有这样不论样品迁移到哪里样品的溶解状态不变,样品带电荷状态不变,其周围溶液的离子强度保持稳定,同时高压电场在整个毛细管中分部均匀。
如果使用不同的浓度、pH溶液,迁移中样品带电状态会改变从而影响电泳,离子强度改变影响电渗流,电场分布是不均匀的也就是局部电场强度不同影响全部电泳参数,这些影响都放在一切,想想它会有多复杂。所以使用运行缓冲溶液的样品一般讲结果的重现性和稳定性都很好,故能使用应尽可能使用。
一般讲样品使用和运行缓冲溶液不同状态的溶液都会影响峰形,会形成前伸峰或拖尾峰,也就是说影响峰的不对称状况。
但在一些电泳特殊技术中往往故意不遵循这一原则,常见使用比运行缓冲溶液浓度低的溶液溶解样品,最常见用水。这是为了进样时在进样区带上获得一个高的电压分配(因为电阻大了嘛),让样品快速迁移,进入缓冲溶液区后场强下降,迁移速度减慢,从而获得了样品在线浓集的效果,样品区带减小,得到的峰尖锐强度好。但这些技术都要考虑样品是否析出,会否变形,电荷变化强度等多种问题,不是普遍适宜的方法。